目的通過(guò)研究KIF3A在單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)小鼠和TGF-β1誘導(dǎo)的NRK-52E細(xì)胞中的表達(dá)情況,探討KIF3A在腎間質(zhì)纖維化中的作用。方法將36只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham, n=18)和單側(cè)輸尿管梗阻組(UUO, n=18),分別于術(shù)后7、14、21 d處死小鼠。蘇木素-伊紅(HE)染色、馬松(Masson)三色法染色和天狼星紅(Sirius Red)染色觀察小鼠腎間質(zhì)纖維化程度,RT-PCR、免疫組織化學(xué)(IHC)和免疫印跡(Western blot)檢測(cè)小鼠腎組織KIF3A的表達(dá)和分布。免疫印跡檢測(cè)小鼠腎組織KIF3A、E-cadherin和α-SMA蛋白的表達(dá)。TGF-β1誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞轉(zhuǎn)分化后,免疫印跡檢測(cè)KIF3A、E-cadherin、α-SMA、Wnt4和β-catenin蛋白的表達(dá)。結(jié)果與Sham組相比,UUO小鼠腎間質(zhì)纖維化程度隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)而增加,表明造模成功。同時(shí),KIF3A mRNA和蛋白表達(dá)均增高,于21 d達(dá)到高峰,α-SMA蛋白表達(dá)顯著上調(diào),E-cadherin蛋白表達(dá)明顯降低。NRK-52E細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)分化時(shí),KIF...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞
    1.2 動(dòng)物
    1.3 主要藥品
    1.4 造模方法
    1.5 熒光相對(duì)定量PCR檢測(cè)
    1.6 Western blot檢測(cè)
    1.7 腎臟組織切片染色
    1.8 腎臟組織切片免疫組織化學(xué)染色
    1.9 腎臟組織切片染色半定量
    1.1 0 TGF-β1誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞纖維化
    1.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 腎臟組織切片染色結(jié)果
    2.2 各組小鼠腎組織KIF3A的表達(dá)及分布
    2.3 各組小鼠腎組織KIF3A蛋白的表達(dá)與轉(zhuǎn)分化標(biāo)志相關(guān)蛋白表達(dá)的關(guān)系
    2.4 TGF-β1誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞轉(zhuǎn)分化后相關(guān)蛋白的檢測(cè)
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