發(fā)布時(shí)間：2020-12-28 11:31

　　目的:糖尿病腎�。―N）又稱糖尿病腎小球硬化癥,糖尿病腎�。―N）是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥,同時(shí)也是導(dǎo)致糖尿病患者致死的首位原因。DN的發(fā)病機(jī)制龐雜,參與調(diào)控的通路眾多,在診斷上一般依賴尿微量白蛋白和腎臟組織活檢,缺乏有效的、穩(wěn)定的、非創(chuàng)傷性的檢測(cè)方法。醫(yī)治上給予降血糖和血壓,僅能延緩DN的發(fā)展。而人工透析和腎臟移植治療不僅代價(jià)高昂,而且應(yīng)用上有局限性。隨著對(duì)DN研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)自噬與DN腎臟纖維化聯(lián)系尤為密切。另一方面,miRNA是在機(jī)體穩(wěn)定存在的、擁有高度組織特異性的小分子RNA,在DN發(fā)生發(fā)展過(guò)程中作用重大。本研究旨在通過(guò)建立db/db小鼠模型和人腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng),對(duì)miR-130b的表達(dá)、纖維化相關(guān)蛋白以及自噬活性水平進(jìn)行研究,探討miR-130b對(duì)DN的自噬與腎臟纖維化的影響,并對(duì)其靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè),以揭示糖尿病腎病纖維化過(guò)程中的潛在機(jī)制,為DN的腎臟纖維化的預(yù)防和治療提供新方向。方法:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用db/db小鼠及C57BLKS小鼠建立糖尿病腎病模型和對(duì)照,監(jiān)測(cè)各組小鼠的一般情況和指標(biāo),喂養(yǎng)結(jié)束后收集相應(yīng)標(biāo)本檢測(cè)小鼠的空腹血糖、血肌酐等,并用HE和Masson染色觀察... 

【文章來(lái)源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景與現(xiàn)狀
    1.2 糖尿病腎病概述
    1.3 微小RNA與糖尿病腎病之間的關(guān)系
    1.4 自噬與糖尿病腎病之間的關(guān)系
    1.5 微小RNAs對(duì)自噬的調(diào)控
    1.6 miR-130b、TGF－β1、自噬與糖尿病腎病相關(guān)性分析及展望
第2章 Db/db小鼠糖尿病腎病模型的建立及相關(guān)因子表達(dá)
    2.1 研究對(duì)象與實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.1 研究對(duì)象
        2.1.2 研究方法
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 主要儀器設(shè)備
    2.4 主要試劑配制
    2.5 小鼠的一般生化指標(biāo)監(jiān)測(cè)
    2.6 小鼠的腎組織病理學(xué)觀察
    2.7 qRT-PCR檢測(cè)
    2.8 小鼠腎組織蛋白的提取和濃度測(cè)定
    2.9 Western blot檢測(cè)
第3章 Db/db小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
    3.1 .各組小鼠空腹血糖和血清肌酐的變化
        3.1.1 小鼠空腹血糖的變化
        3.1.2 小鼠血清肌酐的變化
    3.2 各組小鼠腎臟組織病理學(xué)變化
        3.2.1 HE染色結(jié)果
        3.2.2 Masson染色結(jié)果
        3.2.3 透射電鏡觀察各組小鼠結(jié)果
    3.3 各組小鼠腎臟miR-130b、纖維化因子FN,colI mRNA的表達(dá)情況
    3.4 免疫印跡法結(jié)果
    3.5 討論
第4章 miR-130b對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞自噬和纖維化的影響
    4.1 人腎小球系膜細(xì)胞（HMC）的分組情況及培養(yǎng)方法
        4.1.1 細(xì)胞種類及來(lái)源
        4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.4 常用試劑配制
        4.1.5 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        4.1.6 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組情況
    4.2 Westernblot實(shí)驗(yàn)
    4.3 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
    4.4 JC-1 線粒體膜電位的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
第5章 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
    5.1 各組HMC細(xì)胞miR-130b及纖維化因子mRNA表達(dá)情況
    5.2 各組HMC細(xì)胞纖維化相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
    5.3 各組HMC細(xì)胞自噬水平的表達(dá)情況
    5.4 各組HMC細(xì)胞JC-1 線粒體膜電位的檢測(cè)結(jié)果
    5.5 各組HMC細(xì)胞對(duì)miRNA-130b靶基因ACVR1 的表達(dá)情況
    5.6 討論
第6章 小結(jié)
第7章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略語(yǔ)詞匯表
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]自噬通過(guò)mTOR信號(hào)通路保護(hù)胃粘膜上皮細(xì)胞免于乙醇誘導(dǎo)的氧化損傷[D]. 常偉龍.華中科技大學(xué) 2016

碩士論文
[1]miR-130b調(diào)控TGF-β1/Smads信號(hào)通路對(duì)糖尿病腎臟纖維化的作用和機(jī)制研究[D]. 史景霞.河南科技大學(xué) 2018



本文編號(hào)：2943679