【摘要】：目的觀察SFRP5在大鼠腎間質(zhì)纖維化中的作用,探討其對Wnt信號通路的影響及腎間質(zhì)纖維化的關系。方法選取雄性成年SD大鼠(36只),隨機分為假手術組(12只)、UUO組(12只)、UUO+SFRP5組(12只)。通過行左側輸尿管結扎構建UUO模型。UUO+SFRP5組大鼠分別于左側輸尿管結扎第1天及第7天,予腹腔局部注射編碼SFRP5基因的腺病毒。分別于術后第7天及第14天從各組中抽取6只大鼠,行腹主動脈取血并摘除左側腎臟組織。檢測各組大鼠血清肌酐、尿素氮、鈣、磷水平,取左側腎臟冠狀位切分成兩部分,一部分于10%福爾馬林液固定后行病理切片及Masson染色,對比各組腎臟纖維化水平;另一部分腎組織保存于-80℃冰箱待行蛋白水平檢測,通過Western blot檢測各組大鼠腎臟中SFRP5、α-SMA、E-鈣黏素、β-catenin、Snail蛋白水平。結果與假手術組大鼠相比,術后第7天及14天,UUO組、UUO+SFRP5組大鼠血清肌酐水平升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),但UUO組及UUO+SFRP5組無明顯差異;UUO組及UUO+SFRP5組大鼠行左側輸尿管結扎后,隨著輸尿管結扎時間延長,腎臟體積漸增大,腎實質(zhì)逐漸變薄,Masson染色可見UUO組、UUO+SFRP5組大鼠腎臟第7天腎小管擴張,膠原纖維增加,染色加深,14天時病變明顯加重,而在相同時間節(jié)點,UUO+SFRP5組大鼠腎小管擴張、間質(zhì)增寬程度及膠原在間質(zhì)沉積程度均顯著低于UUO組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);行Western blot檢測各組E-鈣黏素、α-SMA、SFRP5、β-catenin、Snail蛋白表達水平,與假手術組相比,UUO組及UUO+SFRP5組大鼠腎臟組織中α-SMA、β-catenin、Snail蛋白表達增加,E-鈣黏素表達減低;進一步比較發(fā)現(xiàn)UUO+SFRP5組大鼠腎組織α-SMA、β-catenin、Snail蛋白增加程度及E-鈣黏素降低程度均低于UUO組,且具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論予大鼠行單側輸尿管結扎后,結扎側腎臟組織表現(xiàn)明顯腎間質(zhì)纖維化,伴有Wnt/β-catenin信號通路的異常激活。腎臟局部過表達SFRP5后,腎間質(zhì)纖維化程度可有一定程度改善。其機制可能與SFRP5抑制經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路有關。
【圖文】：

15圖 1：術后 7 天及 14 天假手術組、UUO 組及 UUO+SFRP5 組大鼠血清生化指標比較（組大鼠血清肌酐水平,與假手術組相比，術后 7 天及 14 天 UUO 組及 UUO+SFRP5 組均明

通過 Western blot 檢測各組 SFRP5 表達水平，結果顯示 7 天及 14 天時UUO+SFRP5 組 SFRP5 蛋白表達較同時間點假手術組、UUO 組顯著增加，提示腺病毒轉載成功，SFRP5 在腎臟組織實現(xiàn)過表達；與假手術組相比，術后 7 天及 14 天，UUO 組、UUO+SFRP5 組總 β-catenin表達水平增加，但 UUO+SFRP5 組較 UUO 組顯著減少(P<0．05)，見圖 3。
【學位授予單位】：首都醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R692

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1 萬青松,夏明珠,胡家才;腎間質(zhì)纖維化的分子基礎[J];中國中西醫(yī)結合腎病雜志;2003年07期

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本文編號：2588653