目的通過不同濃度尿毒癥患者血清（以下簡稱尿毒癥血清）刺激血管平滑肌細胞（VSMCs）,評估其鈣化情況及I型膠原（ColⅠ）表達,探討尿毒癥血清誘導(dǎo)VSMCs鈣化的機制。方法原代培養(yǎng)VSMCs,隨機分為健康血清組和尿毒癥血清組,依據(jù)血清在培養(yǎng)基中所占比例每組各設(shè)5%、10%、15%（低、中、高）三個亞組,刺激6 d后對細胞進行鈣化染色及鈣含量測定,同時RT-PCR檢測細胞細胞內(nèi)核心結(jié)合因子（Cbfα1）及ColⅠmRNA表達,Western-Blot檢測細胞及上清液ColⅠ蛋白表達,并分析相關(guān)性。結(jié)果與健康血清組比較,不同濃度尿毒癥血清刺激VSMCs后鈣結(jié)節(jié)增加,鈣含量升高,均呈濃度依賴性（P<0.05）;Cbfα1 mRNA表達、ColⅠmRNA及上清液中蛋白表達均升高,且呈濃度依賴性（P<0.05）。結(jié)論不同濃度尿毒癥血清刺激可使VSMCs鈣化,呈現(xiàn)濃度依賴性,其作用機制之一可能是其促進VSMCs表型轉(zhuǎn)化,進而分泌ColⅠ蛋白增加。 

【文章來源】：山東醫(yī)藥. 2013,53(26)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

不同濃度血清刺激后對VSMCsCbfα1mＲNA表達的影響

?．020﹟△▲健康血清組5%濃度0．223±0．02010%濃度0．235±0．02015%濃度0．238±0．010注:與健康血清組比較，﹟P＜0．05;與同組5%濃度比較，△P＜0．05;與同組10%濃度比較，▲P＜0．052．3ColⅠmＲNA及蛋白表達與健康血清組比較，尿毒癥血清組細胞ColⅠmＲNA、細胞上清液中ColⅠ蛋白表達均升高，低、中、高三個亞組間呈現(xiàn)濃度依賴性，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)。尿毒癥血清組低、中、高三個亞組間比較結(jié)果見表3。同時檢測發(fā)現(xiàn)健康血清組及尿毒癥血清組細胞中均無ColⅠ蛋白表達。見圖2、3。圖2不同濃度血清刺激后對VSMCsColⅠmＲNA表達的影響注:N:健康血清組，U:尿毒癥血清組2．4尿毒癥血清組VSMCs鈣化、ColⅠ表達、Cbfα1圖3不同濃度血清刺激后對VSMCs上清液中ColⅠ蛋白表達的影響注:N:健康血清組，U:尿毒癥血清組表3不同濃度血清刺激對VSMCsColⅠmＲNA及上清液中ColⅠ蛋白表達的影響(珔x±s)組別ColⅠmＲNAColⅠ蛋白尿毒癥血清組5%濃度0．682±0．010﹟0．651±0．02﹟10%濃度0．719±0．030﹟△0．752±0．03﹟△15%濃度0．910±0．020﹟△▲0．843±0．03﹟△▲健康血清組5%濃度0．564±0．0200．278±0．02010%濃度0．595±0．0400．399±0．04015%濃度0．598±0．0400．509±0．080注:與健康血清組比較，﹟P＜0．05;與同組5%濃度比較，△P＜0．05;與同組10%濃度比較，▲P＜0．05表達的相關(guān)性尿毒癥血清組低、中、高三個亞組VSMCs鈣含量與上清液中ColⅠ蛋白表達均呈正相關(guān)(r=0．797，P＜0．01)，細胞ColⅠmＲNA表達與Cbfα1mＲNA表達亦呈正相關(guān)(r=0．784，P＜0．05)。3討論CKD患者的血管鈣化主要表現(xiàn)為中膜鈣化，位于血管中膜的血管平滑?

濃度比較，△P＜0．05;與同組10%濃度比較，▲P＜0．052．3ColⅠmＲNA及蛋白表達與健康血清組比較，尿毒癥血清組細胞ColⅠmＲNA、細胞上清液中ColⅠ蛋白表達均升高，低、中、高三個亞組間呈現(xiàn)濃度依賴性，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)。尿毒癥血清組低、中、高三個亞組間比較結(jié)果見表3。同時檢測發(fā)現(xiàn)健康血清組及尿毒癥血清組細胞中均無ColⅠ蛋白表達。見圖2、3。圖2不同濃度血清刺激后對VSMCsColⅠmＲNA表達的影響注:N:健康血清組，U:尿毒癥血清組2．4尿毒癥血清組VSMCs鈣化、ColⅠ表達、Cbfα1圖3不同濃度血清刺激后對VSMCs上清液中ColⅠ蛋白表達的影響注:N:健康血清組，U:尿毒癥血清組表3不同濃度血清刺激對VSMCsColⅠmＲNA及上清液中ColⅠ蛋白表達的影響(珔x±s)組別ColⅠmＲNAColⅠ蛋白尿毒癥血清組5%濃度0．682±0．010﹟0．651±0．02﹟10%濃度0．719±0．030﹟△0．752±0．03﹟△15%濃度0．910±0．020﹟△▲0．843±0．03﹟△▲健康血清組5%濃度0．564±0．0200．278±0．02010%濃度0．595±0．0400．399±0．04015%濃度0．598±0．0400．509±0．080注:與健康血清組比較，﹟P＜0．05;與同組5%濃度比較，△P＜0．05;與同組10%濃度比較，▲P＜0．05表達的相關(guān)性尿毒癥血清組低、中、高三個亞組VSMCs鈣含量與上清液中ColⅠ蛋白表達均呈正相關(guān)(r=0．797，P＜0．01)，細胞ColⅠmＲNA表達與Cbfα1mＲNA表達亦呈正相關(guān)(r=0．784，P＜0．05)。3討論CKD患者的血管鈣化主要表現(xiàn)為中膜鈣化，位于血管中膜的血管平滑肌細胞在CKD患者血管鈣化中起著關(guān)鍵作用［6］。以前人們普遍認為CKD患者血管鈣化是一種鈣磷被動沉積于細胞和組織間的過程，而近年來證實，血?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]地塞米松對骨髓間充質(zhì)干細胞Runx2表達的影響[J]. 林樂,李旭,楊茂偉,范廣宇.  山東醫(yī)藥. 2009(26)



本文編號：3561963