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mGM-CSF/βhCG融合蛋白的制備及其致敏樹突狀細胞疫苗抗小鼠RM-1前列腺癌的作用

發(fā)布時間:2021-08-01 20:24
  利用分子生物學方法設(shè)計并構(gòu)建含有βh CG基因和m GM-CSF基因的表達載體p ET-28a-m GM-CSF-X10-βh CGCTP37質(zhì)粒。乳糖誘導(dǎo)表達該融合蛋白,通過硫酸銨分級沉淀和陰離子交換柱DEAE-cellulose進行純化,并以此融合蛋白致敏從C57BL/6J小鼠體內(nèi)提取的樹突狀細胞(DC)從而獲得DC疫苗。將DC疫苗回輸至接種前列腺癌RM-1的C57BL/6J小鼠體內(nèi),分組檢測。結(jié)果顯示,DC組和DC與紫杉醇(Pac)聯(lián)用(DP)組與Pac組相比抗腫瘤效果具有極顯著性差異(P<0.01);且DP組的抗腫瘤效果優(yōu)于DC組?梢姌(gòu)建的新型DC疫苗可抑制前列腺癌的生長,且與紫杉醇聯(lián)合使用具有協(xié)同抗腫瘤作用。 

【文章來源】:中國藥科大學學報. 2015,46(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材 料
    1. 1 菌種和質(zhì)粒
    1. 2 試 劑
    1. 3 動物和細胞株
2 方 法
    2. 1 m GM-CSF / βh CG融合蛋白表達載體的構(gòu)建
    2. 2 融合蛋白的誘導(dǎo)表達
    2. 3 融合蛋白的分離純化
    2. 4 融合蛋白的 Western-blot 鑒定
    2. 5 DC 疫苗的制備
    2. 6 DC疫苗對小鼠RM-1前列腺癌的免疫治療
3 結(jié) 果
    3. 1 m GM-CSF 與重組表達載體的鑒定
    3. 2 m GM-CSF / βh CG 融合蛋白的誘導(dǎo)表達
    3. 3 融合蛋白的分離純化
    3. 4 融合蛋白的 Western-blot 鑒定
    3. 5 成熟 DC 的制備
    3. 6 DC 疫苗對腫瘤生長的影響
    3. 7 細胞因子檢測
4 討 論



本文編號:3316191

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