目的:研究SPAG9對(duì)膀胱癌細(xì)胞侵襲和遷移等生物學(xué)行為的影響,進(jìn)一步探究膀胱癌轉(zhuǎn)移機(jī)制,尋找新型治療膀胱癌的靶點(diǎn)。方法:1、運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR和免疫組化技術(shù)定量及定性測(cè)量SPAG9以及HEF1在膀胱移行上皮癌及癌旁組織中的表達(dá)情況。2、構(gòu)建SPAG9和HEF1特征性沉默和過(guò)表達(dá)載體,運(yùn)用RNA干擾技術(shù)轉(zhuǎn)染T24和5637細(xì)胞構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,通過(guò)Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)研究不同表達(dá)狀況的SPAG9/HEF1對(duì)細(xì)胞遷移侵襲能力的影響。3、構(gòu)建裸鼠接種模型,研究體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中SPAG9的不同表達(dá)對(duì)HEF1蛋白的影響,同時(shí)運(yùn)用Western Blot技術(shù)研究其外情況下SPAG9的不同表達(dá)對(duì)HEF1的干擾程度。4、查閱文獻(xiàn)選定EMT特征蛋白,運(yùn)用Western Blot分析SPAG9/HEF1不同表達(dá)情況下對(duì)相關(guān)EMT蛋白表程度的影響。5、Western Blot測(cè)定HEF1蛋白表達(dá)高低對(duì)Rac1信號(hào)通路的影響,結(jié)合復(fù)合轉(zhuǎn)染補(bǔ)救實(shí)驗(yàn)決定HEF1和Rac1通路在膀胱癌細(xì)胞中的具體調(diào)節(jié)關(guān)系。6、統(tǒng)計(jì)臨床獲得標(biāo)本中分類數(shù)據(jù)如年齡和腫瘤大小等指征數(shù)據(jù)與相應(yīng)標(biāo)本中SPAG9/HEF1表達(dá)高低的相關(guān)... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
縮略詞
第1章 緒論
    1.1 SPAG9結(jié)構(gòu)功能與泌尿系腫瘤相關(guān)性
    1.2 HEF1的結(jié)構(gòu)功能與泌尿系腫瘤的相關(guān)性
    1.3 RaC1結(jié)構(gòu)功能與泌尿系腫瘤相關(guān)性
    1.4 小結(jié)
第2章 SPAG9與HEF1在膀胱癌組織中的表達(dá)情況
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.3 結(jié)果分析
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 SPAG9和HEF1在膀胱移行細(xì)胞癌中的功能研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)SPAG9可以顯著調(diào)節(jié)HEF1表達(dá)水平
        3.3.2 SPAG9能促進(jìn)膀胱移行上皮癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力并能調(diào)節(jié)EMT
        3.3.3 HEF表達(dá)能影響膀胱癌的侵襲和遷移能力并能激活Rac1蛋白和調(diào)節(jié)EMT
        3.3.4 下調(diào)HEF1能夠拮抗SPAG9帶來(lái)的細(xì)胞惡性表型
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 SPAG9通過(guò)HEF1調(diào)節(jié)RAC1信號(hào)通路
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
創(chuàng)新點(diǎn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3185891