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不同劑量脂肪干細(xì)胞移植對早期腎纖維化形成的影響

發(fā)布時間:2019-12-03 01:33
【摘要】:背景:前期實驗發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞對于腎纖維化的早期形成具有一定的干預(yù)作用,能夠延緩腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生。目的:研究外源性脂肪干細(xì)胞移植對大鼠早期腎間質(zhì)纖維化形成的影響,并探討其量效關(guān)系。方法:將50只SD大鼠隨機分為5組,假手術(shù)組尾靜脈注射PBS;模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組結(jié)扎左側(cè)輸尿管,建立腎纖維化模型,造模成功后,模型組尾靜脈注射PBS,低劑量組、中劑量組、高劑量組尾靜脈分別注射細(xì)胞濃度為1×10~(10),2×10~(10),3×10~(10) L~(-1)的脂肪干細(xì)胞懸液0.1 mL。注射后14 d取左腎組織,采用蘇木精-伊紅染色和Masson染色觀察腎小管-間質(zhì)損傷程度及腎間質(zhì)相對面積,免疫組織化學(xué)法檢測α-平滑肌肌動蛋白和轉(zhuǎn)化生長因子β1表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:①蘇木精-伊紅染色:模型組表現(xiàn)為典型的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變;低劑量組、中劑量組、高劑量組均有一定程度的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變,但程度較模型組明顯減輕,以高劑量組損傷程度最輕;②Masson染色:模型組腎小管間質(zhì)增寬,膠原纖維沉積;低劑量組、中劑量組、高劑量組腎間質(zhì)增寬程度低于模型組,中、高劑量組腎間質(zhì)增寬程度低于低劑量組(P0.05);③免疫組織化學(xué)染色:與假手術(shù)組比較,模型組α-平滑肌肌動蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子β1表達(dá)升高(P0.05);與模型組比較,高劑量組α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)降低(P0.05),低、中、高劑量組轉(zhuǎn)化生長因子β1表達(dá)均降低(P0.05),以中、高劑量組轉(zhuǎn)化生長因子β1降低更明顯;④結(jié)果表明:外源性脂肪干細(xì)胞移植可延緩早期腎纖維化的形成,并存在劑量-效應(yīng)關(guān)系,其機制可能是通過改變轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)的信號通道狀態(tài)實現(xiàn)的。
【圖文】:

表圖,膠原,α-平滑肌肌動蛋白,低劑量


P妥楸冉喜鉅煳尷災(zāi)鈉砸庖?P>0.05)。2.6腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1蛋白表達(dá)假手術(shù)組轉(zhuǎn)化生長因子β1蛋白在腎小管上皮細(xì)胞灶區(qū)弱陽性表達(dá)或不表圖1各組大鼠腎組織形態(tài)學(xué)觀察(蘇木精-伊紅染色,,×10)Figure1Themorphologicalobservationoftheratrenaltissueineachgroup(hematoxylin-eosinstaining,×10)圖注:圖中A-E分別為模型組、假手術(shù)組、低劑量組、中劑量組與高劑量組。模型組表現(xiàn)為典型的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變;低劑量組、中劑量組、高劑量組均有一定程度的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變,但程度較模型組明顯減輕。ABCDE圖2各組大鼠腎組織的膠原變化(Masson染色,×10)Figure2Thecollagenchangesoftheratrenaltissueineachgroup(Massonstaining,×10)圖注:圖中A-E分別為模型組、假手術(shù)組、低劑量組、中劑量組與高劑量組。假手術(shù)組在血管周圍呈強陽性著色,其他部位無染色;模型組腎小管間質(zhì)增寬,膠原纖維沉積;低、中、高劑量組腎間質(zhì)均較假手術(shù)組增寬,但較模型組窄。ABCDE圖3各組大鼠腎組織α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)(免疫組織化學(xué)染色,×20)Figure3Theexpressionofalphasmoothmuscleactinintheratrenaltissueineachgroup(immunohistochemicalstaining,×20)圖注:圖中A-E分別為模型組、假手術(shù)組、低劑量組、中劑量組與高劑量組。各組腎組織α-平滑肌肌動蛋白均有一定表達(dá),假手術(shù)組腎α-平滑肌肌動蛋白僅在血管周圍呈強陽性表達(dá);模型組α-平滑肌肌動蛋白除了在血管周呈陽性表達(dá),在皮髓質(zhì)交界及部分髓質(zhì)腎小管上皮細(xì)胞、管周及腎間質(zhì)呈強陽性表達(dá);低、中、高劑量組腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)也有明顯表達(dá),但范圍較模型組窄,染色深度較模型組淡。ABCDE圖4各組大鼠腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1蛋白表達(dá)(免疫組織化學(xué)染色,×20)Figure4Theexpressionoftr

表圖,α-平滑肌肌動蛋白,免疫組織化學(xué)染色


呂春燕,等.不同劑量脂肪干細(xì)胞移植對早期腎纖維化形成的影響4688P.O.Box10002,Shenyang110180www.CRTER.orgwww.CRTER.org2.5腎組織α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)各組腎組織α-平滑肌肌動蛋白均有一定表達(dá),假手術(shù)組腎α-平滑肌肌動蛋白僅在血管周圍呈強陽性表達(dá);模型組α-平滑肌肌動蛋白除了在血管周呈陽性表達(dá),在皮髓質(zhì)交界及部分髓質(zhì)腎小管上皮細(xì)胞、管周及腎間質(zhì)還呈強陽性表達(dá);低、中、高劑量組腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)也有明顯表達(dá),但范圍較模型組窄,染色深度較模型組淡(圖3)。積分吸光度檢測結(jié)果,見表3,統(tǒng)計學(xué)處理結(jié)果顯示,低、中、高劑量組α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)高于假手術(shù)組(P<0.05),高劑量組α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)低于模型組(P<0.05),低、中劑量組與模型組比較差異無顯著性意義(P>0.05)。2.6腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1蛋白表達(dá)假手術(shù)組轉(zhuǎn)化生長因子β1蛋白在腎小管上皮細(xì)胞灶區(qū)弱陽性表達(dá)或不表圖1各組大鼠腎組織形態(tài)學(xué)觀察(蘇木精-伊紅染色,×10)Figure1Themorphologicalobservationoftheratrenaltissueineachgroup(hematoxylin-eosinstaining,×10)圖注:圖中A-E分別為模型組、假手術(shù)組、低劑量組、中劑量組與高劑量組。模型組表現(xiàn)為典型的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變;低劑量組、中劑量組、高劑量組均有一定程度的腎小球及腎小管-間質(zhì)改變,但程度較模型組明顯減輕。ABCDE圖2各組大鼠腎組織的膠原變化(Masson染色,×10)Figure2Thecollagenchangesoftheratrenaltissueineachgroup(Massonstaining,×10)圖注:圖中A-E分別為模型組、假手術(shù)組、低劑量組、中劑量組與高劑量組。假手術(shù)組在血管周圍呈強陽性著色,其他部位無染色;模型組腎小管間質(zhì)增寬,膠原纖維沉積;低、中、高劑量組腎間質(zhì)均較假手術(shù)組增寬,但較模型組窄。ABCD

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