本文選題：丹酚酸A + 丹酚酸C��； 參考：《遵義醫(yī)學院》2017年碩士論文

【摘要】：目的:研究丹酚酸A、C配伍對人血清白蛋白誘導腎小管上皮細胞過程中炎癥因子及氧化應激反應的影響。方法:人腎小管上皮細胞于體外培養(yǎng),隨機分成5個組:正常組、人血清白蛋白組(即模型組)、藥物治療組包括丹酚酸A組、丹酚酸C組、丹酚酸A+C組(丹酚酸A和C組分按1:1加入)。無血清培養(yǎng)液同步化24小時后,除正常組外,其余組分別加入HSA干預24h、48h、72h,各治療組同時加入藥物治療。ELISA檢測MCP-1、CCL7、IP-10表達情況。細胞免疫熒光技術(shù)定位檢測MCP-1、IP-10。Western Blot檢測M-CSF。應用水溶性四唑鹽法(WST-1法)檢測細胞SOD活力,應用二法硫雙硝基苯甲酸法(DTNB法)檢測細胞GSH含量,應用硫代巴比妥酸法(TBA法)測定細胞MDA含量。結(jié)果:1.MCP-1、CCL7、IP-10的檢測結(jié)果1)ELISA檢測結(jié)果與相對應時間點模型組比較,24h、48h、72h三個時間點各給藥組MCP-1、CCL7、IP-10的相對表達量減少(P0.01)。各給藥組之間相對應時間點比較,24h、48h、72h三個時間點丹酚酸A+C組MCP-1、CCL7、IP-10的相對表達量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組MCP-1相對表達量降低(P0.01)。2)MCP-1和IP-10陽性表達為綠色熒光,表達部位主要位于人腎小管上皮細胞的胞質(zhì)。2.M-CSF檢測結(jié)果與相對應時間點模型組比較,24h、48h兩個時間點各給藥組M-CSF相對表達量減少(P0.05),72h時間點丹酚酸C組和A+C組M-CSF相對表達量較模型組減少(P0.05)。24h、48h、72h三個時間點丹酚酸A+C組M-CSF的相對表達量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組降低(P0.05)。3.SOD、GSH、MDA檢測結(jié)果與相對應時間點正常組比較,24h、48h、72h三個時間點模型組細胞SOD活力和GSH含量相對降低(P0.05)。與相對應時間點模型組比較,24h、48h、72h三個時間點各給藥組SOD活力和GSH含量增高(P0.05)。各給藥組之間相對應時間點比較,24h、48h、72h三個時間點丹酚酸A+C組SOD活力和GSH含量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組增高(P0.05)。與相對應時間點模型組比較,24h、48h、72h三個時間點各給藥組MDA的含量減少(P0.05)。各給藥組之間相對應時間點比較,24h、48h、72h三個時間點丹酚酸A+C組MDA的含量低于丹酚酸A組和丹酚酸C組(P0.05)。結(jié)論:丹酚酸A、C配伍對人血清白蛋白誘導的人腎小管上皮細胞MCP-1、CCL7、IP-10的表達有抑制作用。可在一定程度上提高SOD的活力和增加GSH的表達,減少MDA的表達。推測丹酚酸A、C配伍可能通過減少炎癥反應,增強抗氧化作用來改善腎纖維化的進程。
[Abstract]:Aim: to study the effect of Salvianolic acid (SAFC) combination on inflammatory factors and oxidative stress in renal tubular epithelial cells induced by human serum albumin (HSA). Methods: human renal tubular epithelial cells were cultured in vitro and randomly divided into 5 groups: normal group, human serum albumin group (model group), drug treatment group including Salvianolic acid group A, Salvianolic acid C group. Salvianolic acid group A C (Salvianolic acid A and C components added at 1:1. After synchronization of serum-free medium for 24 hours, the other groups were treated with HSA for 24 h and 48 h and 72 h, respectively. The expression of MCP-1 CCL7- IP-10 was detected by drug therapy. MCP-1 IP-10.Western Blot was used to detect M-CSF. The activity of SOD was detected by water-soluble tetrazolium salt method (WST-1), the content of GSH was detected by dithiobinitrobenzoic acid method, and the content of MDA was measured by thiobarbituric acid method. Results 1. The results of 1)ELISA were compared with those of the model group at 24 h and 48 h for 72 h. The relative expression of CCL7 IP-10 in MCP-1 group was decreased by P0.01. The relative expression of MCP-1 CCL7nIP-10 in Salvianolic acid A C group was higher than that in Salvianolic acid A group, and the relative expression of MCP-1 in Salvianolic acid C group was lower than that in Salvianolic acid group. The positive expression of MCP-1 and IP-10 in Salvianolic acid group was green fluorescence. The expression site of M-CSF was mainly located in the cytoplasm of human renal tubular epithelial cells. 2. The results of M-CSF detection were compared with those of the model group at the corresponding time point. The relative expression of M-CSF was decreased at 24 h and 48 h after administration. The relative expression of M-CSF in Salvianolic acid group C and group A C was decreased at 72 h. Compared with the model group, the relative expression of M-CSF in Salvianolic acid A C group was significantly lower than that in Salvianolic acid group. Compared with the control group, the activity of SOD and the content of GSH in the model group were decreased at 24 h, 48 h and 72 h, respectively. Compared with the model group, the activity of SOD and the content of GSH were increased at 24 h, 48 h and 72 h, respectively. The activity of SOD and the content of GSH in Salvianolic acid A C group were higher than those in Salvianolic acid group at 24 h, 48 h and 72 h, respectively, while Salvianolic acid C group was higher than Salvianolic acid group (P 0.05). Compared with the model group at the corresponding time point, the content of MDA in the three time points (24 h, 48 h and 72 h) decreased (P 0.05). The content of MDA in Salvianolic acid A C group was lower than that in Salvianolic acid A group and Salvianolic acid C group at 24 h, 48 h and 72 h. Conclusion: the combination of Salvianolic acid and AFC can inhibit the expression of CCL7 IP-10 in human renal tubular epithelial cells induced by human serum albumin. It can increase the activity of SOD, increase the expression of GSH and decrease the expression of MDA to some extent. It is speculated that the combination of Salvianolic acid AFC C may improve the progression of renal fibrosis by reducing inflammatory reaction and enhancing antioxidant effect.
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R692

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本文編號：1832179