第一部分sM8α真核表達載體的構(gòu)建、擴增、測序鑒定及體外表達驗證目的：檢測前列腺癌三系LNCaP、PC-3、DU145細胞中sM8α的表達,并構(gòu)建sM8α真核表達載體（pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒）并進行測序。測序鑒定成功后,將pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒轉(zhuǎn)染雄激素依賴性前列腺癌LNCaP細胞,為研究sM8α對前列腺癌腫瘤生物學行為的影響提供實驗基礎(chǔ)。方法：1)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）檢測前列腺癌三系LNCaP、 PC-3、DU145細胞中sM8α的表達,通過高保真PCR獲得sM8a-His片段,通過雙酶切和T4連接酶構(gòu)建pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒,進行測序后,與pubmed上的基因序列進行比對。2)傳代培養(yǎng)293T細胞,并將pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒及空載對照質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到293T細胞中,48h后western-bloting鑒定sM8a-His融合蛋白表達。結(jié)果：RT-PCR檢測到sM8a mRNA在三種前列腺癌細胞中低表達。成功構(gòu)建pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒并且測序完全正確。pcDN... 

【文章來源】：武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 sM8α真核表達載體的構(gòu)建、擴增、測序鑒定及體外表達驗證
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
第二部分 sM8α對前列腺癌LNCaP細胞體外腫瘤生物學行為影響
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
第三部分 前列腺癌LNCaP細胞中sM8α和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路的關(guān)系
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀博士期間發(fā)表的科研成果目錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]有絲分裂激活蛋白激酶激活與前列腺癌的惡化進展[J]. 葉定偉,李慧,Priscilla Chauvin,孫穎浩,錢松溪,鄭家富,馬永江.  腫瘤防治雜志. 2002(02)



本文編號：3037789