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過表達人核糖核酸酶抑制因子對人膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移及上表皮間質(zhì)化的影響

發(fā)布時間:2022-10-11 17:55
  目的 檢測過表達人核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease inhibitor, RI)基因的質(zhì)粒對人膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移及上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transitio,EMT)現(xiàn)象的影響。探索其可能存在的機制。 方法 1.將過表達RI的質(zhì)粒pIRES2-EGFP-RI及空質(zhì)粒pIRES2-EGFP分別轉(zhuǎn)染人膀胱癌細胞T24后利用G418篩選陽性克;根據(jù)轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒不同將細胞分為3組,分別命名為:T24組(未轉(zhuǎn)染組)、T24Vector (轉(zhuǎn)染pIRES2-EGFP質(zhì)粒)和T24-RI組(轉(zhuǎn)染pIRES2-EGFP-RI質(zhì)粒);RT-PCR檢測T24細胞中RI的mRNA水平變化,細胞免疫熒光及Western blot檢測RI蛋白的表達。 2.HE染色及普通光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)的改變;鬼筆環(huán)肽實驗觀察細胞微管的變化;流式細胞術(shù)分析各組細胞的周期變化情況;MTT檢測細胞增殖情況;激光共聚焦檢測RI與ILK的相互關(guān)系;細胞免疫熒光檢測ILK下游信號蛋白p-Akt和p-GSK3β的表達情況。 3.粘附實驗,劃痕實驗及Tran... 

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻
第一部分 pIRES2-EGFP-RI 載體對人膀胱癌細胞 T24 中 RI 基因及蛋白表達影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第二部分 過表達 RI 對膀胱癌 T24 細胞形態(tài),周期,增值的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第三部分 過表達 RI 對膀胱癌 T24 細胞侵襲,遷移及粘附能力的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第四部分 過表達 RI 對膀胱癌 T24 細胞裸鼠移植瘤生長的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
討論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章
附圖



本文編號:3691025

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