本文關鍵詞：微環(huán)境在多囊腎病囊腫發(fā)生與發(fā)展中的作用及其機制研究

  更多相關文章： 多囊腎 常染色體顯性 微環(huán)境 巨噬細胞

【摘要】：研究目的：本課題探討了常染色體顯性遺傳多囊腎病(ADPKD)中囊腫襯里上皮細胞與巨噬細胞、腎小管上皮細胞構成的微環(huán)境對腎小管上皮細胞的影響,探尋其中可能發(fā)揮作用的因子及其相關機制。方法：1.建立小鼠巨噬細胞(RAW 264.7)與人腎囊腫襯里上皮細胞(Ox161細胞)共培養(yǎng)模型,以實時PCR技術與免疫印跡技術檢測不同刺激因素對巨噬細胞極化的影響。2.建立MDCKⅡ細胞、小鼠巨噬細胞(RAW 264.7)與人腎囊腫襯里上皮細胞(Ox161細胞)三維共培養(yǎng)模型,比較MDCKⅡ細胞不同條件下囊泡直徑。以免疫印跡技術檢測MDCKⅡ細胞與多囊腎病相關通路蛋白的表達。3.以實時PCR技術、免疫印跡技術與酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測小鼠巨噬細胞(RAW 264.7)與人腎囊腫襯里上皮細胞(Ox161細胞)不同共培養(yǎng)模式與刺激條件下TNF-α的表達與分泌。4.以實時PCR技術、免疫印跡技術檢測MDCKⅡ細胞與小鼠巨噬細胞(RAW264.7)、人腎囊腫襯里上皮細胞(Ox161細胞)共培養(yǎng)條件下FIP2表達。5.繁殖并鑒定Pkd1 IKO小鼠,于4周齡予腹腔注射他莫昔芬誘導Pkdl基因敲除,于5周齡建立單側腎臟缺血再灌注模型。6.收集Pkd1 IKO小鼠IRI急性期腎組織標本,免疫印跡法檢測其TNF-α、FIP2蛋白的表達,實時PCR技術檢測其TNF-α、FIP2表達。結果：1.三維培養(yǎng)條件下,與對照組相比,MDCKⅡ細胞與M2型巨噬細胞、囊腫襯里上皮細胞共培養(yǎng),其囊泡直徑明顯增加(P0.05)。MDCKII細胞與M2型巨噬細胞、囊腫襯里上皮細胞共培養(yǎng),其pSTAT3、pAkt、pERK、pCREB、PCNA表達增加。MDCKⅡ細胞與M1型巨噬細胞、囊腫襯里上皮細胞共培養(yǎng),其FIP2蛋白表達增加。2. Pkd1 IKO小鼠單側腎臟IRI后,急性期損傷側腎臟TNF-α、FIP2表達增加,Cre+小鼠較Cre-小鼠腎臟損傷更重,FIP2表達更高。結論：細胞實驗表明,ADPKD中囊腫襯里上皮細胞與巨噬細胞構成的微環(huán)境,可促進囊腫周圍腎小管上皮增殖。微環(huán)境可能在腎損傷條件下,通過促進腎小管上皮細胞FIP2的表達升高,改變其纖毛功能與極性。結合動物實驗結果,在“二次打擊”存在的條件下,微環(huán)境中TNF-α濃度增高,可能參與“三次打擊”,參與ADPKD的囊腫的形成和發(fā)展。
【關鍵詞】：多囊腎 常染色體顯性 微環(huán)境 巨噬細胞
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R692
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-11
• 前言11-13
• 第一部分 腎囊腫微環(huán)境對腎小管上皮細胞增殖的影響及其相關機制13-37
• 前言13-15
• 實驗設計15-17
• 材料與方法17-27
• 結果27-35
• 討論35-37
• 第二部分 腎損傷條件下微環(huán)境的改變及對腎小管上皮細胞作用與機制的探討37-58
• 前言37-39
• 實驗設計39-41
• 材料與方法41-49
• 結果49-56
• 討論56-58
• 全文總結58-59
• 參考文獻59-63
• 綜述63-73
• 參考文獻66-73
• 在讀期間完成和發(fā)表的文章73-74
• 致謝74

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 姚紅兵;肖芳;熊銳華;文明波;黃高;李桂花;;分子靶向治療在肝細胞癌中的研究進展[J];華南國防醫(yī)學雜志;2013年09期

2 周晨辰;張穎慧;薛澄;;V2受體抑制劑:常染色體顯性多囊腎病的新選擇[J];中國中西醫(yī)結合腎病雜志;2014年08期

3 盛�，�;趙利霞;左艷萍;;磷脂酶C-γ1與組織細胞的增殖和遷移[J];河北醫(yī)科大學學報;2014年02期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 劉東伯;塞來昔布抑制鼻咽癌細胞增殖的分子機制研究[D];華中科技大學;2013年

2 陶杰;CREG調控內皮細胞周期的作用機制研究及其在小鼠下肢缺血模型中的作用[D];第三軍醫(yī)大學;2013年

3 楊落落;枯否細胞在對乙酰氨基酚誘導的肝毒性損傷中的作用研究[D];吉林大學;2014年

4 劉東伯;塞來昔布抑制鼻咽癌細胞增殖的分子機制研究[D];華中科技大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 楊柳;巨噬細胞在結核性肉芽腫形成和發(fā)展過程中的極化[D];南昌大學醫(yī)學院;2013年

2 張鴻儒;腸道免疫系統(tǒng)中巨噬細胞和CD4~+T細胞之間的相互作用及機制[D];山東大學;2014年

3 趙永強;塞來昔布誘導喉癌Hep-2細胞凋亡及細胞周期阻滯的實驗研究[D];山東大學;2014年

4 王亞民;環(huán)氧化酶-2表達在NK/T細胞淋巴瘤化療耐藥中的作用及其機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2014年

，

本文編號：1010074