目的:建立骨髓移植TRAMP小鼠前列腺癌動物模型,初步探討骨髓來源干細胞與前列腺癌發(fā)生的關系,為揭示前列腺癌及各種上皮癌癥發(fā)生機制提供基礎。方法:對TRAMP小鼠進行基因型鑒定和SV40T抗原免疫組化。20只C57BL/6 N小鼠按接受γ放射線¹³⁷Cs照射劑量的不同分為4組,評估不同照射劑量對C57BL/6N小鼠的影響,擬定清髓性照射劑量。6周齡綠色熒光蛋白（GFP）的C57BL/6J轉基因小鼠和同品系C57BL/6N普通小鼠作為骨髓細胞供體,6-8周齡TRAMP轉基因小鼠15只作為受體。手術分離GFP小鼠肱骨及股骨,撕去肌肉,剪去骨骺端,沖洗骨髓腔獲得骨髓細胞,裂解紅細胞后冰上備用。受體小鼠接受致死劑量的γ放射線¹³⁷Cs照射,放射劑量為8.5Gy,劑量率為0.708Gy/min,照射結束后2小時內每只小鼠球后注射2×105骨髓單個核細胞。接受骨髓移植5周后,嵌合體小鼠骨髓重建情況經(jīng)流式細胞儀檢測確認模型建立成功。受體鼠于SPF環(huán)境飼養(yǎng)至28周時,20只小鼠全部處死,分離骨髓細胞,進一步確認骨髓移植模型建立成功。分離前列腺組織行石蠟包埋,經(jīng)...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?６周齡ＧＦＰ綠色炎光蛋白小鼠’??１?丄２?６？８?周齡（體重?１８？２２ｇ）清潔雄性?ＴＲＡＭＰ?（Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?Ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ??

位論文前列腺癌與骨髓來源干細胞關系對象和方法??重?１８ｇ）綠色巧光蛋白（ＧｒｅｅｎＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?Ｐ７ＢＬ／６Ｊ－ＴｇＮ?（ｃｈｉｄｃｅｎｐ－ａｃｔｉｎ－ＥＧＦＰ）?ＺＬＦ正Ａ５７ＢＬ／６Ｎ為骨髓供體（購自中國醫(yī)學科學潔級環(huán)境，分籠飼養(yǎng)，每５只一籠，飼養(yǎng)屯、清潔區(qū)動物層....

圖２：?ＴＲＡＭＰ小鼠??１．２主要儀器??

’??１?丄２?６？８?周齡（體重?１８？２２ｇ）清潔雄性?ＴＲＡＭＰ?（Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?Ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ??ｏｆ化ｅ?Ｍｏｕｓｅ?Ｐｒｏ巧ａｔｅ）小鼠（圖２）?１５只和２０只同品系普通小鼠Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ?（購??自北京維通利華實驗動物技術有限公司），８？口周....

圖１；?ＴＲＡＭＰ小鼠基因型鑒定ＰＣ艮結果??

內參序列?目標序列??圖１；?ＴＲＡＭＰ小鼠基因型鑒定ＰＣ艮結果??１．２?ＳＶ４０免疫組織化學染色??ＴＲＡＭＰ動物模型，通過轉基因方法將受雄激素調控的Ｐｒｏｂａｓｉｎ啟動子結合??猴空泡病毒４０?（ＳＶ４０）?Ｔ抗原轉入小鼠，特異性誘導小鼠前列腺發(fā)生腫瘤。大??Ｔ抗原（Ｔａｇ....

圖2:前列腺原位SV40免疫組織化學染色(A:zoox;s:4oox}

０１ｊ??６５?７０?巧?８０?８Ｓ?如?９?６５?７?日?７５?如?８５?ＳＯ?９??［ｒ＆ｍｐｅｆａｔｕｉｅ｜?［ｆｅｍｐｅｆａｔｕｒｅｌ??內參序列?目標序列??圖１；?ＴＲＡＭＰ小鼠基因型鑒定ＰＣ艮結果??．２?ＳＶ４０免疫組織化學染色??ＴＲＡＭＰ動物模型，通過轉基因方....

本文編號：4033410