目的:探討TRAP1蛋白對膀胱癌細胞遷移和侵襲的影響及機制。方法:采用Western blot從膀胱癌細胞株中挑選出高表達TRAP1的細胞系BIU-87;使用TRAP1沉默慢病毒（LV3-TRAP1）沉默TRAP1,使用GFP熒光及PCR檢測LV3-TRAP1沉默效率;Transwell和劃痕實驗分別檢測沉默TRAP1蛋白表達后對膀胱癌細胞侵襲和遷移能力的影響;CMH2DCFDA熒光染色細胞檢測膀胱癌細胞內(nèi)活性氧水平;Western blot檢測相關(guān)信號通路TGF/Smad3蛋白的表達情況。結(jié)果:LV3-TRAP1慢病毒可以有效地抑制TRAP1蛋白的表達;沉默TRAP1蛋白的表達可以有效抑制膀胱癌細胞的侵襲和遷移能力、降低膀胱癌細胞內(nèi)活性氧水平;同時TGF/Smad3信號通路中的TGF、Smad2及Smad3蛋白表達也相應(yīng)降低。結(jié)論:沉默TRAP1蛋白可以通過調(diào)控TGF/Smad3信號通路來抑制膀胱癌細胞的侵襲和遷移能力。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞株與主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 慢病毒轉(zhuǎn)染BIU-87細胞
        1.2.2 實驗分組
        1.2.3 PCR檢測轉(zhuǎn)染慢病毒TRAP1的沉默效率
        1.2.4 Western blot檢測TRAP1、TGF-β和Smad3蛋白的表達
        1.2.5 Transwell侵襲實驗檢測TRAP1的表達對膀胱癌細胞侵襲能力的影響
        1.2.6 劃痕實驗檢測TRAP1的表達對膀胱癌細胞遷移能力的影響
        1.2.7 細胞活性氧 (ROS) 檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 TRAP1在不同膀胱癌細胞株中的表達
    2.2 轉(zhuǎn)染慢病毒TRAP1的沉默效率
    2.3 沉默TRAP1后膀胱癌細胞BIU-87的遷移能力變化
    2.4 沉默TRAP1后膀胱癌細胞BIU-87的侵襲能力變化
    2.5沉默TRAP1后細胞活性氧水平檢測
    2.6 沉默TRAP1后TGF/Smad3信號通路的蛋白水平變化
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]TRAP1 Shows Clinical Significance and Promotes Cellular Migration and Invasion through STAT3/MMP2 Pathway in Human Esophageal Squamous Cell Cancer[J]. Yunwei Ou,Lingyan Liu,Liyan Xue,Wei Zhou,Zitong Zhao,Bainan Xu,Yongmei Song,Qimin Zhan.  Journal of Genetics and Genomics. 2014(10)



本文編號：3698971