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miRNA-210在腎透明細(xì)胞癌中表達(dá)的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-08 15:28
  目的1)探索腎透明細(xì)胞癌中是否存在差異表達(dá)的miRNA表達(dá)譜。2)探索miR-210在細(xì)胞活力,細(xì)胞凋亡,細(xì)胞周期,遷移和侵襲中的作用。3)探索miR-210下調(diào)后對(duì)HIF1α蛋白的表達(dá)有何影響。方法1)對(duì)9例配對(duì)的腎透明細(xì)胞癌(ccRCC)及其癌旁正常腎組織,采用TaqMan探針的低密度陣列芯片技術(shù),對(duì)其相關(guān)特異性microRNAs進(jìn)行分析,并對(duì)miR-210進(jìn)行進(jìn)一步的定量RT-PCR驗(yàn)證。2)使用miR-210抑制劑在CAKI-2和ACHN細(xì)胞株中下調(diào)miR-210,并設(shè)立陰性對(duì)照組,以評(píng)估m(xù)iR-210在細(xì)胞活力,細(xì)胞凋亡,細(xì)胞周期,遷移和侵襲中的作用。3)進(jìn)行western blot實(shí)驗(yàn),檢測(cè)miR-210下調(diào)后HIF1α蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果1)用TaqMan探針的低密度陣列對(duì)9例ccRCC配對(duì)標(biāo)本進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn):78個(gè)miRNAs在腎癌及相應(yīng)癌旁組織中差異表達(dá),且大多數(shù)miRNAs表現(xiàn)出下降的趨勢(shì),其中73個(gè)在腎癌中表達(dá)下降,僅5個(gè)表達(dá)上調(diào)。進(jìn)一步對(duì)35例腎癌組織及10例正常腎實(shí)質(zhì)進(jìn)行定量RT-PCR驗(yàn)證miR-210在腎癌中高表達(dá)。2)ACHN及CAKI-2腎細(xì)胞系轉(zhuǎn)染mi... 

【文章來(lái)源】:南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

miRNA-210在腎透明細(xì)胞癌中表達(dá)的研究


圖2轉(zhuǎn)染24小時(shí)后轉(zhuǎn)染組和對(duì)照組miRNA-210表達(dá)量??

細(xì)胞活性,轉(zhuǎn)染,對(duì)照組,細(xì)胞系


細(xì)胞系轉(zhuǎn)染組較對(duì)照組,細(xì)胞活性下降了?24.1?%±3.3?%?(n=3,?P<0.0005);??CAKI-2細(xì)胞系轉(zhuǎn)染組較對(duì)照組,細(xì)胞活性下降了?28.4?%±5.4?%(n=3,?POO.O(H)。??(見(jiàn)附圖3)??i?.?p-?-|?r— ̄ ̄-1??i??i:?2?I??::I.圍?L」??ACHN?CAKI-2??附圖3轉(zhuǎn)染48小時(shí)后轉(zhuǎn)染組及對(duì)照組細(xì)胞活性比較??15??

細(xì)胞株,細(xì)胞周期,轉(zhuǎn)染,附圖


ACHN和CAKI2細(xì)胞株轉(zhuǎn)染后溫育48小時(shí),隨后用滿化丙旋染色,并用流??式細(xì)胞儀分析,結(jié)果得出:CAKI2細(xì)胞株中,大量細(xì)胞停留在S期,G2期細(xì)??胞比例減少(P=0.02,n=3,見(jiàn)附圖4);而對(duì)于ACHN細(xì)胞株,細(xì)胞周期未見(jiàn)明??顯差異性改變。??娜!?■<?恥恥1??!??—1??t?宇.?II?二.?I??—i?,??i^i?I??^?te-?I??mock?anti-miR-210??附圖4轉(zhuǎn)染48小時(shí)后兩組CAKI2細(xì)胞株細(xì)胞周期變化的比較??16??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miRNA-142-5p在腎細(xì)胞癌中高表達(dá)的研究[J]. 趙爽,王海峰,劉凌琪,辛殿祺.  山東醫(yī)藥. 2008(41)



本文編號(hào):3424442

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