本文關鍵詞：沉默Robo基因對人膀胱移形上皮癌細胞T24增殖的影響

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【摘要】：【目的】研究Robo蛋白在人膀胱移形上皮癌細胞(T24)中的表達及沉默Robo基因對T24細胞增殖的影響�！痉椒ā繉嶒灧譃閮山M,對照組(不轉染載體)和轉染組(轉染復合載體),每組20例。對照組體外培養(yǎng)T24細胞,用免疫組織化學、免疫熒光和蛋白質印跡檢測是否有Robo蛋白的表達及其表達亞型;轉染組利用RNA干擾技術,尋找表達基因的沉默位點,構建合理的表達載體,轉染T24細胞,免疫熒光化學觀察細胞轉染結果,蛋白質印跡來檢測該表達基因沉默后蛋白表達的變化,MTT檢測該表達基因沉默后細胞存活率變化�！窘Y果】1免疫組化和免疫熒光檢測顯示T24細胞中有Robo1和Robo4表達,且表達差異無統(tǒng)計學意義(P=0.363和P=0.241),而正常膀胱移行上皮細胞中無表達,蛋白質印跡證實了免疫組化結果(P=0.205)。2沉默Robo基因后,T24細胞中Robo1和Robo4的表達受到抑制,尤其是Robo1的表達幾乎受到全部抑制(免疫熒光P=0.002,蛋白印跡P=0.0001),MTT法檢測顯示Robo1干擾組細胞的存活率明顯下降,與對照組及Robo4組相比差異有顯著性(分別為P=0.012和P=0.023)。【結論】T24細胞中存在Robo1和Robo4兩種蛋白受體,沉默Robo基因后,Robo1的表達和T24細胞的存活率明顯下降。
【作者單位】： 廣東藥科大學基礎學院;佛山市南海區(qū)第四人民醫(yī)院泌尿外科;河南大學附屬淮河醫(yī)院泌尿外科;
【關鍵詞】： 人膀胱形上癌T細胞 Robo蛋白 免疫熒光 免疫組化 蛋白質印跡 RNA干擾
【基金】：廣東省“4百十”工程人才培養(yǎng)項目(2050205F-43-03)
【分類號】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿外科常見的惡性腫瘤,病因不明。膀胱癌在我國泌尿系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率和死亡率均居首位,隨著社會老齡化程度加劇,其發(fā)病率、死亡率呈逐年上升趨勢[1]。Slits是一種分泌型細胞外基質蛋白,在哺乳動物體內存在Slitl、Slit2、Slit3三種亞型,即Slit1、Slit2和Slit3,三者均

【相似文獻】

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1 易西南;軸突導向因子Slit及其受體Robo在損傷周圍神經(jīng)的表達差異及其功能[D];中南大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 姚獅章;Robo蛋白在膀胱癌表達的檢測及沉默Robo基因對腫瘤細胞影響的研究[D];廣東藥學院;2014年

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本文編號：556418