本文選題：前列腺癌 + IL-6(Interleukin-6)��； 參考：《昆明醫(yī)科大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的：應用分子生物學及生物信息學方法,分別在前列腺癌細胞株PC-3及LNCap中檢測IL-6(Interleukin-6)對程序性死亡因子PDCD4(programmed cell death4)表達的影響,探討IL-6對PDCD4的靶向調(diào)節(jié)在前列腺癌發(fā)生及發(fā)展過程中的作用及機制,為前列腺癌,尤其是雄激素非依賴性前列腺癌的治療提供新的思路和理論依據(jù)。 方法： 1、采用實時熒光定量PCR (Q-PCR)檢測前列腺癌激素依賴性細胞(LNCaP)和激素非依賴性細胞(PC3)經(jīng)IL-6不同濃度作用后PDCD4的表達。 2、采用western blotting檢測前列腺癌激素依賴性細胞(LNCaP)和激素非依賴性細胞(PC3)經(jīng)IL-6不同濃度作用后PDCD4的表達。 3、通過瞬時轉染技術建立低表達miRNA-21的前列腺癌細胞系,采用Q-PCR和western blotting檢測經(jīng)IL-6作用后低表達miRNA-21的前列腺癌細胞(LNCaP、PC3)中PDCD4的表達。 結果： 1、本研究發(fā)現(xiàn)LNCaP細胞經(jīng)不同濃度IL-6作用24h后,PDCD4在轉錄水平均有不同程度下調(diào),經(jīng)Shapiro—Wilk檢驗進行統(tǒng)計學分析,數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布,運用oneway-ANOVA檢驗得出其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=40.321,p0.05),運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：IL-6濃度為Ong\ml組、IL-6濃度為5ng\ml組與IL-6濃度為10ng\ml組三組間PDCD4表達差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),用Spearman檢驗得出PDCD4的表達與IL-6濃度呈負相關(R=0.967),顯著性檢驗(p0.05)。在PC3細胞中,前列腺癌細胞經(jīng)不同濃度IL-6作用24h后,PDCD4在轉錄水平均有不同程度下調(diào),運用on eway-ANOVA檢驗得出其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=98.464,p0.05),運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：1L-6濃度為Ong\ml組、IL-6濃度為5ng\ml組與IL-6濃度為10ng\ml組三組間PDCD4表達差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),用Spearman檢驗得出：PDCD4的表達與IL-6濃度呈負相關(R=0.951),顯著性檢驗(p0.05)。結果說明：在前列腺癌細胞(PC3、LNCaP)中,IL-6在轉錄水平下調(diào)PDCD4的表達,并且PDCD4的表達量與IL-6的濃度呈顯著負相關。 2、IL-6對前列腺癌細胞中PDCD4在翻譯水平表達的影響：研究發(fā)現(xiàn)LNCaP細胞經(jīng)不同濃度IL-6作用24h后,PDCD4在翻譯水平均有不同程度下調(diào),運用oneway-ANOVA檢驗得出其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=277.505,p0.05),運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：IL-6濃度為Ong\ml組、IL-6濃度為5ng\ml組與IL-6濃度為10ng\ml組三組間PDCD4表達差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),用Spearman檢驗得出：PDCD4的表達與IL-6濃度呈負相關(R=0.903),顯著性檢驗(p0.05)。在PC3細胞中,前列腺癌細胞經(jīng)不同濃度IL-6作用24h后,PDCD4在翻譯水平均有不同程度下調(diào),運用oneway-ANOVA檢驗得出其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=551.403,p0.05),運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：IL-6濃度為Ong\ml組、IL-6濃度為5ng\ml組與IL-6濃度為10ng\ml組三組間PDCD4表達差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),用Spearman檢驗得出PDCD4的表達與IL-6濃度呈負相關(R=0.946),顯著性檢驗(p0.05)。結果說明：在前列腺癌細胞(PC3、LNCaP)中,IL-6在翻譯水平下調(diào)PDCD4的表達,并且PDCD4的表達量與IL-6的濃度呈顯著負相關。 3、前列腺癌細胞(PC3、LNCaP)低表達miRNA-21后,IL-6對PDCD4在轉錄和翻譯水平表達的影響：為研究miRNA-21在IL-6對下調(diào)PDCD4表達過程中的作用,本實驗通過轉染anti-miR-21-inhibitor建立低表達miRNA-21的前列腺癌細胞系,然后再用濃度10ng\ml的IL-6作用24h,在LNCaP細胞中,我們發(fā)現(xiàn)轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4在轉錄水平的表達明顯升高,運用oneway-ANOVA檢驗其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=241.781,p0.05)；同時在翻譯水平轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4表達也明顯升高,運用oneway-ANOVA檢驗分析得出其差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)；運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：未轉染anti-miR-21-inhibitor組與轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4表達差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。在PC3細胞實驗組中我們也得出相似結果：轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4在轉錄水平的表達明顯升高,運用oneway-ANOVA檢驗其差異具有統(tǒng)計學意義(F值=241.781,p0.05)；同時在翻譯水平轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4表達也明顯升高,運用oneway-ANOVA檢驗分析得出其差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)；運用LSD檢驗進行組間兩兩比較得出：未轉染anti-miR-21-inhibitor組與轉染anti-miR-21-inhibitor組中PDCD4差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。以上結果說明在前列腺癌細胞(PC3、LNCaP)中,低表達miRNA-21后,IL-6在轉錄及翻譯水平下調(diào)PDCD4表達的作用減弱,提示了在前列腺癌中miRNA-21可能是IL-6調(diào)節(jié)PDCD4表達的中間環(huán)節(jié)。 結論： 1、在激素依賴型和非激素依賴型前列腺癌細胞(LNCaP PC3)中,IL-6在轉錄和翻譯水平上均下調(diào)了PDCD4的表達,并且PDCD4的下調(diào)程度與IL-6作用濃度呈顯著負相關 2、當沉默了miRNA-21表達后,IL-6在轉錄和翻譯水平上下調(diào)PDCD4表達的作用也隨之減弱,這就揭示了在前列腺癌中miRNA-21可能是IL-6調(diào)節(jié)PDCD4表達的一個中間環(huán)節(jié),即IL-6可能是通過作用于miRNA-21來調(diào)節(jié)PDCD4的表達。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of IL-6 (Interleukin-6) on the expression of programmed death factor PDCD4 (programmed cell death4) in prostate cancer cell lines PC-3 and LNCap by using molecular biology and bioinformatics methods, and to explore the role and mechanism of the target regulation of IL-6 to PDCD4 in the development and development of prostate cancer. Cancer, especially the treatment of androgen independent prostate cancer, provides new ideas and theoretical basis.
Method錛，

本文編號：2043050