研究背景:隨著生活質量的提高,人類西方化的飲食結構中脂肪類攝入比例已高達40%,大量臨床研究發(fā)現(xiàn),高脂飲食在引發(fā)肥胖和脂代謝紊亂的同時,對男性精子質量也會造成影響,主要表現(xiàn)為精子數(shù)量及活力下降、染色體受損以及精子形態(tài)異常。有研究表明高脂飲食會改變人體內腸道微生物的組成,進而打破腸道微生物的生態(tài)平衡。腸道微生物在宿主的營養(yǎng)吸收、腸道與免疫系統(tǒng)的功能、脂肪代謝、能量供應等諸多重要生理過程中發(fā)揮作用。腸道菌群組成的變化與肥胖、代謝綜合征、癌癥、神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病的等的發(fā)生、發(fā)展和治療密切相關。然而,腸道菌群組成的變化是否會影響精子質量尚不明確。因此,我們應用C57BL/6雄鼠模型以及臨床不育男性的樣品進行了以下研究:研究目的:研究高脂飲食誘導的腸道菌群失衡對雄性小鼠精子質量影響及相關機制。研究方法:1.動物研究:（1）腸道菌群失衡供體雄鼠模型的構建:在實驗的全過程中,分別給予供體雄鼠正常飲食（Normal Diet,ND）和高脂飲食（High-fat Diet,HFD）,構建ND、HFD腸道菌群供體模型;（2）腸道菌群受體雄鼠模型的構建:通過腸道菌群替代實驗（Fecal microbiota... 

【文章來源】：廣東工業(yè)大學廣東省

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１技術路線圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?Ｒｏａｄｍａｐ??

廣東工業(yè)大學博士學位論文??②ＭｇＳ〇４母液：�。矗埃恚坛兯尤耄埃常玻绲模停纾樱茫�，渦旋至完全溶解即可；??③Ｋ２ＨＰＯ４母液：�。矗�?ｍＬ超純水加入１．６?ｇ的Ｋ２ＨＰ０４，渦旋至完全溶解即可；??④ＫＨ２Ｐ〇４母液：取４０ｍＬ超純水加入１．６ｇ的ＫＨ２Ｐ０４，渦旋至完全溶解即可；??⑤０．１％刃天青：�。矗�?ｍＬ超純水加入０．０４?ｇ刃天青，渦旋至完全溶解即可。??（３）調節(jié)ｐＨ：用ｌＭＮａＯＨ于室溫下調節(jié)培養(yǎng)液ｐＨ至７．３±０．２；??（４）抽真空：用抽真空裝置（圖５－２．１６）抽真空到－０．０６?Ｐａ，保持３０?ｓ?（２００?ｍＬ??血清瓶保持３０?ｓ，?１５?ｍＬ西林瓶保持１５?ｓ），充氮氣至０．０７?Ｐａ，保持３０?ｓ／１５ｓ，抽空氣??吹氮氣重復３次；??ｍ??圖５－２．１６抽真空裝置??Ｆｉｇｕｒｅ?５－２．１６?Ｅｖａｃｕａｔｉｎｇ?ｄｅｖｉｃｅ??（５）滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋１２１°Ｃ滅菌２０分鐘；??（６）液體接種：（在生物安全柜中操作）取４°Ｃ存放的配置好的培養(yǎng)基，按比例加??入氯化血紅素后，吸取母液１?ｍＬ至添加好氯化血紅素的培養(yǎng)液中；??（７）接種后的西林瓶放置在３７°Ｃ，２２０?ｒｐｍ的恒溫搖床中培養(yǎng)。??（８）菌種的保種與凍存：取對數(shù)增長期菌液７?ｍＬ，加入到含有７?ｍＬ?５０％甘油水??溶液的２０?ｍＬ抽真空滅菌的西林瓶中，放置于超低溫冰箱長期保存。其中甘油是在凍??存時減少冰晶的形成，冰晶會刺破細胞壁。同樣西林瓶中加好甘油水溶液抽真空后滅??菌使用。??２．２．４．１７腸粘膜通透性檢測??（１）血清樣本收集：用純水將ｎＴＣ－ｌａｂｌｅｄｄｅｘｔｒａｎ４０００稀釋成５０ｍｇ／ｍ

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer[J]. Jonathan Landy,Emma Ronde,Nick English,Sue K Clark,Ailsa L Hart,Stella C Knight,Paul J Ciclitira,Hafid Omar Al-Hassi.  World Journal of Gastroenterology. 2016(11)



本文編號：3543473