目的觀察微小RNA（miR-5047）在前列腺癌細(xì)胞株中的表達(dá),探討其對TIPE3基因表達(dá)的調(diào)控。方法采用實時定量PCR（RT-qPCR）檢測miR-5047在4種前列腺癌細(xì)胞株（C4-2B、LNCa P、DU-145、PC-3）和正常前列腺濾泡細(xì)胞RWPE-1中的表達(dá)。以表達(dá)量最低的細(xì)胞為感染對象,使用慢病毒Lenti-陰性對照序列（miR-NC）和Lenti-miR-5047分別感染細(xì)胞,分別命名為對照組和實驗組。RT-qPCR檢測感染后細(xì)胞中miR-5047的表達(dá)。細(xì)胞劃痕實驗和MTT法分別檢測兩組細(xì)胞的遷移和增殖能力。基于microRNA.org數(shù)據(jù)庫對miR-5047進(jìn)行靶基因預(yù)測。雙熒光素酶報告基因檢測驗證miR-5047的靶基因。RT-qPCR和Western blot檢測兩組細(xì)胞中靶基因在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果與正常前列腺濾泡細(xì)胞RWPE-1相比,在前列腺癌細(xì)胞中miR-5047的表達(dá)明顯降低（P <0.05）,在C4-2B細(xì)胞中表達(dá)最低（P <0.01）。與對照組相比,實驗組C4-2B細(xì)胞中miR-5047的表達(dá)明顯增加（P <0.01）。與... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,51(04)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

前列腺癌細(xì)胞和正常前列腺濾泡細(xì)胞中miR-5047的相對表達(dá)

對照組和實驗組細(xì)胞遷移率分別為(68.61±5.94)%和(29.36±6.54)%。與對照組比較，實驗組穿膜C4-2B細(xì)胞遷移率明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.36,P<0.01，見圖2)，高表達(dá)miR-5047可抑制前列腺癌C4-2B細(xì)胞的遷移能力。2.4 高表達(dá)miR-5047對C4-2B細(xì)胞增殖能力的影響

MTT法結(jié)果顯示，實驗組C4-2B細(xì)胞在感染后第2-5天的A值均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見圖3)，表明高表達(dá)miR-5047可抑制前列腺癌C4-2B細(xì)胞的增殖能力。2.5 miR-5047與TIPE3 mRNA靶向關(guān)系預(yù)測


本文編號：3483908