本文關(guān)鍵詞：雌激素通過誘導雄激素抑制性基因SOX4的表達促進前列腺癌細胞的惡性進展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景前列腺癌(Prostate Cancer, PCa)是男性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率在歐美國家僅次于肺癌,位居男性第二位。雄激素剝奪治療(Androgen deprivation therapy, ADT)是進展期前列腺癌最常用的一線治療方法。然而ADT對于進展期前列腺癌僅僅起到緩解的作用,而非治愈性的。大部分男性只有在治療早期出現(xiàn)短暫的癌瘤縮小。治療12～18個月后,幾乎所有患者最終轉(zhuǎn)為去勢抵抗性前列腺癌(Castration resistant prostate cancer, CRPC),預后極差。目前,關(guān)于CRPC的發(fā)生機制極為復雜,主要包括雄激素受體(Androgen receptor, AR)依賴性和AR非依賴性兩類機制。其中,AR依賴性的機制主要涉及AR基因擴增、AR基因突變,共調(diào)節(jié)因子異常及AR的非配體依賴性激活等。事實上,在去勢治療后,盡管體內(nèi)雄激素水平顯著下降,但AR及其介導的通路仍保持活躍狀態(tài)。自從Higgins和Hodges兩位科學家報道類固醇激素在前列腺癌進展和治療中的重要性以來,雌激素(17β-estradiol, E2),作為一種典型的類固醇激素,在前列腺正常組織及前列腺癌中發(fā)揮的作用受到了越來越多的關(guān)注。眾所周知,E2在體內(nèi)主要是通過它的兩個經(jīng)典受體雌激素受體α (ERα)和雌激素受體β (ERβ)發(fā)揮各種各樣的生物學作用。在前列腺組織中,ERa主要表達于組織的間質(zhì)中,而ERβ主要表達于前列腺上皮的基底層和分泌層。傳統(tǒng)觀點認為：ERa介導E2對于生物體有害的效應,而ERβ介導著E2的抑癌效應。ERβ被認為在細胞增殖功能上可以拮抗ERa,并表現(xiàn)出一種抗侵襲和抗轉(zhuǎn)移的潛能。然而,越來越多的證據(jù)表明ERβ在前列腺癌中也發(fā)揮著類似癌基因的作用。因此,ERβ在前列腺癌中的具體作用仍需更加深入的研究。SOX家族是一類SRY (Sex Determination Region of Y Chromosome)相關(guān)基因構(gòu)成的基因家族,編碼一系列SOX (SRY-related HMG-box)轉(zhuǎn)錄因子。迄今,已發(fā)現(xiàn)SOX家族包括20個成員,可分為A-H共8個亞族。SOX4基因是C亞族成員,參與胚胎發(fā)育、干細胞的維持和調(diào)控細胞分化。在許多癌癥中,SOX4這個關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子的異常表達可以通過誘導上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)和轉(zhuǎn)移的方式,與細胞加速增殖和凋亡抑制相關(guān)。SOX4在前列腺癌中可能扮演著一個轉(zhuǎn)化性癌基因的角色。雖然已在接近三分之一的前列腺癌患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了SOX4的過表達,但SOX4基因過表達的分子機制仍不明確。實驗方法免疫組織化學染色(Immuohistochemistry, IHC)用于檢測SOX4蛋白的表達、分布特點,及其與ERβ之間的相關(guān)性,實時定量PCR和Western blotting被用于研究轉(zhuǎn)錄和蛋白表達水平。細胞免疫熒光染色和免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP)評估ERβ和AR的亞細胞定位及相互作用。通過染色質(zhì)免疫沉淀實驗(chromatin-Immunoprecipitation, ChIP)和熒光素酶報告基因?qū)嶒炋接慐Rp和AR與SOX4啟動子區(qū)的結(jié)合以及對啟動子活性的影響。MTS,侵襲和劃痕實驗評估細胞功能。實驗結(jié)果我們的研究發(fā)現(xiàn),相比于激素依賴性前列腺癌(Hormone dependent prostate cancer, HDPC)病例,在CRPC中SOX4表達上調(diào)。前列腺癌的細胞LNCaP經(jīng)過長期的雄激素剝奪后也觀察到SOX4蛋白表達上調(diào),這證實了IHC結(jié)果,并進一步提示SOX4在去勢抵抗性前列腺癌中的潛在作用。體外數(shù)據(jù)表明,DHT以劑量依賴的方式顯著下調(diào)LNCaP和VCaP細胞系中SOX4的mRNA和蛋白表達。我們還發(fā)現(xiàn),DHT抑制SOX4表達的過程呈現(xiàn)時間依賴性。ChIP實驗證實SOX4是AR的靶基因。在缺乏雄激素的情況下,E2通過ERp和AR之間的蛋白復合物的形成上調(diào)SOX4表達。敲除AR或ERβ可以抵消E2誘導SOX4表達,這表明,這兩種受體是E2誘導SOX4表達所必需的。ChIP實驗證實,在E2刺激后,ERβ和AR均結(jié)合到SOX4啟動子。因此,無論是由DHT或E2激活,AR起著SOX4表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的根本性作用。此外,AR可以在于不同的配體結(jié)合時可表現(xiàn)出不同的轉(zhuǎn)錄行為。在功能上,沉默SOX4顯著減弱的E2促進PCa細胞增殖、侵襲和遷移的作用。在HDPC和CRPC的臨床樣本中,SOX4的過表達與ERβ陽性有顯著相關(guān)性。結(jié)論綜上,我們證明SOX4是一種新的雄激素抑制性靶基因。在缺乏雄激素環(huán)境下,E2可以通過誘導SOX4表達以促進PCa細胞的增殖,這提示SOX4可能在CRPC的過渡過程中發(fā)揮重要作用。機制上,我們的數(shù)據(jù)表明,AR信號通路控制SOX4表達,在接受不同配體刺激時,對SOX4表現(xiàn)出不同轉(zhuǎn)錄調(diào)控。這種細胞模型的存在,可以促進ERp和AR陽性PCa細胞通過誘導SOX4表達而逐漸發(fā)展為CRPC。
【關(guān)鍵詞】：SOX4基因 前列腺癌 過表達 雄激素受體 雌激素受體BETA
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 符號說明13-15
• 前言15-19
• 第一部分 SOX4在去勢抵抗性前列腺癌中表達升高19-24
• 1. 材料19-20
• 2. 方法20-22
• 3. 結(jié)果22-24
• 第二部分 SOX4是雄激素抑制性基因24-33
• 1. 材料24-26
• 2. 方法26-30
• 3. 結(jié)果30-33
• 第三部分 雌激素上調(diào)SOX4表達及其機制的研究33-41
• 1. 材料33-34
• 2. 方法34-35
• 3. 結(jié)果35-41
• 第四部分 SOX4過表達與雌激素生物學效應的關(guān)系及其與ERβ表達的臨床相關(guān)性41-44
• 1. 材料41
• 2. 方法41-42
• 3. 結(jié)果42-44
• 討論44-47
• 參考文獻47-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文目錄52-53
• 碩士期間第一作者文章全文53-82
• 附件82

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王海青;楊崇禮;;雄激素的療愈原理[J];天津醫(yī)藥;1986年05期

2 崔毓桂;雄激素受體研究方法及其進展[J];實用男科雜志;1996年03期

3 劉穎,陸一帆;運動對制動大鼠骨骼肌中雄激素受體的影響[J];中國康復醫(yī)學雜志;2001年04期

4 張子彥;雄激素受體的研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2002年02期

5 江軍,金錫御,靳風爍,王洛夫;雄激素對大鼠前列腺不同分葉雄激素受體及其mRNA表達的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2003年13期

6 陳蕾蕾,姚兵;睪丸外組織雄激素受體的分布及檢測[J];中華男科學;2003年01期

7 梁軍;雄激素對淋巴細胞的調(diào)節(jié)[J];現(xiàn)代免疫學;2004年03期

8 王洛夫,江軍;雄激素受體在雄激素非依賴性前列腺癌中的作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2004年24期

9 楊潔,張秋養(yǎng),葛玲,邱曙東;青春期大鼠實驗性精索靜脈曲張對附睪雄激素受體的影響[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);2005年01期

10 朱院山;蔡力群;;雄激素對男性性別、行為和認知的影響(英文)[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2006年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝駿逸;陳力;;雄激素及其相關(guān)因素對痤瘡影響的研究進展[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 游冬青;肖錦松;趙芳;;人雄激素受體激素結(jié)合區(qū)的克隆表達與活性研究[A];第三屆全國現(xiàn)代生物物理技術(shù)學術(shù)討論會論文摘要匯編[C];2000年

3 邱云霞;曲燕;李相如;于建榮;;雄激素受體抵抗1例[A];第5次全國中西醫(yī)結(jié)合男科學術(shù)會議論文匯編暨男科提高班講義[C];2007年

4 田軍;陶天遵;王凱夫;高峰;單雨;李磊;;雄性大鼠成骨細胞內(nèi)雄激素受體表達的研究[A];中華醫(yī)學會第三次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學術(shù)會議暨骨質(zhì)疏松診斷技術(shù)繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2004年

5 李霖;李紅;尹雪瑤;潘倩倩;吳芳;;雄激素受體在波動性高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷中的作用[A];中華醫(yī)學會第十一次全國內(nèi)分泌學學術(shù)會議論文匯編[C];2012年

6 溫俊平;陳剛;薛瑩;;雄激素不敏感綜合征的臨診應對[A];中華醫(yī)學會第十二次全國內(nèi)分泌學學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 劉娜;賈影;戚基萍;;雄激素受體在乳腺癌中的表達[A];中華醫(yī)學會病理學分會2010年學術(shù)年會日程及論文匯編[C];2010年

8 郭東星;張華屏;劉立民;艾曉杰;喬中東;;核因子--κB在雄激素處理的巨噬細胞中的表達[A];動物學專輯——上海市動物學會2002年年會論文集[C];2002年

9 張曼娜;孫首悅;張惠杰;顧衛(wèi)瓊;洪潔;劉建民;王衛(wèi)慶;寧光;李小英;;4例雄激素受體不敏感型綜合征患者的分子遺傳學研究[A];中華醫(yī)學會第二屆糖尿病及性腺疾病學術(shù)會議論文集[C];2012年

10 桂耀庭;;雄激素受體在精子發(fā)生的作用及其分子機制[A];中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會人類精子庫管理學組第三屆年會全國男性生殖醫(yī)學和精子庫管理新進展第四次研討會論文匯編[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張超群 李幼玲 范曉莉;山西醫(yī)大第一醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)：雄激素受體與再障貧血有關(guān)[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 白毅;新型雄激素受體調(diào)節(jié)劑有望治療前列腺癌[N];中國醫(yī)藥報;2008年

3 陳茂j　余寧寧;ASC-J9為肌肉萎縮癥治療帶來曙光[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 美國紐約羅切斯特大學教授 張傳祥;雄激素 膀胱癌研究新目標[N];健康報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 莫文娟;前列腺癌雄激素轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡的研究[D];復旦大學;2010年

2 張紀元;雄激素受體介導的基因調(diào)控網(wǎng)絡及蛋白磷酸酶2Cκ的進一步功能研究[D];復旦大學;2010年

3 鄒惟瑩;Trihydrophobin 1促進雄激素受體降解及其在乳腺癌進展過程中作用的研究[D];復旦大學;2010年

4 龐瑩;痤瘡的流行病學及與雄激素受體基因多態(tài)性的相關(guān)研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

5 伍學焱;雄激素受體結(jié)合分析和5α-還原酶活性測定方法的建立及初步臨床應用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1998年

6 曾星;L型鈣通道CACNA1D調(diào)控前列腺癌細胞雄激素受體活性的機制研究[D];華中科技大學;2013年

7 楊之明;轉(zhuǎn)膠蛋白抑制ARA54增強的雄激素受體轉(zhuǎn)錄功能和前列腺癌細胞的生長[D];浙江大學;2006年

8 楊延鐘;Trihydrophobin 1相互作用蛋白以及Trihydrophobin 1與乳腺癌細胞化療藥物敏感性之間關(guān)系的研究[D];復旦大學;2007年

9 肖成武;雄激素剝奪對人前列腺癌細胞Egr1表達的影響及其機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

10 葉鳴;低氧和運動經(jīng)雄激素—雄激素受體途徑對骨骼肌蛋白質(zhì)合成的作用[D];北京體育大學;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張聰哲;LSD1介導的組蛋白H3K4去甲基化對雄激素受體調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄的影響[D];復旦大學;2013年

2 楊木易;雌激素通過誘導雄激素抑制性基因SOX4的表達促進前列腺癌細胞的惡性進展[D];山東大學;2015年

3 王琰;二甲雙胍通過雄激素受體途徑抑制雄激素依賴性和非依賴性前列腺癌[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

4 吳淑芬;再生障礙性貧血患者雄激素和雄激素受體的改變及其意義[D];山西醫(yī)科大學;2004年

5 呂紅松;雄激素對血管平滑肌組織、細胞雄激素受體及血小板源性生長因子受體-β表達的影響[D];第一軍醫(yī)大學;2002年

6 王慧麗;雄激素受體類似物在擬黑多刺蟻中的免疫組織化學定位研究[D];陜西師范大學;2007年

7 王輝;雄激素受體在蛋白酶體抑制劑誘導的細胞自噬中的作用[D];哈爾濱工業(yè)大學;2013年

8 李靖華;乳腺癌中雄激素受體的表達及意義[D];河北大學;2010年

9 楊智;云南漢族痤瘡與雄激素相關(guān)基因研究[D];昆明醫(yī)學院;2005年

10 陳慧;雄激素促進組織型谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶表達與原發(fā)性開角型青光眼的發(fā)病關(guān)系的研究[D];華中科技大學;2007年

  本文關(guān)鍵詞：雌激素通過誘導雄激素抑制性基因SOX4的表達促進前列腺癌細胞的惡性進展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：361939