發(fā)布時(shí)間：2021-05-16 02:49

　　目的:DNA損傷和糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),但具體機(jī)制尚不明確,本研究旨在探究CREB/miR-22/DDIT4通路在糖尿病腎病中促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞DNA損傷的具體機(jī)制,以期進(jìn)一步闡明糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制,為防治DN尋找新的有效靶點(diǎn)。方法:（1）用C57BL小鼠建立糖尿病腎病模型,16周后處死,分析其生化指標(biāo)并對腎臟組織做HE染色觀察,通過western blot技術(shù)檢測腎臟組織中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4、p-CREB的蛋白表達(dá)水平。（2）分別用高糖培養(yǎng)基和正常糖培養(yǎng)基培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞（NRK-52E）細(xì)胞,通過彗星實(shí)驗(yàn)檢測DNA雙鏈斷裂程度,通過細(xì)胞流式技術(shù)檢測細(xì)胞周期的影響,通過western blot技術(shù)檢測細(xì)胞中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4、CREB磷酸化水平。（3）構(gòu)建DDIT4過表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后通過彗星實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)DDIT4對DNA雙鏈斷裂的影響,通過western blot技術(shù)檢測細(xì)胞中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4的蛋白表達(dá)水平。（4）通過miRanda和TargetScan預(yù)測miR-22對... 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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結(jié)果
討論
結(jié)論
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致謝
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本文編號(hào)：3188820