本文關鍵詞：十溴聯(lián)苯醚上調(diào)MAPKs蛋白并損傷血睪屏障的研究

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【摘要】：目的探索雄性ICR暴露十溴聯(lián)苯醚(decabromodiphenyl ether,BDE-209)對小鼠睪丸MAPK通路相關蛋白、血睪屏障緊密連接蛋白Claudin-11以及血睪屏障超微結構的影響;此外,還對不同濃度BDE-209染毒處理Ser W3細胞MAPK通路相關蛋白和緊密連接蛋白Claudin-11表達水平影響進行初步研究,為闡明BDE-209的雄性生殖毒性機制提供科學依據(jù)。方法體內(nèi)實驗中,4周齡雄性ICR小鼠,52只,體重15~21克,適應性飼養(yǎng)一周,隨機分為4組,即溶劑對照組(0 mg/kg BW)、低劑量組(100 mg/kg BW)、中劑量組(300 mg/kg BW)和高劑量組(500 mg/kg BW),每組13只,經(jīng)灌胃染毒6周后處死,冰浴情況下分離臟器、稱重,然后將生物樣本保存于-80℃超低溫冰箱直至檢測。對睪丸組織進行HE染色進行光鏡觀察以及電鏡觀察超微結構;Western Blot方法檢測小鼠睪丸MAPKs通路中的相關蛋白(p38、p-p38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK)和Claudin-11表達變化;體外實驗中,用不同濃度BDE-209(0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml和40μg/ml)處理Ser W3,24h后觀察細胞形態(tài)變化,MTT方法檢測細胞存活百分率、LDH實驗檢測乳酸脫氫酶毒性、Western Blot方法檢測MAPK通路相關蛋白(p38、p-p38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK)和血睪屏障緊密連接蛋白Claudin-11的表達變化。結果BDE-209染毒處理雄性ICR小鼠6周后,發(fā)現(xiàn)各劑量組雄性ICR小鼠的體重增加緩慢,從第三周開始,中劑量組和高劑量組小鼠的體重具有統(tǒng)計學差異(P0.05),小鼠睪丸系數(shù)和附睪系數(shù)顯著降低(P0.05)。HE染色發(fā)現(xiàn)隨著染毒劑量加大,睪丸輸精管中的精子數(shù)目明顯減少,睪丸支持細胞數(shù)減少,細胞排列不緊密,支持細胞間間隙增寬,間質(zhì)細胞間隙明顯增寬,生精細胞間隙增大,支持細胞數(shù)、生精細胞數(shù)以及間質(zhì)細胞數(shù)顯著減少。超微結構結果表明,與溶劑對照組相比,劑量組出現(xiàn)明顯支持細胞緊密連接解體、斷裂。體內(nèi)外實驗均顯示,MAPKs通路中p-p38/p38和p-JNK/JNK值顯著增加,差異在統(tǒng)計學上有意義(P0.05);以及Claudin-11的表達顯著降低(P0.05)。結論BDE-209可以引起睪丸組織和Ser W3細胞中MAPKs通路相關蛋白表達增加、Claudin-11的表達降低,并且引起睪丸組織中支持細胞緊密連接破壞,提示BDE-209可能通過MAPKs通路引起支持細胞BTB損傷。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R697.22

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7 管，

本文編號：1149535