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丙酮酸脫氫酶激酶4在膀胱癌化療耐藥中的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-06-20 09:48
  目的探討丙酮酸脫氫酶激酶4(PKD4)在膀胱癌化療耐藥中的作用。方法通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)膀胱癌耐藥細(xì)胞253J/DOX細(xì)胞株及人膀胱癌253J細(xì)胞系中PKD4的表達(dá)差異;通過siRNA轉(zhuǎn)染降低253J/DOX細(xì)胞中PKD4的表達(dá),噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞半抑制濃度(IC50)的變化,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化,蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)細(xì)胞抗凋亡蛋白(Bcl-2蛋白)表達(dá)的變化情況。結(jié)果 qRT-PCR結(jié)果顯示,PKD4在253J/DOX膀胱癌耐藥細(xì)胞表達(dá)明顯高于人膀胱癌253J細(xì)胞系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);MTT結(jié)果顯示,相對(duì)于陰性對(duì)照組,干擾PKD4的253J/DOX細(xì)胞株的IC50明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示,在相同劑量化療藥物作用下,干擾PKD4后253J/DOX細(xì)胞凋亡率明顯高于陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Western blot結(jié)果顯示,干擾PKD4表達(dá)可明顯降低Bcl-2蛋白表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 PKD4在膀胱癌化療... 

【文章來源】:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,17(03)

【文章頁數(shù)】:3 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 儀器與試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
        1.2.3 qRT-PCR分析PKD4的表達(dá)[6]
        1.2.4 噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)體外藥物靈敏度[8-9]
        1.2.5 流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡
        1.2.6 蛋白質(zhì)印跡法(Western
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 PKD4在膀胱癌細(xì)胞中的表達(dá)水平
    2.2 干擾PKD4后膀胱癌細(xì)胞體外藥物靈敏度的變化
    2.3 干擾PKD4后化療藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的變化
    2.4 干擾PKD4后Bcl-2蛋白表達(dá)的變化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Sox2對(duì)膀胱癌細(xì)胞化療耐藥的影響及其分子機(jī)制的探討[J]. 張義,段良斌,宋超,廖文彪,喻華,周琦.  中國(guó)腫瘤. 2018(05)
[2]LRIG3基因過表達(dá)對(duì)膀胱癌耐藥細(xì)胞株順鉑敏感性的作用及機(jī)制[J]. 倪釗,王勤章,李應(yīng)龍,李強(qiáng),錢彪,王新敏,歐陽松,李晨,董洪超,高存祥,劉志立.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2018(02)
[3]丙酮酸脫氫酶激酶4在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 陳艷榮,彭媛,歐娟娟,張?jiān)?梁后杰.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(11)
[4]USP22 aiRNA通過Mdm2-p53通路抑制膀胱癌耐藥細(xì)胞株T24/MMC的增殖[J]. 呂磊,袁敬東,黃韜,吳維,黃遂斌,章傳華.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(06)
[5]膀胱癌T24順鉑耐藥細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特性[J]. 趙嫚,張曼,馬萍.  標(biāo)記免疫分析與臨床. 2015(04)
[6]姜黃素對(duì)人膀胱癌細(xì)胞系T24體外侵襲的作用[J]. 李倩,蘇宇,陳亞娟,閻升光,孫紅.  北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(02)
[7]FGFR2IIIc在膀胱癌化療耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)及意義[J]. 陳玉樂,張林琳,吳開杰,曾津,高楊,王新陽,李宏宏,張心湜,賀大林.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2014(01)



本文編號(hào):3238963

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