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IgA腎病大鼠腎組織中TIM-1、IFN-γ、IL-4表達的變化及意義

發(fā)布時間:2020-02-23 11:40
【摘要】:目的觀察IgA腎病(IgAN)大鼠腎組織中T細胞免疫球蛋白與黏蛋白域基因-1(TIM-1)、γ干擾素(IFN-γ)、白細胞介素-4(IL-4)的表達,探討TIM-1和IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4的關系及其在IgAN大鼠發(fā)病中的作用。方法 20只雄性SD大鼠隨機分成IgAN模型組和對照組,每組10只。在造模完成后處死大鼠,取腎臟,腎組織切片行PAS染色、免疫熒光觀察大鼠腎臟病理變化,并行免疫組化法檢測腎組織中TIM-1、IFN-γ、IL-4的表達。結果成功建立IgAN動物模型。第9周末IgAN模型組24 h尿蛋白定量顯著高于對照組,血漿Alb顯著低于對照組(均P0.01)。免疫熒光顯示,IgAN模型組大鼠系膜區(qū)可見團塊狀或顆粒狀綠色IgA熒光。PAS染色的腎小球內(nèi)可見明顯的系膜細胞增多,系膜基質(zhì)中到重度增生,腎間質(zhì)內(nèi)可見明顯的炎性細胞浸潤。Katafuchi評分IgAN模型組明顯高于對照組(P0.01)。IgAN模型組腎組織中TIM-1的表達量為7.50±1.58,較對照組(1.02±0.82)顯著增加(P0.01)。IgAN模型組IFN-γ的表達量為2.63±0.97,與對照組(2.82±1.03)比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.01)。IgAN組IL-4的表達量為7.54±1.58,較對照組(3.43±1.35)顯著增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。TIM-1表達量與IL-4呈正相關(r=0.99,P0.01);與IFN-γ/IL-4呈負相關(r=-0.751,P0.01)。結論 TIM-1可能通過調(diào)控Th免疫而參與IgAN的發(fā)生發(fā)展。
【圖文】:

理學,腎小管上皮細胞


血肌酐(μmol/L)正常對照組104.32±0.5036.22±0.7839.25±8.43IgAN模型組108.74±1.9420.94±1.7842.32±8.67t值-6.727.73-0.07P值<0.01<0.010.952.2兩組大鼠腎臟病理改變光鏡結果:PAS染色結果正常對照組腎小球形狀無改變,間質(zhì)無炎性細胞浸潤。IgAN模型組在腎小球內(nèi)可見明顯的系膜細胞增多,系膜基質(zhì)中到重度增生,毛細血管管腔狹窄,腎間質(zhì)內(nèi)可見明顯的炎性細胞浸潤,并可見腫脹變性的腎小管上皮細胞。免疫熒光:正常對照組未見IgA沉積,IgAN模型組可見團塊狀或顆粒狀綠色IgA熒光。見圖1。N:正常對照組;A:IgAN模型組圖1兩組大鼠腎臟病理學改變(×400)2.3兩組Katafuchi評分比較每張HE染色切片取任意5個高倍鏡(×40)視野,每個視野取任意2個小球和2個小管,IgAN模型組和正常對照組的Katafuchi評分分別為(6.30±1.95)和(1.30±0.82)分,IgAN模型組顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。2.4大鼠腎臟TIM-1、IL-4、IFN-γ蛋白表達2.4.1大鼠腎臟TIM-1的表達正常對照組僅在腎小管上皮細胞中可見少量TIM-1陽性表達,而IgAN模型組陽性表達較正常對照組顯著增多,廣泛分布在腎小球細胞核和腎小管上皮細胞核(圖2);IgAN模型組和正常對照組的TIM-1定量積分分別為7.50±1.58和1.02±0.82,IgAN模型組顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。2.4.2大鼠腎臟IFN-γ的表達正常對照組和N:正常對照組;A:IgAN模型組圖2兩組大鼠腎臟TIM-1的表達(免疫組化,×400)N:正常對照組;A:IgAN模型組圖3兩組大鼠腎臟IFN-γ的表達(免疫組化,×400)IgAN模型組均可見少量IFN-γ陽性表達,主要分布在腎小管上皮細胞胞核(圖3);IgAN模型組和正常對照組的IFN-γ定量積分分別為2.63±0.97?

免疫組化,腎小管上皮細胞,統(tǒng)計學意義


IgAN模型組圖1兩組大鼠腎臟病理學改變(×400)2.3兩組Katafuchi評分比較每張HE染色切片取任意5個高倍鏡(×40)視野,每個視野取任意2個小球和2個小管,IgAN模型組和正常對照組的Katafuchi評分分別為(6.30±1.95)和(1.30±0.82)分,IgAN模型組顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。2.4大鼠腎臟TIM-1、IL-4、IFN-γ蛋白表達2.4.1大鼠腎臟TIM-1的表達正常對照組僅在腎小管上皮細胞中可見少量TIM-1陽性表達,而IgAN模型組陽性表達較正常對照組顯著增多,廣泛分布在腎小球細胞核和腎小管上皮細胞核(圖2);IgAN模型組和正常對照組的TIM-1定量積分分別為7.50±1.58和1.02±0.82,IgAN模型組顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。2.4.2大鼠腎臟IFN-γ的表達正常對照組和N:正常對照組;A:IgAN模型組圖2兩組大鼠腎臟TIM-1的表達(免疫組化,,×400)N:正常對照組;A:IgAN模型組圖3兩組大鼠腎臟IFN-γ的表達(免疫組化,×400)IgAN模型組均可見少量IFN-γ陽性表達,主要分布在腎小管上皮細胞胞核(圖3);IgAN模型組和正常對照組的IFN-γ定量積分分別為2.63±0.97和2.82±1.03,兩組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)。2.4.3大鼠腎臟IL-4的表達正常對照組與IgAN模型組均有IL-4陽性表達,主要分布在腎小管(圖4);IgAN模型組和正常對照組的IL-4定量積分分別為7.5±1.58和3.4±1.35,IgAN模型組顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。N:正常對照組;A:IgAN模型組圖4兩組大鼠腎臟IL-4的表達(免疫組化,×400)2.5TIM-1與IL-4、IFN-γ/IL-4半定量積分相關性分析IgAN大鼠腎病理損傷Katafuchi評分與TIM-1的半定量積分、IL-4的半定量積分呈正相關(r=0.816、0.765,P<0.01)。TIM-1的半定量積分

【參考文獻】

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