【摘要】：背景膀胱癌的發(fā)生受內(nèi)在遺傳因素和外在環(huán)境因素共同調(diào)控。既往膀胱癌病因?qū)W研究關(guān)注于膀胱本身,忽略了外環(huán)境對(duì)膀胱上皮的影響。微生物是人體微環(huán)境的重要組成部分,人體共生微生物已被證實(shí)在調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能中發(fā)揮重要作用,同時(shí)還影響腫瘤的發(fā)生與進(jìn)展。既往認(rèn)為“健康泌尿道是無(wú)菌的”,隨著新技術(shù)革新,現(xiàn)已證實(shí)健康人泌尿道同樣常駐著特定的微生物群落。同時(shí),多項(xiàng)研究表明尿液菌群失調(diào)與多種泌尿系統(tǒng)疾病相關(guān),如膀胱過(guò)度活動(dòng)癥、急迫性尿失禁和前列腺癌等,并且多種證據(jù)提示尿液菌群與膀胱癌的發(fā)生、進(jìn)展以及預(yù)后存在某種聯(lián)系。本研究旨在比較膀胱癌患者與健康人群的尿液菌群特征差異,探討尿液菌群與膀胱癌之間的關(guān)系,尋找膀胱癌的潛在生物標(biāo)志物以及預(yù)防和治療的新靶點(diǎn)。方法1.研究對(duì)象納入2017年3月至9月在南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院泌尿外科診斷為膀胱癌的患者,對(duì)照組為同單位體檢中心健康志愿者。本研究通過(guò)南方醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)審核與批準(zhǔn),所有研究對(duì)象均了解相關(guān)情況并簽署書(shū)面知情同意書(shū)。所有參與者填寫相關(guān)問(wèn)卷表。2.DNA提取、16srDNA高通量測(cè)序留取清潔中段尿液30～50 ml,使用DNeasy(?)BloodTissue試劑盒提取總DNA,分光光度計(jì)檢測(cè)DNA質(zhì)量,采用V4區(qū)通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,最后于Illumina MiSeq平臺(tái)進(jìn)行高通量測(cè)序。3.生物信息學(xué)分析將測(cè)序數(shù)據(jù)導(dǎo)入QIIME軟件,進(jìn)行質(zhì)量過(guò)濾、操作分類單位聚類和物種分類注釋,然后進(jìn)行α多樣性和β多樣性分析,并通過(guò)PERMANOVA比較樣品間是否存在差異。LEfSe進(jìn)一步鑒別組間顯著差異的細(xì)菌分類群,并通過(guò)線性判別分析其影響力。PICRUSt預(yù)測(cè)相應(yīng)的細(xì)菌代謝功能譜。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS22處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料用X±s表示,組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用例(%)表示,兩組資料的比較采用χ2檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.膀胱癌組的Observed species指數(shù)(P=0.008)、chao1 指數(shù)(P=0.008)和ace指數(shù)(P=0.003)明顯高于對(duì)照組,而組間香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)無(wú)明顯差異。2.在NMIBC患者中,高復(fù)發(fā)和高進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)組的尿液菌群豐度明顯高于低復(fù)發(fā)和低進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)組(P均0.05),而不同病理級(jí)別組的尿液菌群豐度無(wú)明顯差異(P0.05)。3.PCoA分析顯示膀胱癌組和對(duì)照組分別聚類成不同區(qū)域,提示兩組間尿液菌群存在顯著性差異。PERMANOVA進(jìn)一步顯著性分析,結(jié)果顯示膀胱癌組和對(duì)照組間尿液菌群特征差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F= 1.97,基于加權(quán)UniFrac,P0.05;F=2.53,基于未加權(quán)UniFrac,P0.001;F=1.61,基于Bray Curtis,P0.05)4.LEfSe分析顯示,膀胱癌組尿液標(biāo)本中不動(dòng)桿菌屬、Anaerococcus屬、紅色桿菌屬、鞘氨醇桿菌屬、肉桿菌屬和芽孢桿菌屬豐度明顯高于對(duì)照組,而對(duì)照組中沙雷氏菌屬、變形桿菌屬、玫瑰單胞菌屬、Ruminiclostridium-6屬和Eubacterium-xylanophilum屬明顯高于膀胱癌組。在高復(fù)發(fā)及高進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)組膀胱癌標(biāo)本中,草螺菌屬、產(chǎn)卟啉桿菌屬及擬桿菌屬的豐度明顯增高。5.PICRUSt分析顯示,膀胱癌組中金黃色葡萄球菌感染等基因功能通路明顯高于對(duì)照組。結(jié)論1.男性膀胱癌患者和健康人群的尿液菌群特征存在顯著差異,結(jié)合生物信息學(xué)分析結(jié)果,尿液菌群與膀胱癌可能存在某種聯(lián)系,某些差異菌屬可能成為膀胱癌新的生物標(biāo)志物。2.在NMIBC中,復(fù)發(fā)和進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)越高的標(biāo)本尿液菌群豐度越高,提示尿液菌群豐度與膀胱癌的預(yù)后可能存在一定相關(guān)性。3.尿液菌群與膀胱癌之間的因果關(guān)系尚未清楚,仍需大樣本的前瞻性研究及體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。
【圖文】：

膀瞇癌組和對(duì)照

邐Ｂｌａｄｄｅｒ邋ｃａｎｃｅｒ邋Ｎｏｎ－ｃａｎｃｅｒ逡逑ＰＣ邋１（９．２９％）逡逑圖４－１．膀胱癌組和對(duì)照組尿液菌群ａｌｐｈａ多樣性分析和主坐標(biāo)分析。Ｏｂｓｅｒｖｅｄ邋ｓｐｅｃｉｅｓ指數(shù)（Ａ）；邋ｃｈａｏ邋１指數(shù)（Ｂ邋）；逡逑ａｃｅ指數(shù)（Ｃ）；香農(nóng)指數(shù)（Ｄ）；辛普森指數(shù)（Ｅ）；基于未加權(quán)ＵｎｉＦｒａｃ距離主坐標(biāo)分析三維圖（Ｆ）。逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１．邋Ａｌｐｈａ邋ａｎｄ邋ｐｒｉｎｃｉｐａｌ邋ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋（ＰＣｏＡ）邋ｆｏｒ邋ｂｌａｄｄｅｒ－ｃａｎｃｅｒ邋ｓａｍｐｌｅｓ邋ａｎｄ邋ｎｏｎ－ｃａｎｃｅｒ邋ｓａｍｐｌｅｓ．邋（Ａ－逡逑Ｅ）邋Ｂｏｘ－ｐｌｏｔ邋ｓｈｏｗｉｎｇ邋ａｌｐｈａ邋ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ邋ｉｎ邋ｓａｍｐｌｅｓ邋ｕｓｉｎｇ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｍｅｔｒｉｃｓ邋（Ａ，邋ｏｂｓｅｒｖｅｄ邋ｓｐｅｃｉｅｓ邋ｉｎｄｅｘ；邋Ｂ，邋Ｃｈａｏｌ逡逑ｉｎｄｅｘ；邋Ｃ
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R737.14

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉維輝;陳俊毅;李毅寧;朱紹興;;外泌體應(yīng)用于膀胱癌診療的基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展[J];中國(guó)腫瘤;2019年01期

2 肖婷婷;楊琳;尹紅;;血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶在膀胱癌中的表達(dá)水平及其臨床意義[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版);2019年06期

3 劉安偉;許傳亮;;長(zhǎng)鏈非編碼RNA:膀胱癌研究的新熱點(diǎn)[J];上海醫(yī)學(xué);2018年01期

4 葉濤;葉章群;;膀胱癌研究的新進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2017年04期

5 張川;祝青國(guó);趙亞坤;金承洛;劉偉;陳照彥;杜言凱;仇宇;;雷帕霉素抑制膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2012年03期

6 梅志強(qiáng);劉曉燕;李娟;段承剛;;槲皮素誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[J];科技資訊;2012年17期

7 陳平鋒;;二烯丙基二硫化物誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞凋亡的研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2012年35期

8 楊德林;宋波;張超;王海峰;王凱;徐鴻毅;;膀胱癌細(xì)胞在尿液中適應(yīng)性生存的研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年06期

9 李功成,張旭,李龍承,葉章群;曲古抑菌素A對(duì)膀胱癌細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2005年07期

10 張睿,張建軍,何祖根,程書(shū)鈞,高燕寧;膀胱癌相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J];癌癥;2003年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 孫方滸;朱汝健;蔡仙國(guó);張顯軍;張文剛;俞洪元;王天濟(jì);王仙友;;二氧化碳?xì)飧箤?duì)膀胱癌細(xì)胞粘附功能的影響[A];2011年浙江省微創(chuàng)外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 木海琦;楊森;王怡君;李衛(wèi)林;南存金;李峰;陳映鶴;;百里醌抑制膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

3 汪成合;張慶松;蓋強(qiáng)強(qiáng);李傳昌;陳忠;;saRNA激活P53抑制人膀胱腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[A];第十二次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)術(shù)大會(huì)暨全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合男科診療技術(shù)研修班暨2017上海市中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)上海市中醫(yī)藥學(xué)會(huì)泌尿男科專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)講義論文資料匯編[C];2017年

4 夏同禮;蘇羅莉;徐令巽;;膀胱癌細(xì)胞表面植物凝集素受體定量表達(dá)的生物學(xué)特性[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

5 毛祺琦;鄭祥毅;楊凱;秦杰;白宇;謝立平;;白藜蘆醇對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)5637膀胱癌細(xì)胞凋亡的影響[A];2009年浙江省男科、泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

6 張晗;汪淑晶;;ST3Ga14表達(dá)量差異與膀胱癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系[A];2017第七屆泛環(huán)渤海生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2017年

7 龔華;馮懿庚;孫鵬;郁超;何曉峰;陳磊;曹宏文;;Hipk2在膀胱癌細(xì)胞的表達(dá)及其作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)泌尿外科專業(yè)委員會(huì)第十四次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議暨2016年廣東省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)泌尿外科專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2016年

8 王思齊;趙宏俊;翁志梁;;AG490對(duì)膀胱癌細(xì)胞的增殖的影響[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 姜海;陳昭典;;MONCPT對(duì)膀胱癌細(xì)胞5637的抗腫瘤作用及其機(jī)制研究[A];2008年浙江省泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

10 徐鑫;陳弘;林奕偉;胡政麾;茅葉青;吳儉;徐向來(lái);朱意;李詩(shī)琪;鄭祥義;謝立平;;MicroRNA-409-3p通過(guò)靶向c-Met抑制膀胱癌細(xì)胞的侵襲和遷移[A];2014浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)男科學(xué)泌尿外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前5條

1 北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科 張時(shí)民;膀胱癌與尿液檢查[N];科學(xué)時(shí)報(bào);2011年

2 記者 黃辛;科學(xué)家首次利用患者尿液實(shí)現(xiàn)膀胱癌精準(zhǔn)治療[N];中國(guó)科學(xué)報(bào);2019年

3 夏洪平;西蘭花提取物可抑制膀胱癌細(xì)胞[N];健康報(bào);2005年

4 特約記者 齊璐璐;膀胱癌個(gè)性化治療有突破[N];健康報(bào);2019年

5 張中橋;反義技術(shù)抑制COX-2過(guò)表達(dá)可逆轉(zhuǎn)膀胱癌細(xì)胞惡性表型[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 葉挺宇;長(zhǎng)鏈非編碼RNA-linc00346在膀胱癌中的表達(dá)及其功能和機(jī)制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2019年

2 馬重;Endocan在膀胱癌診斷及進(jìn)展中的作用研究[D];中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué);2018年

3 鐘新泰;長(zhǎng)鏈非編碼RNA-SNHG7調(diào)控膀胱癌細(xì)胞的增殖、凋亡及侵襲性的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

4 黃麗娟;LASS2通過(guò)ERK/Drp1調(diào)控線粒體動(dòng)力學(xué)抑制膀胱癌細(xì)胞侵襲和化療耐受性的初步研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

5 薛東煒;TRIM24在膀胱癌組織中的表達(dá)及對(duì)膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

6 解大龍;非編碼RNA miR-9和CDKN2B-AS對(duì)膀胱癌細(xì)胞的侵襲和吉西他濱化療敏感性的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

7 荊宏偉;鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體ZNT1在膀胱癌中的表達(dá)意義及發(fā)生發(fā)展中的影響機(jī)制[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

8 許學(xué)文;閉鎖小帶-1相關(guān)核酸結(jié)合蛋白（ZONAB）促進(jìn)膀胱癌侵襲作用的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

9 劉嘉;Rab27在膀胱癌中的表達(dá)和其對(duì)膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

10 宮雪;Rab11通過(guò)NF-κB信號(hào)通路在膀胱癌細(xì)胞中發(fā)揮腫瘤蛋白功用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 趙宏達(dá);CCL17-CCR4通過(guò)ERK-MMP13信號(hào)通路調(diào)控膀胱癌細(xì)胞的遷移和侵襲[D];山東大學(xué);2019年

2 展W，

本文編號(hào)：2625748