目的:驗證鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)是通過降低血清雄激素水平導致自噬異常激活,同時探討DBP致子代大鼠尿道下裂發(fā)生的具體機制。方法:將孕鼠隨機分為DBP染毒組與對照組,并于妊娠期14-18天通過灌胃的方式,分別用DBP(750 mg/kg/天)飼養(yǎng)DBP染毒,用等量花生油飼養(yǎng)對照組。依照此方法成功構(gòu)建了子代新生大鼠尿道下裂模型。采集子鼠生殖結(jié)節(jié)(GT)用福爾馬林保存,用免疫組織化學(IHC)染色觀察生殖結(jié)節(jié)組織中自噬水平,即LC3B及Beclin1表達水平;在子鼠麻醉后采集血液標本,用放射免疫分析方法觀測子鼠血清睪酮水平。在原代大鼠尿路上皮細胞(PUECs)基礎上,用Western印跡方法檢測有無雙氫睪酮(DHT)對PUECs中LC3I、LC3II及Beclin1表達水平影響。結(jié)果:DBP染毒組尿道下裂發(fā)生率為42.3%,對照組子代無尿道下裂。DBP染毒組子代GT組織中自噬表達較對照組明顯增加。DBP染毒組(n=10)較對照組中血清睪酮水平有明顯差異(n=10)(P<0.05)。體外研究表明DHT缺乏組Beclin1及LC3蛋白轉(zhuǎn)化率水平較對照組升高。結(jié)論:孕期暴露于DBP可以誘...

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【文章目錄】：
前言
1 材料和方法
    1.1 動物和暴露設計
    1.2 抗體和試劑
    1.3 細胞培養(yǎng)
    1.4 免疫組化
    1.5 蛋白質(zhì)測定和Western印跡
    1.6 放射免疫分析
    1.7 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
    2.1 孕期暴露于DBP成功構(gòu)建子代雄鼠尿道下裂模型
    2.2 DBP誘導子鼠GT組織中自噬發(fā)生
    2.3 DBP致使子代血清睪酮濃度下降
    2.4 雄激素缺乏促使自噬發(fā)生
3 討論



本文編號：3970194