目的:本研究通過構(gòu)建高尿酸細(xì)胞模型,通過Nrf2誘導(dǎo)劑SFN進(jìn)行干預(yù),觀察激活Nrf2/HO-1信號通路對腎小管上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響,并探討Nrf2/HO-1信號通路在高尿酸血癥促進(jìn)慢性腎臟病中的保護(hù)作用和機(jī)制。方法:在本次實(shí)驗研究中,我們將腎小管上皮細(xì)胞分配為8組,各組分別如下:A組:正常腎小管上皮細(xì)胞,用1640培養(yǎng)基培養(yǎng)48小時,無尿酸及SFN添加;B組:于1640培養(yǎng)基中加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時;C組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至300umol/L,并培養(yǎng)48小時;D組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至300umol/L,并同時加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時;E組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至500umol/L,并培養(yǎng)48小時;F組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至500umol/L,并同時加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時;G組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至700umol/L,并培養(yǎng)48小時;H組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗細(xì)胞
        2.1.2 主要設(shè)備及耗材
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要溶液配制方法
    2.2 實(shí)驗方法
        2.2.1 實(shí)驗分組
        2.2.2 細(xì)胞模型構(gòu)建方法
        2.2.3 CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞活力及增殖
        2.2.4 ROS的檢測
        2.2.5 MDA的檢測
        2.2.6 SOD的檢測
        2.2.7 HK2細(xì)胞的培養(yǎng)方法
        2.2.8 細(xì)胞總蛋白、細(xì)胞質(zhì)/核蛋白的提取
        2.2.9 蛋白濃度的測定(BCA法)
        2.2.10 蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗)
        2.2.11 細(xì)胞免疫熒光步驟
        2.2.12 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    3.1 SFN及不同濃度尿酸對腎小管上皮細(xì)胞活力的影響
    3.2 不同濃度尿酸對腎小管上皮細(xì)胞ROS的影響
    3.3 SFN及不同濃度尿酸對腎小管上皮細(xì)胞中MDA的影響
    3.4 SFN及不同濃度尿酸對腎小管上皮細(xì)胞中SOD的影響
    3.5 SFN處理后增加了Nrf2蛋白向細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)移
    3.6 各組細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核中Nrf2的蛋白表達(dá)水平
    3.7 各組總蛋白中HO-1的蛋白表達(dá)水平
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞對照
致謝



本文編號：3954807