目的：通過研究IL-6對前列腺癌細胞增殖、遷移和生存力的影響，探索IL-6在前列腺癌進展中的作用機制；同時研究二甲雙胍對IL-6過表達的前列腺癌細胞株增殖、遷移和細胞周期的影響，探索二甲雙胍抑制前列腺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)分子機制。方法：（1）運用慢病毒載體轉(zhuǎn)染技術(shù)，構(gòu)建IL-6過表達的前列腺癌LNCaP細胞株，利用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞綠色熒光的表達以明確慢病毒轉(zhuǎn)染情況，在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化；運用ELISA檢測IL-6表達水平；運用MTT技術(shù)比較IL-6過表達LNCaP細胞（LNCaP-IL-6）與空病毒載體轉(zhuǎn)染的LNCaP細胞（LNCaP-ctr）在比卡魯胺處理不同時間段的生存率；運用western blot技術(shù)比較IL-6過表達的LNCaP細胞和正常LNCaP細胞Twist和E-cadherin蛋白表達；運用RT-PCR技術(shù)比較上述蛋白的基因轉(zhuǎn)錄水平。（2）加入不同濃度的二甲雙胍刺激，運用MTT實驗檢測不同濃度的二甲雙胍對正常LNCaP和IL-6過表達的LNCaP細胞生存率的影響，并選取最佳工作濃度；流式細胞技術(shù)檢測細胞周期；將LNCaP-IL-6細胞分為二甲雙胍處理組與非... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

慢病毒載體轉(zhuǎn)染LNCaP細胞后采用激光共聚焦顯微鏡掃描綠色熒光表達情況（×200）

LNCaP-ctr和LNCaP-IL-6細胞形態(tài)觀察Fig1-3MorphologyobservationofLNCaP-ctrandLNCaP-IL-6cells.A:LNCaP-ctr(×200);B:LNCaP-IL-6(×200);C:LNCaP-ctr(×400);D:LNCaP-IL-6(×400)

0.2.4.6.81.2.41 2 3 time（day）圖 1-4 各組細胞生長曲線Fig 1-4 Cell growth curve in each group1 2 3

【參考文獻】：
期刊論文
[1]2003～2007年中國前列腺癌發(fā)病與死亡分析[J]. 韓仁強,武鳴,陳萬青,張思維,鄭榮壽.  中國腫瘤. 2012(11)
[2]Epidemiology of prostate cancer and treatment remarks[J]. Stefano Arcangeli,Valentina Pinzi,Giorgio Arcangeli.  World Journal of Radiology. 2012(06)



本文編號：3301387