【摘要】：背景與目的近期侯凡凡及其團(tuán)隊研究發(fā)現(xiàn):長期暴露于霧霾當(dāng)中會增加膜性腎病的發(fā)病率,但其內(nèi)在的發(fā)病機(jī)制如何卻未有說明,既往文獻(xiàn)也無報道。但是既往報道表明作為腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)過濾血液的最后一道關(guān)卡,足細(xì)胞的結(jié)構(gòu)受損和蛋白尿的出現(xiàn)密切相關(guān),特別是臨床上以大量蛋白尿為主的腎小球腎炎,如膜性腎病(MN)、糖尿病腎病(DN),微小病變腎小球腎炎(MCD)等病理類型,并在腎臟病進(jìn)展中扮演重要角色。其中足細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)分化(EMT)在足細(xì)胞損傷中起著重要的作用。本研究目的:石墨烯是一種完全由碳原子組成二維納米材料,因其由炭元素組成及納米級粒子直徑的物理性質(zhì),可以作為PM2.5的模型之一來探究霧霾引起膜性腎病的內(nèi)在機(jī)制。方法(1)體外培養(yǎng)足細(xì)胞石墨烯以濃度0、10、20、40ug/ml的濃度刺激足細(xì)胞24h;(2)實時定量PCR及Western BLOT檢測EMT相關(guān)上皮表型蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin及間質(zhì)表型蛋白α-SMA、Desmin的m RNA及蛋白表達(dá),Western BLOT檢測信號通路蛋白NF-κBp65表達(dá)(3)在20ug/ml石墨烯中加入NF-κB特異性抑制劑BAY 11-7082后,實時定量PCR及Western BLOT檢測EMT相關(guān)蛋白Nephrin、E-cadherin及α-SMA、Desmin m RNA及蛋白表達(dá)(4)免疫熒光染色法觀察各個濃度石墨烯刺激下Nephrin和α-SMA足細(xì)胞EMT相關(guān)表型蛋白的變化。結(jié)果與對照組相比不同石墨烯濃度刺激下信號通路蛋白NF-κBp65的蛋白表達(dá)升高,EMT相關(guān)蛋ZO-1、Nephrin、E-cadherin表達(dá)量下降,RT-PCR檢測上述蛋白m RNA表達(dá)量與蛋白表達(dá)一致;α-SMA、Desmin分子蛋白及m RNA表達(dá)量升高。與20ug/ml石墨烯濃度相比,使用NF-κBp65信號通路特異性抑制劑BAY11-7082后EMT相關(guān)蛋白Nephrin、E-cadherin表達(dá)量升高,α-SMA、Desmin表達(dá)量下降,RT-PCR檢測上述蛋白m RNA表達(dá)量與蛋白表達(dá)一致結(jié)論石墨烯經(jīng)NF-κBp65信號通路促進(jìn)腎小球足細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)分化,抑制NF-κB信號通路能夠抑制足細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)分化。
【圖文】：

石墨烯對足細(xì)胞Nephrin，，α-SMA免疫熒光的影響（細(xì)胞免疫熒光200）
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R692

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本文編號：2650869