microRNA-155在糖尿病腎病腎小球內(nèi)皮細胞損傷中的作用機制研究
發(fā)布時間:2021-05-22 03:03
研究背景糖尿病腎。╠iabetic nephropathy,DN)是糖尿病的常見和嚴(yán)重并發(fā)癥,20%-40%的糖尿病患者會進展為DN。在西方國家中DN是終末期腎臟病(end stage renal disease,ESRD)的首要原因,也是糖尿病致命的重要原因。在我國,DN患者的發(fā)病率也逐年上升,已經(jīng)成為ESRD的主要病因之一。2010年對中國近10萬名成年人流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果:中國成年人糖尿病患病率11.6%,患者約1.14億。糖尿病前期患病率估計為50.1%,患者約4.93億。以糖尿病腎病患者經(jīng)過1020年50%發(fā)展至ESRD計算,未來1020年我國新增糖尿病腎病引發(fā)的尿毒癥患者1500萬,將給國民身心健康和社會經(jīng)濟發(fā)展帶來沉重負擔(dān)。而糖尿病腎病的發(fā)病是由多因素共同造成的,發(fā)病機制仍不清楚,治療手段也相對局限,目前的臨床治療只能緩解病情進展而無法逆轉(zhuǎn)或根治疾病。因此研究糖尿病腎病的發(fā)病機制,尋找新的治療靶點對于疾病的早期預(yù)防和臨床治療具有重要意義,成為臨床和科研工作者的重要任務(wù)和國家的重大需求。人腎小球內(nèi)皮細胞(human renal g...
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實驗細胞、儀器及試劑
1 實驗細胞來源
2 主要實驗儀器與設(shè)備
3 主要實驗試劑及來源
4 主要實驗溶液的配制
實驗方法
1 人腎小球內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)
1.1 人腎小球內(nèi)皮細胞的復(fù)蘇
1.2 人腎小球內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與傳代
1.3 人腎小球內(nèi)皮細胞的凍存
2 實驗分組
2.1 高糖刺激對內(nèi)皮細胞炎癥因子和細胞凋亡的影響
2.2 高糖刺激下轉(zhuǎn)染miR-155對ETS-1 及內(nèi)皮細胞炎癥因子和細胞凋亡的影響
2.3 高糖刺激下轉(zhuǎn)染ETS-1 siRNA對 VCAM-1、MCP-1 的調(diào)控作用
3 人腎小球內(nèi)皮細胞的轉(zhuǎn)染
3.1 轉(zhuǎn)染試劑配制
3.2 轉(zhuǎn)染具體步驟
4 蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)檢測蛋白表達
4.1 提取細胞總蛋白
4.2 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
5 細胞免疫熒光
6 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
1 細胞培養(yǎng)、傳代與生長情況觀察
2 高滲、高糖及miR-155 轉(zhuǎn)染后細胞生長情況的光鏡結(jié)果
3 高糖刺激對內(nèi)皮細胞炎癥、凋亡的影響
4 高糖刺激下轉(zhuǎn)染miR-155對ETS-1 及內(nèi)皮細胞炎癥、凋亡的影響
5 高糖刺激下轉(zhuǎn)染ETS-1 siRNA對下游效應(yīng)因子的調(diào)控作用
討論
結(jié)論
參考文獻
英文縮寫注釋
文獻綜述
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]糖尿病腎病發(fā)病機制探討及最新治療進展[J]. 王魯奎. 基層醫(yī)學(xué)論壇. 2018(07)
[2]糖尿病腎病的治療進展淺析[J]. 魏敏,姜澤,楊靜博,韓淑英. 中國高新科技. 2018(04)
[3]MiR-204降調(diào)Caveolin-1表達降低HRGECs對大分子蛋白的通透性[J]. 杜菲,徐欽洋,蔣榮珍. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2017(04)
[4]ROBO4過表達抑制高糖條件下人腎小球內(nèi)皮細胞高通透性的體外研究[J]. 唐璐瑤,劉軍輝,候世會,官濤,黃云劍. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
[5]糖尿病腎病的臨床危險因素[J]. 劉東偉,潘少康,劉章鎖. 中國實用內(nèi)科雜志. 2017(03)
[6]糖尿病腎病發(fā)病的危險因素分析[J]. 李艷麗,廖勇敢,李曉雯,鄭海燕,黃明煒,陳思思,汪茜,喻雄杰,丁洪成. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017(02)
[7]肝X受體激動劑上調(diào)人腎小球內(nèi)皮細胞血栓調(diào)節(jié)蛋白表達的機制和作用[J]. 丁涵露,李怡,馮韻霖,陳瑾,鐘翔,王楠,汪偉,張萍,王莉. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2016(05)
[8]內(nèi)皮細胞損傷在糖尿病腎病發(fā)病機制中的作用[J]. 趙鵬鳴,王儉勤,梁耀軍. 中國糖尿病雜志. 2016(02)
[9]子癇前期血清通過Caveolin-1增加腎小球內(nèi)皮細胞通透性[J]. 徐欽洋,杜菲,蔣榮珍. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2016(01)
[10]糖尿病腎病的相關(guān)危險因素分析[J]. 王潔,何媛,于珮. 國際內(nèi)分泌代謝雜志. 2015 (03)
本文編號:3200857
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實驗細胞、儀器及試劑
1 實驗細胞來源
2 主要實驗儀器與設(shè)備
3 主要實驗試劑及來源
4 主要實驗溶液的配制
實驗方法
1 人腎小球內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)
1.1 人腎小球內(nèi)皮細胞的復(fù)蘇
1.2 人腎小球內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與傳代
1.3 人腎小球內(nèi)皮細胞的凍存
2 實驗分組
2.1 高糖刺激對內(nèi)皮細胞炎癥因子和細胞凋亡的影響
2.2 高糖刺激下轉(zhuǎn)染miR-155對ETS-1 及內(nèi)皮細胞炎癥因子和細胞凋亡的影響
2.3 高糖刺激下轉(zhuǎn)染ETS-1 siRNA對 VCAM-1、MCP-1 的調(diào)控作用
3 人腎小球內(nèi)皮細胞的轉(zhuǎn)染
3.1 轉(zhuǎn)染試劑配制
3.2 轉(zhuǎn)染具體步驟
4 蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)檢測蛋白表達
4.1 提取細胞總蛋白
4.2 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
5 細胞免疫熒光
6 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
1 細胞培養(yǎng)、傳代與生長情況觀察
2 高滲、高糖及miR-155 轉(zhuǎn)染后細胞生長情況的光鏡結(jié)果
3 高糖刺激對內(nèi)皮細胞炎癥、凋亡的影響
4 高糖刺激下轉(zhuǎn)染miR-155對ETS-1 及內(nèi)皮細胞炎癥、凋亡的影響
5 高糖刺激下轉(zhuǎn)染ETS-1 siRNA對下游效應(yīng)因子的調(diào)控作用
討論
結(jié)論
參考文獻
英文縮寫注釋
文獻綜述
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]糖尿病腎病發(fā)病機制探討及最新治療進展[J]. 王魯奎. 基層醫(yī)學(xué)論壇. 2018(07)
[2]糖尿病腎病的治療進展淺析[J]. 魏敏,姜澤,楊靜博,韓淑英. 中國高新科技. 2018(04)
[3]MiR-204降調(diào)Caveolin-1表達降低HRGECs對大分子蛋白的通透性[J]. 杜菲,徐欽洋,蔣榮珍. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2017(04)
[4]ROBO4過表達抑制高糖條件下人腎小球內(nèi)皮細胞高通透性的體外研究[J]. 唐璐瑤,劉軍輝,候世會,官濤,黃云劍. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
[5]糖尿病腎病的臨床危險因素[J]. 劉東偉,潘少康,劉章鎖. 中國實用內(nèi)科雜志. 2017(03)
[6]糖尿病腎病發(fā)病的危險因素分析[J]. 李艷麗,廖勇敢,李曉雯,鄭海燕,黃明煒,陳思思,汪茜,喻雄杰,丁洪成. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017(02)
[7]肝X受體激動劑上調(diào)人腎小球內(nèi)皮細胞血栓調(diào)節(jié)蛋白表達的機制和作用[J]. 丁涵露,李怡,馮韻霖,陳瑾,鐘翔,王楠,汪偉,張萍,王莉. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2016(05)
[8]內(nèi)皮細胞損傷在糖尿病腎病發(fā)病機制中的作用[J]. 趙鵬鳴,王儉勤,梁耀軍. 中國糖尿病雜志. 2016(02)
[9]子癇前期血清通過Caveolin-1增加腎小球內(nèi)皮細胞通透性[J]. 徐欽洋,杜菲,蔣榮珍. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2016(01)
[10]糖尿病腎病的相關(guān)危險因素分析[J]. 王潔,何媛,于珮. 國際內(nèi)分泌代謝雜志. 2015 (03)
本文編號:3200857
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