背景:膀胱粘膜上皮除了發(fā)揮傳統(tǒng)的屏障功能外,近年來研究發(fā)現(xiàn)還表達(dá)多種感受性離子通道和受體,例如TRP通道、Pannexin 1通道、Piezo 1通道、及膽堿能受體、嘌呤能受體等,能夠感受機械、化學(xué)、溫度刺激,并釋放ATP、乙酰膽堿(Ach)、NO等介質(zhì)及多種神經(jīng)生長因子和細(xì)胞因子。因而,膀胱粘膜被認(rèn)為是一個感覺器官。生理情況下,膀胱粘膜上皮能夠感受膀胱充盈的機械刺激,上皮感受機械刺激的機制近年來受到很大的關(guān)注。有研究表明,膀胱充盈過程中粘膜上皮受到機械牽張刺激,導(dǎo)致胞內(nèi)Ca2+的升高及ATP的釋放,進(jìn)而激活感覺末梢上的P2X3受體,導(dǎo)致感覺神經(jīng)的興奮是膀胱感覺產(chǎn)生的重要機制。但目前膀胱粘膜上皮感受機械刺激誘發(fā)胞內(nèi)Ca2+升高的細(xì)胞及分子機制尚不清楚。在粘膜上皮表達(dá)的機械感受TRP通道中,以TRPV4表達(dá)最豐富。有研究認(rèn)為TRPV4在牽張刺激激活后,可引發(fā)一系列生理反應(yīng),在膀胱充盈感的產(chǎn)生及排尿反射的啟動中起重要作用。近年來隨著相關(guān)研究的進(jìn)展,TRPV4在膀胱感覺功能中的作用被日益揭示,但TRPV4感受膀胱充盈刺激后,細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高及是否存在其他因子如ATP的釋放的具體細(xì)胞機制,還...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?Ａ．顯示細(xì)胞灌流從Ｉｎｌｅｔ流入細(xì)胞槽，從Ｏｕｔｌｅｔ流出，玻片上的細(xì)胞浸??

ＭＥＭ培養(yǎng)基，重復(fù)上述操作，吹打離心去上清。??（５）滴入適量膀胱尿路上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基（ＵＣＭ），將細(xì)胞吹打成懸液。??（６）將細(xì)胞懸液滴至多聚賴氨酸包埋好的玻片上，放置孵箱培養(yǎng)２４－４８小??時。??２．?２制造液氣界面方法??Ａ?Ｏｕｔｌｅｔ?ａ?／?Ｉｎｌｅｔ??———?....

圖１．２尿路上皮細(xì)胞受機械刺激后出現(xiàn)快速的胞內(nèi)Ｃａ２＋升高，且可重復(fù)??

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???大鼠的尿路上皮在給予液氣界面的機械刺激后，尿路上皮細(xì)胞出現(xiàn)快速的胞??內(nèi)鈣離子升高（圖１．２）。在１０張大鼠尿路上皮細(xì)胞爬片，共３７０個尿路上皮細(xì)??胞，給予第一次機械刺激誘發(fā)９３．?６％的細(xì)胞胞內(nèi)Ｃａ２＋升高，其幅度為０．?７９±０．?０６，??重新....

圖１．４大鼠膀胱ＴＲＰＶ４免疫組化?（Ａ）低倍鏡下可見ＴＲＰＶ４通道在尿路上皮??

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖１．３機械刺激可引起尿路上皮釋放ＡＴＰ??Ｂａｓｅ：刺激前基礎(chǔ)值，Ｍ：刺激后測得值；??３．?３?ＴＲＰＶ４在膀胱尿路上皮的表達(dá)??我們對所獲得的大鼠膀胱進(jìn)行了免疫組化染色，以鑒定ＴＲＰＶ４是否確實表達(dá)??于尿路上皮（圖１．４）。圖中，箭頭所指棕色顆粒....

圖１．５機械刺激引起的胞內(nèi)Ｃａ２＋升髙可被ＧｄＣ１３阻斷??

學(xué)碩士學(xué)位論文???仍可誘發(fā)大幅度的胞內(nèi)鈣升高（０．?５９±０．?０８），說明ＧｄＣ１３只阻斷機械通道，不??阻斷ＡＴＰ反應(yīng)通道，而且細(xì)胞保持很好的活性狀態(tài)。??Ａ?ＧｄＣＩ３?ｌＯＯｕＭ?Ｂ?１?ｉ??１??ＨＢＳＳ?Ｗａｓｈ?０?８?＿??．〇?Ｉ?§?°－６?■??ＩｓＬ?....

本文編號：3934684