慢病毒介導(dǎo)的過表達(dá)microRNA-663a對膀胱癌細(xì)胞功能學(xué)的影響
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【摘要】:目的探討負(fù)載microRNA-663a(miR-663a)的慢病毒上調(diào)miR-663a對膀胱癌EJ和5637細(xì)胞系功能學(xué)的影響。方法將負(fù)載過表達(dá)miR-663a的慢病毒轉(zhuǎn)染人膀胱癌EJ和5637細(xì)胞系。EJ和5637細(xì)胞系各設(shè)干擾組、陰性對照組和空白對照組,轉(zhuǎn)染72h后置于熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率,采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測miR-663a的表達(dá)量,采用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(CCK-8)法檢測膀胱癌細(xì)胞增殖生長情況,通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測膀胱癌細(xì)胞遷移能力,通過Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測膀胱癌細(xì)胞侵襲能力。結(jié)果 EJ和5637細(xì)胞系中,干擾組的miR-663相對表達(dá)量均顯著高于空白對照組和陰性對照組(P值均0.05),空白對照組的miR-663a相對表達(dá)量與陰性對照組間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均0.05)。EJ細(xì)胞系轉(zhuǎn)染miR-663a后第4、5天,干擾組D值顯著低于陰性對照組和空白對照組同時(shí)間(P值均0.05);5637細(xì)胞系轉(zhuǎn)染miR-663a后第3、4、5天,干擾組D值顯著低于陰性對照組和空白對照組同時(shí)間(P值均0.05)。EJ和5637細(xì)胞系中,干擾組細(xì)胞培養(yǎng)48h時(shí)的閉合率均顯著低于空白對照組和陰性對照組同時(shí)間(P值均0.05)。EJ和5637細(xì)胞系中,干擾組Transwell小室濾膜下表面細(xì)胞數(shù)均顯著低于空白對照組和陰性對照組(P值均0.05)。結(jié)論 miR-663a體外可顯著抑制膀胱癌EJ和5637細(xì)胞系的細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力,為miR-663a可能成為膀胱癌的治療新靶點(diǎn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【作者單位】: 上海長海醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】: 慢病毒 膀胱癌 EJ和細(xì)胞系 microRNA-a
【分類號】:R737.14
【正文快照】: 約95%膀胱癌的組織學(xué)類型為膀胱尿路上皮癌,其中70%~80%的患者腫瘤初發(fā)時(shí)處于非肌層浸潤期(腫瘤分期為Tis、Ta和T1期),腫瘤復(fù)發(fā)率為70%,腫瘤進(jìn)展至肌層浸潤期或發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移占50%[1]。因此,尋找新的治療手段防止膀胱癌進(jìn)展尤為必要。microRNA(miRNA)是一類長度為22個(gè)核苷酸的
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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本文編號:1079539
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