c-Myb通過結(jié)合突變的3’LTR上調(diào)syncytin-1的表達(dá)參與膀胱癌發(fā)生的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-17 05:36
目的:人類內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(Human Endogenous Retrovirus,HERV)作為一種潛在的“原癌基因”元件參與到腫瘤的發(fā)生過程中。在本研究中,運(yùn)用分子生物學(xué)和分子模擬的方法,探討c-Myb通過與突變的HERV-W3’端長末端重復(fù)序列(long-terminal repeat, LTR)結(jié)合調(diào)控HERV-W env (syncytin-1)基因的表達(dá),進(jìn)而參與到膀胱癌的發(fā)生過程中。從腫瘤病毒學(xué)的角度研究HERV-W家族與膀胱癌的發(fā)生機(jī)制。方法:1、獲取82例人膀胱癌及癌旁組織樣本,培養(yǎng)人膀胱癌細(xì)胞系(T24和5637)及永生化的人膀胱上皮細(xì)胞系SV-HUC-1。利用半定量RT-PCR、熒光定量RT-PCR、western blot和免疫組化四種技術(shù)檢測syncytin-1在膀胱癌組織中的表達(dá)情況。2、利用流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、MTT實(shí)驗(yàn)檢測syncytin-1基因的對細(xì)胞的增殖能力,利用軟瓊脂集落實(shí)驗(yàn)和裸鼠致瘤實(shí)驗(yàn)分析syncytin-1基因的致瘤潛能。3、利用PCR擴(kuò)增及序列比對技術(shù)分析HERV-W3’LTR和5’LTR在膀胱癌組織及癌旁組織中之間的差異。4、利用分子克隆技術(shù)...
【文章來源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:138 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分:HERV-W env(syncytin-1)在膀胱癌中表達(dá)差異分析及功能研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5 討論
第二部分:HERV-W LTR突變與膀胱癌的相關(guān)性研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5 討論
第三部分:c-Myb結(jié)合突變的3'LTR上調(diào)HERV-W env(syncytin-1)在膀胱癌中的表達(dá)研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 結(jié)果
5 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
附錄
攻博期間發(fā)表的論文
致謝
本文編號(hào):3191186
【文章來源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:138 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
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引言
第一部分:HERV-W env(syncytin-1)在膀胱癌中表達(dá)差異分析及功能研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5 討論
第二部分:HERV-W LTR突變與膀胱癌的相關(guān)性研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5 討論
第三部分:c-Myb結(jié)合突變的3'LTR上調(diào)HERV-W env(syncytin-1)在膀胱癌中的表達(dá)研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 結(jié)果
5 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
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