發(fā)布時(shí)間：2024-04-19 21:27

　　目的：探討鎂離子濃度對(duì)高鈣、高磷誘導(dǎo)的大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(RVSMC)鈣化的影響,并了解鎂離子能否通過抑制RVSMC向成骨樣細(xì)胞分化、減少其凋亡,從而抑制RVSMC鈣化。 方法：體外培養(yǎng)RVSMC,以CaCl2,NaH2PO4, MgSO4調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中鈣(Ca)、磷(Pi)、鎂離子(Mg2+)濃度,于培養(yǎng)的不同時(shí)間點(diǎn)用鄰甲酚酞合酮法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣含量,Real Time PCR法檢測(cè)RVSMC的cbfa-1及a-SMA mRNA的表達(dá),MTT法檢測(cè)RVSMC凋亡情況。 結(jié)果：1.高鈣組、高磷組培養(yǎng)的RVSMC在第7、10、14天時(shí)細(xì)胞內(nèi)鈣含量顯著高于正常鈣、磷組(P<0.01)。高鈣組、高磷組培養(yǎng)第14天時(shí),RVSMC的a-SMA mRNA表達(dá)均明顯低于正常鈣、磷組(P<0.05); cbfa-1mRNA水平明顯高于正常鈣、磷組(P<0.05)、細(xì)胞凋亡率顯著高于正常鈣、磷組(P<0.01)。 2.不同濃度鎂離子分別作用于高鈣、高磷培養(yǎng)的RVSMC7、14天,RVSMC內(nèi)鈣含量隨培養(yǎng)基中鎂離子濃度的上升而下降(P<0.05),呈劑量依賴性。高鎂(2.0...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
縮略詞
1 緒論
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)主要試劑及耗材
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑的配置
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.2 細(xì)胞傳代
        2.2.3 細(xì)胞凍存
        2.2.4 免疫熒光染色法鑒定細(xì)胞
        2.2.5 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.6 大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣含量測(cè)定
        2.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.8 MTT法測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 RVSMC形態(tài)及免疫熒光染色細(xì)胞鑒定結(jié)果
    3.2 各組RVSMC內(nèi)鈣含量的變化
    3.3 不同濃度鈣、磷、鎂培養(yǎng)的RVSMC中cbfa-1、α-SMAmRNA表達(dá)情況
    3.4 不同濃度鈣、磷、鎂培養(yǎng)的RVSMC凋亡情況
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3958401