發(fā)布時間：2020-12-22 12:51

　　為了研究免疫性不育的相關(guān)機(jī)制,本課題小組在前期工作中應(yīng)用免疫共沉淀結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),篩選與不育相關(guān)的精子膜蛋白,通過生物信息軟件對其進(jìn)行分析,篩選出15種與不育相關(guān)的精子膜蛋白。我們對其中一種蛋白:載脂蛋白A1（Apolipoprotein A1,APOA1）進(jìn)行分析,研究其在精子中的定位及相關(guān)功能。收集來自中國人民解放軍總醫(yī)院健康查體男性精液標(biāo)本26例。采用PCR技術(shù)和免疫印跡技術(shù)從分子和蛋白水平檢測APOA1的存在,并采用免疫熒光共聚焦顯微鏡觀察APOA1在人精子中的定位。設(shè)空白對照組、兔多克隆抗體IgG組和10、20和40μg/ml的APOA1抗體處理精液標(biāo)本,37℃溫箱孵育精子1、2和3 h后,通過精液分析儀觀察精子前向運動變化,AnnexinⅤ檢測精子的凋亡率和JC法檢測精子線粒體膜電位變化。40μg/ml的IgG抗體和APOA1抗體分別孵育小鼠精子1h后,進(jìn)行小鼠體外受精實驗,觀察兩組受精率的差異。收集不同活力的精液標(biāo)本83例,采用流式細(xì)胞儀分析精子中APOA1含量百分比,統(tǒng)計學(xué)軟件分析其與精子活力的相關(guān)性。精子中存在APOA1的mRNA,其擴(kuò)增片段大小為190bp... 

【文章來源】：河北北方學(xué)院河北省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
附表
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 精子膜中膽固醇調(diào)節(jié)相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]免疫共沉淀聯(lián)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于精子膜蛋白篩選[J]. 梁爽,向代軍,王紅霞,馬駿龍,薛丹丹,劉培培,劉萍,姜文燦,苑曉舟,李新軍,葛素君,王成彬.  中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2017 (04)
[2]High-density lipoprotein and atherosclerosis: Roles of lipid transporters[J]. Yoshinari Uehara,Keijiro Saku.  World Journal of Cardiology. 2014(10)



本文編號：2931801