目的:探討血管內(nèi)皮細(xì)胞對前列腺癌細(xì)胞耐藥能力的影響,并進一步研究血管內(nèi)皮細(xì)胞作用于前列腺癌細(xì)胞的可能的分子機制。方法:1.利用Transwell小室構(gòu)建共培養(yǎng)體系,通過CCK-8和Annexin V-FITC/PI檢測細(xì)胞耐藥的能力并通過蛋白印跡法（WB）檢測凋亡相關(guān)分子的表達;2.利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）及WB檢測共培養(yǎng)后前列腺癌細(xì)胞中成紅細(xì)胞病毒E26致癌物（ERG）的表達情況;利用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）篩選出共培養(yǎng)組與非共培養(yǎng)組細(xì)胞上清之間有差異的細(xì)胞因子,并通過WB檢測各個細(xì)胞因子與ERG的關(guān)系,確定影響ERG表達最明顯的細(xì)胞因子。結(jié)果:1.前列腺癌細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)后,前列腺癌細(xì)胞對多西他賽的耐藥性增加,細(xì)胞凋亡減少;2.共培養(yǎng)后前列腺癌細(xì)胞ERG的表達增高;血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的成纖維細(xì)胞生長因子2（FGF2）在共培養(yǎng)后有明顯增加,FGF2可以促進前列腺癌ERG的表達,并且這種病效應(yīng)會被FGF2的抑制劑所逆轉(zhuǎn)。結(jié)論:血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的FGF2可促進前列腺癌細(xì)胞ERG的表達,促進前列腺癌細(xì)胞對多西他賽的耐藥性。 

【文章來源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2020,20(04)

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【部分圖文】：

血管內(nèi)皮細(xì)胞促進前列腺癌細(xì)胞耐藥。（A）細(xì)胞活力實驗檢測22Rv1與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)后細(xì)胞耐藥能力的變化；（B）血管內(nèi)皮細(xì)胞抑制多西他賽引起的22Rv1細(xì)胞的凋亡；（C)Western blot分析不同凋亡相關(guān)蛋白表達。（*P<0.05;**P<0.01)

圖1 血管內(nèi)皮細(xì)胞促進前列腺癌細(xì)胞耐藥。（A）細(xì)胞活力實驗檢測22Rv1與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)后細(xì)胞耐藥能力的變化；（B）血管內(nèi)皮細(xì)胞抑制多西他賽引起的22Rv1細(xì)胞的凋亡；（C)Western blot分析不同凋亡相關(guān)蛋白表達。（*P<0.05;**P<0.01)2.3 FGF2是共培養(yǎng)后內(nèi)皮細(xì)胞分泌的關(guān)鍵細(xì)胞因子

下面我們試圖確定在與HUVEC共培養(yǎng)后，究竟是哪些因素影響了前列腺癌細(xì)胞ERG的表達。我們的前期研究表明，IL-6,IL-8,CCL-5和FGF2在共培養(yǎng)后有明顯的上調(diào)[12,13]，我們又利用ELISA進一證實了內(nèi)皮細(xì)胞與前列腺癌共培養(yǎng)后的條件培養(yǎng)基中FGF2的濃度明顯高于內(nèi)皮細(xì)胞單獨培養(yǎng)的。為了驗證FGF2是否可以引起前列腺癌細(xì)胞ERG的過表達，我們通過在22Rv1的培養(yǎng)基中加入不同濃度的FGF2,48小時后抽提蛋白，western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)FGF2處理前列腺癌后其ERG的表達顯著增加，且對著FGF2濃度的增加而增加（圖15）。PD173074是一種有效的FGFR1抑制劑，可以劑量依賴的方式抑制FGF2[16]。通過在共培養(yǎng)體系中加入PD173074，我們發(fā)現(xiàn)實PD173074可以減少內(nèi)皮細(xì)胞對前列腺癌細(xì)胞耐藥性的影響。以上結(jié)果表明，F(xiàn)GF2可能是通過旁分泌的方式促進了前列腺癌ERG的過表達，進而在促進腫瘤化療耐藥中發(fā)揮重要的作用。3 討論


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