本文選題：活性氧自由基　切入點(diǎn)：necroptosis　出處：《腎臟病與透析腎移植雜志》2017年03期

【摘要】：目的:探討活性氧自由基(ROS)在腎小管上皮細(xì)胞necroptosis中的作用。方法:構(gòu)建腎小管上皮細(xì)胞HK-2細(xì)胞necroptosis模型,檢測其ROS升高程度。并使用NADPH酶抑制劑Apocynin抑制HK-2細(xì)胞necroptosis模型中ROS的生成,通過流式細(xì)胞計(jì)數(shù)及檢測necroptosis的關(guān)鍵蛋白觀察HK-2細(xì)胞necroptosis的變化。結(jié)果:使用腫瘤壞死因子α、芐氧羰酰-纈氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮及抗霉素A成功建立了HK-2細(xì)胞necroptosis模型,并觀察到HK-2細(xì)胞發(fā)生necroptosis時(shí)ROS顯著升高(43.29±2.49 vs 25.90±1.27,P0.001),而使用necrostatin-1抑制necroptosis后ROS生成受到抑制(35.58±1.08 vs 43.29±2.49,P=0.002)。當(dāng)對(duì)necroptosis模型使用Apocynin干預(yù)時(shí),HK-2細(xì)胞ROS明顯下降(30.71±2.82 vs 43.29±2.49,P0.001),并且流式細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示壞死細(xì)胞比例減少(2.00%±0.30%vs 6.99%±2.79%,P0.001),同時(shí)受體相關(guān)蛋白3和混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域的磷酸化水平降低。結(jié)論:ROS參與了HK-2細(xì)胞的necroptosis,并且通過抑制ROS的生成可減少necroptosis發(fā)生,提高損傷狀態(tài)下HK-2細(xì)胞存活率,減輕急性腎小管壞死。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of reactive oxygen species (Ros) in necroptosis of renal tubular epithelial cells. Methods: the necroptosis model of renal tubular epithelial cells (HK-2) was constructed, and the degree of ROS elevation was detected. Apocynin, a inhibitor of NADPH enzyme, was used to inhibit the production of ROS in necroptosis model of HK-2 cells. The changes of necroptosis in HK-2 cells were observed by flow cytometry and the key proteins of necroptosis. Results: tumor necrosis factor- 偽, benzoxycarbonyl-valeryl-alanine-aspartyl-fluoromethyl ketone and anti-mycin A were successfully established. The necroptosis model of HK-2 cells was established. It was also observed that ROS increased significantly during necroptosis in HK-2 cells (43.29 鹵2.49 vs 25.90 鹵1.27p 0.001g / L), while ROS production was inhibited by necrostatin-1 treatment with necroptosis 35.58 鹵1.08 vs 43.29 鹵2.49 P0. 002. The ROS of HK-2 cells decreased by 30.71 鹵2.82 vs 43.29 鹵2.49 P0.001 after Apocynin intervention in necroptosis model, and the results of flow cytometry were significant. The percentage of necrotic cells decreased by 2.00% 鹵0.30%vs 6.99% 鹵2.79% 鹵2.79%, and the phosphorylation level of receptor-associated protein 3 and mixed series protein kinase-like domains decreased. Conclusion: Ros is involved in the necrotosis of HK-2 cells and can reduce the occurrence of necroptosis by inhibiting the production of ROS. The survival rate of HK-2 cells was increased and the acute tubular necrosis was alleviated.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué);廣東省人民醫(yī)院廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院高血壓研究所;
【基金】：國家臨床重點(diǎn)專科建設(shè)項(xiàng)目 國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81570609) 廣東省自然科學(xué)基金(2014A030313545)
【分類號(hào)】：R692

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