本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對阿霉素腎病大鼠p38和pp38的作用

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【摘要】：目的:分離并培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并對其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。通過腎組織病理觀察、生化指標(biāo)檢測、Western blot技術(shù)觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對阿霉素腎病大鼠的治療效果,并探討B(tài)MSC對p38和pp38的影響。方法:SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定:頸椎脫臼處死大鼠,無菌條件下剪取雙側(cè)股骨和脛骨,采集骨髓,通過密度梯度離心法和貼壁培養(yǎng)法,分離并培養(yǎng)BMSCs。體外純化、傳代、擴(kuò)增。取P3-5代細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物,并進(jìn)行成軟骨、成脂分化誘導(dǎo),鑒定其生物學(xué)特性。將大鼠分為四組,即空白對照組、阿霉素組、干細(xì)胞組、強(qiáng)的松組,空白組不予任何處理,阿霉素組在注射ADR后予生理鹽水靜脈注射,干細(xì)胞組予BMSCs以2x106/只靜脈輸注,強(qiáng)的松組給予強(qiáng)的松5mg/d連續(xù)灌胃。于不同時間點(diǎn)采取大鼠靜脈血,測定血肌酐、尿素、白蛋白、總膽固醇、甘油三脂;收集大鼠尿液,進(jìn)行24h尿蛋白定量;切取大鼠腎臟,經(jīng)染色后置于光鏡及電鏡下觀察腎臟病理變化;western-blot檢測各組大鼠腎臟在不同時間點(diǎn)蛋白p38和pp38表達(dá)差異。結(jié)果:1、獲取的BMSCs為均一的長梭形,呈集落樣生長,純度高、活性強(qiáng)。流式鑒定結(jié)果提示其高表達(dá)CD29、CD44、CD90,低表達(dá)CD11、CD34、CD45、CD106。經(jīng)誘導(dǎo)后能成功向成軟骨細(xì)胞、成脂肪細(xì)胞分化。2、各項生化指標(biāo)顯示:干細(xì)胞組、強(qiáng)的松組24h尿蛋白定量較阿霉素組有所下降,而肌酐、尿素等水平則未見明顯下降。3、腎組織病理觀察:阿霉素組腎小球系膜細(xì)胞輕度增生,腎小管內(nèi)有蛋白管型,電鏡下可見足突融合及微絨毛變性。而干細(xì)胞組和強(qiáng)的松組腎臟只見足細(xì)胞輕度水腫。4、Western blot提示:各干預(yù)組pp38的表達(dá)較空白組均有所上調(diào),但干細(xì)胞組、強(qiáng)的松組pp38的表達(dá)量較阿霉素組少。結(jié)論:利用密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法能成功有效地獲取大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保護(hù)阿霉素腎病大鼠的可能機(jī)制:BMSCs能抑制p38和pp38的表達(dá),并保護(hù)足細(xì)胞,從而達(dá)到減輕蛋白尿的目的。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在短期內(nèi)(1周)對改善腎功能無明顯作用。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R692

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 邱飛遠(yuǎn);何學(xué)令;姚曉琳;李凱;況薇;吳文超;李良;;低頻脈沖電磁場誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨樣細(xì)胞分化[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2012年03期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 米克科;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫原性及誘導(dǎo)免疫耐受作用的臨床應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2009年

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本文編號：1268443