【摘要】：目的:明確激活素A(Activin A,ACT A)對微血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)分化(endothelial mesenchymal transition,EndMT)的影響及卵泡抑素(follistatin,FS)的干預(yù)作用。方法:體外培養(yǎng)成人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),MTT法檢測不同濃度rh-ACT A、rh-FS刺激內(nèi)皮細胞后的增殖率變化;將細胞分為5組:對照組(C組)、TGF-β組(T組)、ACT A組(A組)、TGF-β+FS組(T+F組)、ACT A+FS組(A+F組),光學(xué)顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)變化,再采用免疫細胞化學(xué)染色和Western蛋白印跡技術(shù)觀察ACT A和TGF-β對HUVEC細胞α-平滑肌動蛋白(α-SMA)、VE-鈣黏蛋白(VE-cad)和纖維連接蛋白(FN)表達的影響以及FS的干預(yù)作用。結(jié)果:1.與0ng/mL ACT A組相比,10、30、60、100 ng/mL ACT A組的增殖活性均增加(F=22.768,P0.001),其中30 ng/mL ACT A組的增殖率最高,單獨給予FS對細胞增生無明顯影響(F=0.437,P=0.781),但FS能拮抗ACT A對內(nèi)皮細胞生長的促進作用,呈劑量依賴性(F=15.270,P0.001)。2.免疫細胞化學(xué)染色和Western蛋白印跡結(jié)果示:ACT A刺激內(nèi)皮細胞后,ACT A組與對照組相比,α-SMA和FN的表達增加,而VE-Cad的表達減少(均P0.05),與TGF-β組相比,α-SMA、FN和VE-Cad的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05);FS可阻斷ACT A的上述效應(yīng)(P0.05),而對TGF-β的作用無明顯影響(P0.05)。ACT A+FS組與ACT A組相比,α-SMA和FN的表達減少,同時VE-Cad的表達增加(均P0.05)。TGF-β+FS組與TGF-β組比較,α-SMA、FN和VE-Cad的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05)。結(jié)論:ACT A可誘導(dǎo)微血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)分化及FN的合成,FS可通過阻斷ACT A的轉(zhuǎn)分化作用,產(chǎn)生內(nèi)皮細胞保護作用。
【圖文】：

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2 結(jié) 果CT A、FS 對 HUVEC 細胞增殖率的變化：CT A 對 HUVEC 細胞生長有明顯的促進作用，在 30ng/ml 促增殖作用最到 100ng/ml 時，促進細胞增生的作用反而減弱（F=22.768，P<0.001）S 對細胞增生無明顯影響（F=0.437，P=0.781）；但 FS 能拮抗 ACT A長的促進作用，呈劑量依賴性（F=15.270，P<0.001），見圖 1。圖 1 不同濃度 ACT A 和 FS 對細胞增殖率的影響

圖 1 不同濃度 ACT A 和 FS 對細胞增殖率的影響 A 和 TGF-β 對 HUVEC 細胞形態(tài)的影響細胞呈卵圓形狀，實驗組 ACT A 組和 TGF-β 組作用細胞 72h 后微變化，細胞形態(tài)明顯變?yōu)殚L梭形；TGF-β+FS 組與 TGF-β 組比化；ACT A+FS 組與 ACT A 組細胞比較，，ACT A 這種效應(yīng)可被
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R692

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