目的:由于近些年表觀遺傳學的發(fā)展,基因啟動子甲基化檢測在預測癌癥診斷預后方面擁有巨大的潛力。PITX2啟動子的高CpG島增加其甲基化程度,其能夠成為新的膀胱癌預測因子。方法:QRT-PCR檢測永生化膀胱上皮細胞系(SV-HUC)和3種膀胱癌細胞系(EJ、5637、T24)以及癌組織和癌旁組織的差異性表達。通過DNA甲基化測定實驗對33例全膀胱切除術切除癌組織進行甲基化程度測定,分為大于50%甲基化,小于50%甲基化建立甲基化程度與腫瘤分期分級的聯(lián)系。結果:使用實時定量RT-PCR(Q-PCR)證明PITX2在膀胱癌細胞中高表達。癌組織中甲基化程度明顯高于癌旁組織。PITX2啟動子甲基化與腫瘤大小(P=0.026 7)、高級別(P=0.027 7)和TNM分期(0.016 0)顯著相關。在預測腫瘤侵襲(T2-T4腫瘤)中,PITX2啟動子甲基化的ROC曲線下面積(AUC)為0.867。Kaplan-Meier生存分析表明,與低PITX2甲基化表達的腫瘤相比,高PITX2啟動子甲基化表達的腫瘤與較短的總體存活相關。結論:PITX2在膀胱癌組織中異常高表達,并且PITX2啟動子區(qū)域在癌組織中...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 人群選擇
    1.2 細胞系選擇
    1.3 RNA提取、逆轉錄和PITX2差異表達檢測
    1.4 免疫組化檢測PITX2蛋白差異表達
    1.5 甲基化DNA檢測
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 PITX2差異表達
    2.2 蛋白水平上檢測PITX2差異表達
    2.3 PITX2啟動子甲基化差異檢測
    2.4 PITX2啟動子甲基化與膀胱癌臨床病理因素的相關性
3 討論



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