【目的】利用前期研究中構(gòu)建的抑制PSMA表達(dá)的慢病毒及促進(jìn)PSMA表達(dá)的腺病毒感染前列腺癌LNCap細(xì)胞,探討PSMA通過PI3K/AKT通路對前列腺癌細(xì)胞遷移及凋亡影響。【方法】實(shí)驗(yàn)對象包括穩(wěn)定阻斷PSMA表達(dá)的細(xì)胞株(干擾組),PSMA過表達(dá)的LNcap細(xì)胞株(過表達(dá)組),不作任何處理的LNcap細(xì)胞株(對照組)。在一般培養(yǎng)基及含有PI3K/Akt通路抑制劑(LY294002)的環(huán)境下,利用Western blot及免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察3組細(xì)胞p-Akt的表達(dá)量,并使用CCK-8法描繪細(xì)胞生長曲線、transwell檢測細(xì)胞遷移能力、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。【結(jié)果】Western blot及細(xì)胞免疫化學(xué)提示抑制PSMA表達(dá)后,p-Akt表達(dá)水平下降,過表達(dá)PSMA后p-Akt表達(dá)水平提高;在LY294002抑制作用下,3組細(xì)胞p-Akt均處于較低水平,且彼此無明顯差異(P>0.05)。CCK-8法顯示抑制PSMA后細(xì)胞增殖能力下降,增強(qiáng)則升高;Transwell法顯示對照組穿透細(xì)胞數(shù)為56.30,而干擾組為36.60,過表達(dá)組為67.80;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率抑制組為4....

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞內(nèi)Akt蛋白磷酸化水平檢測
        1.3.1 Western blot法
        1.3.2 細(xì)胞免疫化學(xué)
    1.4 三組細(xì)胞增殖、遷移、凋亡的檢測
        1.4.1 CCK-8法描繪細(xì)胞的生長曲線
        1.4.2 Transwell法評估細(xì)胞遷移能力
        1.4.3 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
    1.5 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 Akt蛋白磷酸化水平檢測結(jié)果
        2.1.1 Western Blot
        2.1.2 細(xì)胞免疫化學(xué)
    2.2 細(xì)胞增殖、遷移、細(xì)胞周期的檢測結(jié)果
        2.2.1 細(xì)胞生長曲線
        2.2.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 流式細(xì)胞儀結(jié)果
3 討論



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