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生肌白玉膏對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面bFGF及TGF-β1表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-08-17 16:06

  本文關(guān)鍵詞:生肌白玉膏對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面bFGF及TGF-β1表達(dá)的影響


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【摘要】:目的:通過(guò)觀察生肌白玉膏對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面模型堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b FGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1),以及對(duì)燙傷大鼠創(chuàng)面修復(fù)的影響,研究生肌白玉膏在促進(jìn)燙傷創(chuàng)面愈合中的作用及其作用機(jī)制。方法:SPF級(jí)健康SD大鼠128只,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,對(duì)大鼠稱(chēng)重,按隨機(jī)數(shù)字表分為空白組、模型組、藥物對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組,每組32只;于燙傷前一天,大鼠背部剪毛、用普通脫毛膏脫毛1處,面積約為4cm×4cm大小,清水洗凈,擦干。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食12小時(shí),自由飲水。模型組、藥物對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組(除空白組外)均按300 mg/kg腹腔注射水合氯醛(10%)以麻醉大鼠,然后將大鼠背部放至100℃的恒溫水浴鍋蒸氣孔中保持5 s,經(jīng)病理證實(shí)可造成深Ⅱ度燙傷。實(shí)驗(yàn)組造模后創(chuàng)面立即外敷生肌白玉膏1.0 g;藥物對(duì)照組的創(chuàng)面外敷1.0 g美寶濕潤(rùn)燒傷膏,模型組只外用0.9%Na Cl(生理鹽水);三組均按照1次/d定時(shí)換藥,一直給藥到處死前1 d;空白組大鼠則正常飼養(yǎng),不施以任何的處理。共治療3周,在造模后第3 d、第7 d、第14 d以及第21 d,分別觀察與記錄空白組與各實(shí)驗(yàn)組的創(chuàng)面愈合情況。采用圖像分析軟件測(cè)量各組的創(chuàng)面面積。取下創(chuàng)面的肉芽組織,制作組織石蠟切片,然后以HE法進(jìn)行染色,并病理學(xué)觀察。采用SABC免疫組化法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面的組新生肉芽組織中b FGF及TGF-β1的表達(dá)量并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,造模后,在第3 d、第7 d、第14 d以及第21 d,各組實(shí)驗(yàn)大鼠的創(chuàng)面面積均呈明顯的減小趨勢(shì);生肌白玉膏組及美寶濕潤(rùn)燒傷膏組的創(chuàng)面收縮率在相同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)可見(jiàn)均明顯地高于模型對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),生肌白玉膏組與美寶濕潤(rùn)燒傷膏組的創(chuàng)面愈合率則無(wú)明顯差異(P0.05)。造模后第3 d,3組實(shí)驗(yàn)大鼠的傷口均主要表現(xiàn)為滲出及充血,較少見(jiàn)肉芽組織增生;造模后第7d,模型組大鼠未見(jiàn)明顯毛細(xì)血管及上皮增生。生肌白玉膏組及美寶濕潤(rùn)燒傷膏組見(jiàn)大量毛細(xì)血管增生,有增生的成纖維細(xì)胞,見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),膠原開(kāi)始形成,上皮細(xì)胞見(jiàn)少量增生。美寶濕潤(rùn)燒傷膏組同樣見(jiàn)大量毛細(xì)血管、成纖維細(xì)胞增生,上皮細(xì)胞增生不明顯。造模后第14 d及第21 d,模型組見(jiàn)形成少量肉芽組織,上皮細(xì)胞增生,較少見(jiàn)纖維細(xì)胞、膠原纖維排列的不規(guī)則。生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組可見(jiàn)肉芽組織形成較多,膠原形成明顯縱行排列狀,上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞增生明顯。造模后第3 d,3組實(shí)驗(yàn)大鼠的皮膚創(chuàng)面的肉芽組織中b FGF表達(dá)量基本相當(dāng),其差異不是很大,且有較高程度的陽(yáng)性表達(dá),呈(++)。造模后第7 d,模型組大鼠b FGF的陽(yáng)性表達(dá)量開(kāi)始下降,呈(+),而在生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組均有所上升,呈(+++)。造模后第14 d及第21 d,3組實(shí)驗(yàn)大鼠的b FGF的陽(yáng)性表達(dá)量均呈下降趨勢(shì),模型組表達(dá)呈(㧟~+),但生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組b FGF的表達(dá)呈(+),但仍高于模型組。生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組與模型組比較均存在顯著差異(P0.01),美寶濕潤(rùn)燒傷膏組與生肌白玉膏組比較結(jié)果無(wú)顯著差異(P0.05)。造模后第3 d,3組實(shí)驗(yàn)大鼠皮膚創(chuàng)面肉芽組織中TGF-β1的表達(dá)量差異不大,水平大致相當(dāng),但均呈較高程度的陽(yáng)性表達(dá),呈(++)。造模后第7 d,模型組大鼠皮膚創(chuàng)面肉芽組織中TGF-β1的陽(yáng)性表達(dá)量開(kāi)始下降,呈(+),而生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組則均有所上升,呈(+++),且2組大鼠的TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)量均明顯高于模型組。造模后第14 d及第21 d,3組實(shí)驗(yàn)大鼠皮膚創(chuàng)面肉芽組織中TGF-β1的陽(yáng)性表達(dá)量均呈下降趨勢(shì),模型組表達(dá)呈(㧟~+),但生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組TGF-β1的表達(dá)呈(+),但仍高于模型組。生肌白玉膏組、美寶濕潤(rùn)燒傷膏組與模型組比較均存在顯著差異(P0.01),美寶濕潤(rùn)燒傷膏組與生肌白玉膏組比較結(jié)果無(wú)顯著差異(P0.05)。結(jié)論:(1)生肌白玉膏有明顯的促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用,其能提高愈合速度,改善愈合質(zhì)量,效果與美寶濕潤(rùn)燒傷膏相當(dāng);(2)生肌白玉膏促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)理可能與其調(diào)節(jié)皮膚創(chuàng)面組織中b FGF及TGF-β1的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:生肌白玉膏 深Ⅱ度燙傷 創(chuàng)面愈合 bFGF TGF-β1
【學(xué)位授予單位】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名:甘肅中醫(yī)學(xué)院)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5
【目錄】:
  • 摘要6-8
  • ABSTRACT8-10
  • 縮略詞表10-11
  • 前言11-12
  • 第一部分 立題依據(jù)12-22
  • 1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在創(chuàng)面治療方面的最新研究進(jìn)展12-18
  • 1.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)創(chuàng)傷愈合過(guò)程的認(rèn)識(shí)12-14
  • 1.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)創(chuàng)傷愈合類(lèi)型的認(rèn)識(shí)14
  • 1.3 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)影響創(chuàng)面愈合因素的認(rèn)識(shí)14-15
  • 1.4 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)促進(jìn)創(chuàng)面愈合的治療現(xiàn)狀15-18
  • 2 中醫(yī)學(xué)對(duì)創(chuàng)面修復(fù)的研究現(xiàn)狀18-22
  • 2.1 創(chuàng)傷病因的認(rèn)識(shí)18
  • 2.2 創(chuàng)傷病機(jī)的認(rèn)識(shí)及治療原則18-19
  • 2.3 中藥對(duì)創(chuàng)面修復(fù)的治療現(xiàn)狀19-22
  • 2.3.1 中藥促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用機(jī)理研究19-20
  • 2.3.2 中藥方劑在創(chuàng)面愈合中的應(yīng)用20-22
  • 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究22-33
  • 第一章 大鼠深I(lǐng)I度燙傷模型的制備22-24
  • 1 大鼠深I(lǐng)I度燙傷模型制備的方法22
  • 2 材料與方法22-23
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料22
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)物品22
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法22-23
  • 2.2.1 脫毛22-23
  • 2.2.2 燙傷裝置23
  • 2.2.3 燙傷實(shí)施23
  • 2.2.4 標(biāo)本采集及病理檢查23
  • 3 結(jié)果23-24
  • 第二章 實(shí)驗(yàn)研究24-33
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料24-25
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物24
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)藥物24
  • 1.3 試劑和儀器24-25
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境25
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法25-27
  • 2.1 生肌白玉膏的制備25
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)分組25
  • 2.3 給藥25
  • 2.4 取材25
  • 2.5 組織切片制備25-26
  • 2.5.1 固定與包埋25
  • 2.5.2 HE常規(guī)組織學(xué)染色25-26
  • 2.5.3 免疫組化染色26
  • 2.6 觀察指標(biāo)與分析方法26-27
  • 2.6.1 創(chuàng)面大體觀察26-27
  • 2.6.2 創(chuàng)面愈合率27
  • 2.6.3 組織學(xué)觀察27
  • 2.6.4 創(chuàng)面肉芽組織中bFGF、TGF-β1 的陽(yáng)性細(xì)胞的判斷與檢測(cè)27
  • 3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理27-28
  • 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-32
  • 4.1 各組創(chuàng)面愈合基本情況觀察28
  • 4.2 創(chuàng)面愈合率28-29
  • 4.3 組織學(xué)光鏡觀察29
  • 4.4 創(chuàng)面肉芽組織中bFGF、TGF-β1 水平的檢測(cè)29-32
  • 4.4.1 創(chuàng)面肉芽組織中bFGF水平檢測(cè)29-31
  • 4.4.2 創(chuàng)面肉芽組織中TGF-β1 水平檢測(cè)31-32
  • 5 結(jié)論32-33
  • 第三部分 討論33-37
  • 1 生肌白玉膏方解33-34
  • 2 生肌白玉膏對(duì)創(chuàng)面愈合的作用34
  • 3 bFGF促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)理34-35
  • 4 TGF-β1 促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)理35-37
  • 第四部分 結(jié)語(yǔ)與展望37-38
  • 1 結(jié)語(yǔ)37
  • 2 存在的問(wèn)題及展望37-38
  • 參考文獻(xiàn)38-46
  • 在學(xué)期間表論文目錄46-47
  • 致謝47-48
  • 附錄48-52
  • 附圖 148-49
  • 附圖 249-50
  • 附圖 350-51
  • 附圖 451-52
  • 附圖 552

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):689869

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