【摘要】：目的:腎透明細胞癌其胞質富含脂質,具有脂代謝重編程的特征。本課題組前期全基因組測序發(fā)現(xiàn)腫瘤中組織中亮氨酰-tRNA合成酶(mitochondrial leucyl-tRNA synthetase 2,LARS2)基因突變,但其對腎透明細胞癌脂代謝作用尚未闡明。因此,本研究旨在驗證通過脂代謝組學分析發(fā)現(xiàn)的關鍵基因三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ATP-binding cassette,sub-family A,ABCA1),在腎透明細胞癌脂代謝重編程的的表達,探索LARS2調控ABCA1誘導腎透明細胞癌脂代謝再變編程的可能機制,進一步闡明LARS2在腎透明細胞癌脂代謝重編程過程中的功能和作用機制,為研究腎透明細胞癌的發(fā)生機制提供資料。方法:(1)對腎透明細胞癌組織切片和配對癌旁組織切片進行進行油紅染色(2)選擇本課題組前期構建的LARS2過表達的穩(wěn)轉細胞和對照細胞,以及LARS2低表達的穩(wěn)轉細胞及其對照細胞,進行脂代謝組學檢測,尋找到顯著差異脂質-膽固醇酯。隨后送檢60對腫瘤組織和配對癌旁組織再次進行脂代謝組學分析,進一步確認。根據(jù)結果,利用生物信息學預測分析軟件,尋找到編碼調控膽固醇酯代謝的關鍵基因ABCA1;(3)在上述細胞系中采用qT-PCR的方法同時檢測LARS2和ABCA1表達,并在90對腫瘤和配對癌旁組織中驗證;利用試劑盒檢測細胞株、腫瘤組織及配對癌旁組織的膽固醇酯濃度。依腫瘤組織表達LARS2水平高低分組,比較二組之間ABCA1表達水平差異及膽固醇酯水平。結果:腎透明細胞癌富含脂質,染色明顯。脂代謝組學共鑒定超過1000個脂類物質變化,涉及30亞類,提示腎透明細胞癌脂代謝重編程。結果分析顯示腫瘤組織和細胞內膽固醇酯(ChE)顯著增高,經生物信息學預測,三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ABCA1)為調控ChE表達關鍵酶基因。LARS作為抑癌基因在腫瘤中失活,過表達LARS2的腫瘤細胞株的ABCA1表達水平下調,膽固醇酯含量降低(P0.01)。腫瘤組織ABCA表達水平顯著高于配對瘤旁正常腎臟組織,高表達ABCA1的腫瘤組織膽固醇酯含量高于低表達者(P0.001);而LARS2表達水平高的腫瘤組織其ABCA1表達顯著下調,膽固醇酯含量也顯著低于LARS2表達低的組織(P0.01)。結論:腎透明細胞癌脂代謝重編程,以膽固醇酯富集為主要特點。ABCA1為負責調控膽固醇酯代謝關鍵酶的基因,其高表達與膽固醇酯富集相關。LARS2作為抑癌基因在ccRCC中失活,過表達LARS2的細胞株其ABCA1表達降低,膽固醇酯含量低于對照細胞株及敲低LARS2的穩(wěn)轉細胞株。腫瘤組織內低表達LARS2者ABCA 1表達水平上調,膽固醇酯含量隨之增高,提示因LARS2失活后誘導ABCA1上調,進而促進腎透明細胞癌脂代謝重編程。
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R737.11
【圖文】：

邐解放軍醫(yī)學院碩士學位論文評分，Ｒ２Ｙ接近１，Ｑ２均大于０．６，模型穩(wěn)固可靠。在ＯＰＬＳ－ＤＡ模型中，以ＶＩＰ同時滿足Ｐ〈0．邋０５為顯著指標，共選出如圖所示顯著性差異脂質（表４），隨后差異脂質進行了聚類分析（圖４）、相關分析（圖５）以及脂質亞類變化分析（６）通過比較和分析Ａ－Ｂ、Ａ－Ｃ、Ｂ－Ｃ以及Ｂ－Ｄ四組數(shù)據(jù)及圖表，我們最終發(fā)現(xiàn)固醇酯這一差異脂質在不僅差異變化明顯，而且差異可靠性高。同樣，在組織本中，共鑒定１０６４個脂類化合物，涉及３２個亞類。結合四個組組間、組內對數(shù)據(jù)分析，以Ｂ－Ａ對比分析為例，結果如圖７、８所示，我們在腫瘤－健康組織本的分析中發(fā)現(xiàn)ＣｈＥ表達具有差異性，且符合細胞樣本分析結果。逡逑

顯著性差異脂質分子聚類分析

顯著性差異脂質分子相關性分析

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 L.C. Adams;P. Jurmeister;B. Ralla;K.K. Bressem;U.L. Fahlenkamp;G. Engel;張曉琦;;采用細胞外體積分數(shù)評估腎透明細胞癌的分級：初步結果和組織病理學發(fā)現(xiàn)[J];國際醫(yī)學放射學雜志;2020年01期

2 潘宏鑫;陳述;李長福;李海波;;基于生物信息學方法識別腎透明細胞癌發(fā)病機制相關基因[J];哈爾濱醫(yī)科大學學報;2019年05期

3 鄭丹琴;劉志磊;朱松杰;呂錦晶;章文韻;鄧海騰;周韌;;過氧化物還原酶3參與腎透明細胞癌發(fā)生與發(fā)展的分子機制[J];中山大學學報(醫(yī)學版);2019年02期

4 楊建;劉建和;李沛;王光;楊童欣;石鑫;;早期腎透明細胞癌的高風險因素及預后分析[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2019年02期

5 周燁;施倩倩;趙友;崔笠;徐仁芳;;腎透明細胞癌差異基因的生物信息學分析與驗證[J];基礎醫(yī)學與臨床;2019年10期

6 徐輝景;張梅花;余德洪;馮耀霞;;多層螺旋CT檢查診斷腎透明細胞癌病理對比分析[J];浙江中西醫(yī)結合雜志;2017年12期

7 孫連桃;肖偉利;;巨噬細胞移動抑制因子在腎透明細胞癌組織中的表達與意義[J];中國老年學雜志;2017年24期

8 潘險峰;;內皮細胞特異性分子水平與腎透明細胞癌發(fā)生及惡性程度的相關性[J];實用癌癥雜志;2018年02期

9 陳文峰;;后腹腔鏡腎癌根治術治療局限性腎透明細胞癌的臨床療效[J];中國醫(yī)藥指南;2015年31期

10 夏韓;哈木拉提·吐送;王文光;王玉杰;張立東;;漢族、維吾爾族腎透明細胞癌患者血清差異氨基酸的比較[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2015年11期

相關會議論文 前10條

1 楊曼;;磁共振擴散峰度成像與腎透明細胞癌臨床病理預后因素的相關性研究[A];中國中西醫(yī)結合學會醫(yī)學影像專業(yè)委員會第十七次全國學術大會暨甘肅省中西醫(yī)結合學會醫(yī)學影像專業(yè)委員會第六屆學術年會資料匯編[C];2019年

2 桂定文;張青漢;;腎透明細胞癌頭皮轉移一例報告[A];第七次中國中西醫(yī)結合泌尿外科學術年會暨第二次廣東省中西醫(yī)結合泌尿外科學術年會論文集[C];2009年

3 劉婧;;腎透明細胞癌伴全身轉移在全身擴散加權成像的影像規(guī)律[A];中華醫(yī)學會第16次全國放射學學術大會論文匯編[C];2009年

4 吳俊;梅長林;趙海丹;戴兵;劉亞偉;;多囊蛋白-1在腎透明細胞癌及常染色體顯性多囊腎病患者體液中含量的比較研究[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術年會論文集[C];2006年

5 柏瑞;歐陜興;林偉光;;雙腎透明細胞癌胰腺轉移一例報告[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國放射學大會論文匯編（下冊）[C];2006年

6 何還珠;;腎透明細胞癌的1例報道[A];2003年全國醫(yī)學影像技術學術會議論文匯編[C];2003年

7 畢偉;徐麗偉;徐春媚;董曉秋;;腎透明細胞癌超聲造影模式及定量指標分析[A];中國超聲醫(yī)學工程學會第七屆全國腹部超聲學術會議學術論文匯編[C];2007年

8 徐麗偉;徐春媚;畢偉;董曉秋;;腎透明細胞癌超聲造影模式與其病理分化程度的相關性[A];中國超聲醫(yī)學工程學會第七屆全國腹部超聲學術會議學術論文匯編[C];2007年

9 鄭宇朋;;腎透明細胞癌三次轉移至鼻腔[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

10 耿江;方祖軍;吳忠;姜昊文;鄭捷;丁強;;腎透明細胞癌術后遠處轉移(附15例報告)[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

相關重要報紙文章 前3條

1 張中橋;Survivin在腎透明細胞癌中起重要作用[N];中國醫(yī)藥報;2006年

2 王茜;隱瞞病情可能更會嚇壞患者,好心態(tài)是良藥[N];新華每日電訊;2007年

3 本報記者 譚嘉;別把PET—CT當體檢“神器”[N];健康報;2013年

相關博士學位論文 前10條

1 董丹;LncRNA ZFAS1通過miR-10a/SKA1信號通路促進腎透明細胞癌增殖和轉移[D];中國醫(yī)科大學;2019年

2 景知非;miR-34a-5p對人腎透明細胞癌中p53/DAPK通路的調控及影響[D];中國醫(yī)科大學;2019年

3 孫雅玲;COMMD10基因在小鼠和人體組織中的表達與分布及生物信息挖掘[D];南方醫(yī)科大學;2018年

4 臧元偉;eIF3b在腎透明細胞癌中預后價值和生物學作用的研究[D];山東大學;2018年

5 穆中一;LncRNA AFAP1-AS1通過抑制PTEN-AKT信號通路誘導腎透明細胞癌生長和轉移[D];中國醫(yī)科大學;2018年

6 肖文;PGC1A/UCP1介導的脂質棕色化在腎透明細胞癌中作用以及機制研究[D];華中科技大學;2018年

7 楊帆;miR-543通過靶向KLF6調控腎透明細胞癌細胞增殖和侵襲的機制研究[D];中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學;2018年

8 王明磊;AHNAK2作為腎透明細胞癌的新型預后標志物及重要致癌蛋白的研究[D];上海交通大學;2017年

9 牛少曦;miR-19a和miR-19b通過作用于RhoB促進腎透明細胞癌惡性進展[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2018年

10 翟紅運;線粒體亮氨酰-tRNA合成酶失調在腎透明細胞癌中的作用及其機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2018年

相關碩士學位論文 前10條

1 謝傳昊;生長激素受體、胰島素樣生長因子-1受體、表皮生長因子受體在腎透明細胞癌中的表達及其意義[D];承德醫(yī)學院;2019年

2 王金龍;MiRNA聯(lián)合標記物對腎透明細胞癌發(fā)展及不良預后的評價分析[D];中國醫(yī)科大學;2019年

3 劉芳曉;lncRNA-CP通過調控HIF-1α/VEGFA軸影響腎透明細胞癌侵襲遷移的研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

4 宣云東;LARS2調控ABCA1誘導腎透明細胞癌脂代謝重編程的機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2019年

5 劉洋;Klotho過表達通過阻斷JAK2/STAT3信號通路抑制腎透明細胞癌生長及侵襲機制的研究[D];武漢大學;2018年

6 張小茜;腎透明細胞癌基因表達譜的生物信息學分析及ALDH6A1在腎透明細胞癌中的表達及其臨床意義研究[D];華中科技大學;2019年

7 吳亞飛;PPARG通過負調控Six2影響腎透明細胞癌的增殖和凋亡[D];重慶醫(yī)科大學;2019年

8 陳展;ABAT基因在腎透明細胞癌中的表達及其對腎癌細胞增殖、遷移、代謝的影響[D];廈門大學;2018年

9 崔強;NEDD4L在腎透明細胞癌中的表達及作用研究[D];廈門大學;2018年

10 徐明彬;術前外周血淋巴細胞與單核細胞比值和白蛋白在腎透明細胞癌預后評估中的價值[D];廣西醫(yī)科大學;2019年

本文編號：2776726