發(fā)布時(shí)間：2020-08-07 09:18

【摘要】：目的:(1)建立合適的水下爆炸沖擊波致兔急性腎損傷(AKI)的爆炸模型。(2)根據(jù)此模型,利用酶標(biāo)免疫吸附法(ELISA)檢測兔血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)、腎損傷因子-1(KIM-1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)三種細(xì)胞因子的表達(dá)量,同時(shí)利用Western blot分析腎組織MMP-9的表達(dá)情況,研究這些因子在水下爆炸沖擊波致兔AKI中的意義。方法:(1)40只新西蘭兔隨機(jī)分成4組:正常對(duì)照組(N1組)、兔距離爆炸源1.8m組、1.0m組和0.5m組,每組10只。麻醉后,以1.0g太安炸藥作為水下爆炸源,分別對(duì)三組實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行爆炸。爆炸后進(jìn)行簡單必要的救治,同時(shí)記錄爆炸后兔存活率及生理變化,采用ELISA測定4組不同時(shí)間段血清NGAL的濃度,于爆炸后24h取各組腎臟行病理切片檢查。(2)模型建立成功后,選取20只兔,隨機(jī)分成正常(N2)組和損傷(I)組,每組10只。以1.0 g太安炸藥作為水下爆炸源,對(duì)I組實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行水下爆炸,爆炸后進(jìn)行簡單的救治。采用ELISA測定兩組不同時(shí)間段血清NGAL、KIM-1和MMP-9的變化,采用Western blot分析法檢測腎組織MMP-9的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)24h內(nèi),對(duì)照組全部存活,病理示腎小球、腎小管及腎間質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰。1.8m組死亡1只,病理示灶狀出血。1.0m組死亡1只,病理示腎間質(zhì)內(nèi)較多出血并伴有炎性細(xì)胞浸潤。0.5m組當(dāng)場死亡1只,致傷后半小時(shí)死亡1只,8h后死亡2只,13h后死亡1只,病理示腎間質(zhì)內(nèi)可見大量出血并伴有較多炎性細(xì)胞浸潤。與對(duì)照組相比,爆炸組傷后4h血清中NGAL濃度開始上升(p0.05),24h仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)水下爆炸沖擊波致兔AKI,爆炸后各時(shí)間段比較,損傷組血清中NGAL、MMP-9的濃度均顯著高于正常組(P0.01);而2組血清KIM-1爆炸前后比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Western blot結(jié)果顯示正常對(duì)照組實(shí)驗(yàn)兔腎組織幾乎不表達(dá)MMP-9,而損傷組MMP-9的表達(dá)量明顯增加。結(jié)論:(1)兔距爆炸源1.0m處可模擬水下沖擊波效應(yīng),具有致死率低,重復(fù)性好的特點(diǎn),是一種穩(wěn)定可靠的水下爆炸致兔腎損傷的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?2)血清NGAL、MMP-9可以作為水下爆炸引起AKI的早期監(jiān)測因子。
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R692
【圖文】：

用剃毛刀進(jìn)行脫毛，露出頸部皮膚，用無菌碘伏棉球消毒，于頸部作 L 型逐層切開皮膚及皮下組織，仔細(xì)分離出左頸總動(dòng)脈，遠(yuǎn)心端 5 號(hào)絲線結(jié)扎，端置入留置針并固定。留置針置入成功后，隨即抽取 5ml 血液用于爆炸前NGAL 的檢測。松開實(shí)驗(yàn)兔并重新固定（背部向外，腹部緊貼木板），腎區(qū)減少兔毛對(duì)爆炸沖擊波的影響。隨后將兔垂直放于特制的保護(hù)箱中，兔腎區(qū)保護(hù)箱的窗口，窗口用薄膜封住，與爆炸源位于同一水平面（約水下 15c其余部位（如頭部、胸部、四肢等）均保護(hù)在箱體內(nèi)，雙耳塞入脫脂棉球。組不同距離的實(shí)驗(yàn)兔依次放進(jìn)特定的水下爆炸環(huán)境下，以 1.0g 太安炸藥作下爆炸源，分別對(duì)三組實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行爆炸，爆炸由專業(yè)人員實(shí)施。爆炸后立即實(shí)驗(yàn)兔，清理呼吸道及口腔分泌物保持通暢，松開動(dòng)物改側(cè)臥位，記錄兔存及生理變化。分別于爆炸后 4h、12h、24h 采血 5mL，采用 ELISA 法測定不間段血清 NGAL 的濃度，于爆炸后 24h 放血致死實(shí)驗(yàn)兔，解剖胸腔及腹腔各組腎臟行病理切片檢查。對(duì)照組除不致傷外，其余步驟均與爆炸組相同

用剃毛刀進(jìn)行脫毛，露出頸部皮膚，用無菌碘伏棉球消毒，于頸部作 L 型逐層切開皮膚及皮下組織，仔細(xì)分離出左頸總動(dòng)脈，遠(yuǎn)心端 5 號(hào)絲線結(jié)扎，端置入留置針并固定。留置針置入成功后，隨即抽取 5ml 血液用于爆炸前NGAL 的檢測。松開實(shí)驗(yàn)兔并重新固定（背部向外，腹部緊貼木板），腎區(qū)減少兔毛對(duì)爆炸沖擊波的影響。隨后將兔垂直放于特制的保護(hù)箱中，兔腎區(qū)保護(hù)箱的窗口，窗口用薄膜封住，與爆炸源位于同一水平面（約水下 15c其余部位（如頭部、胸部、四肢等）均保護(hù)在箱體內(nèi)，雙耳塞入脫脂棉球。組不同距離的實(shí)驗(yàn)兔依次放進(jìn)特定的水下爆炸環(huán)境下，以 1.0g 太安炸藥作下爆炸源，分別對(duì)三組實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行爆炸，爆炸由專業(yè)人員實(shí)施。爆炸后立即實(shí)驗(yàn)兔，清理呼吸道及口腔分泌物保持通暢，松開動(dòng)物改側(cè)臥位，記錄兔存及生理變化。分別于爆炸后 4h、12h、24h 采血 5mL，采用 ELISA 法測定不間段血清 NGAL 的濃度，于爆炸后 24h 放血致死實(shí)驗(yàn)兔，解剖胸腔及腹腔各組腎臟行病理切片檢查。對(duì)照組除不致傷外，其余步驟均與爆炸組相同

P＜0.05 視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié)果2.1 一般情況24h 內(nèi)，正常對(duì)照組全部存活，1.8m 組和 1.0m 組均死亡 1 只，存活率 90％0.5m 組當(dāng)場死亡 1 只，致傷后半小時(shí)死亡 1 只，8h 后死亡 2 只，13h 后死亡只，死亡率 50％。2.2 病理結(jié)果爆炸組均可見不同程度的腎損傷，總體上，兔距爆炸源距離越近，損傷越重24h 后，正常組兔腎小球、腎小管及腎間質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰，腎小管內(nèi)無紅染物質(zhì)、胞碎片，腎間質(zhì)無出血及炎性細(xì)胞浸潤；1.8m 組可見灶狀出血；1.0m 組腎間內(nèi)較多出血并伴有炎性細(xì)胞浸潤，管腔內(nèi)見細(xì)胞碎片（圖 1、圖 2）；0.5m 組間質(zhì)內(nèi)可見大量出血并伴有較多炎性細(xì)胞浸潤，間質(zhì)水腫明顯（圖 3）。

【參考文獻(xiàn)】

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3 谷翠芝;李清初;曾凝;唐余廣;廉溪;覃新芳;馬文峰;;急性腎損傷患者NGAL、KIM-1與血肌酐的相關(guān)性[J];廣東醫(yī)學(xué);2015年20期

4 鄧超;王國增;章t

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