目的:1.制備抗鈉-鈣交換體（Na+-Ca2+exchanger,NCX）α-2重復(fù)序列（840-877）（α-2（840-877））單克隆抗體,觀察其對(duì)成年大鼠心室肌細(xì)胞主要離子電流的影響。2.建立大鼠心肌缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）誘發(fā)的心律失常模型,觀察抗NCXα-2（840-877）單克隆抗體對(duì)模型大鼠心律失常的影響,并分析其作用機(jī)制。方法:1.抗NCXα-2（840-877）單克隆抗體的制備及效價(jià)檢測(cè)。單克隆雜交瘤細(xì)胞株由NCXα-2第840-877位氨基酸殘基肽段免疫小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合而成,經(jīng)篩選所得的陽(yáng)性克隆株及三次亞克隆后獲得可以穩(wěn)定分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。通過(guò)對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法制備腹水,應(yīng)用Protein A親和柱對(duì)所得腹水進(jìn)行純化,得到單克隆抗體。利用間接ELISA法檢測(cè)純化后的單克隆抗體效價(jià);SDS-PAGE法測(cè)定純化后的單克隆抗體純度。2.大鼠心室肌細(xì)胞急性分離。正常成年SD大鼠用40 mg·kg-1戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,快速開(kāi)胸取心臟,經(jīng)主動(dòng)脈逆行插管將心臟懸掛于Langendorff灌... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
第一部分 抗鈉-鈣交換體α-2_(840-877)單克隆抗體的制備及其對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞主要離子電流的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體的制備
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞離子電流的影響
第二部分 抗鈉-鈣交換體α-2_(840-877)單克隆抗體對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的作用研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對(duì)離體大鼠心臟缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的影響
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對(duì)大鼠在體心臟缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的影響
        2.3 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞鈣瞬變的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]特異性增強(qiáng)心肌內(nèi)向整流鉀電流(IK1)-抗心律失常新途徑[D]. 劉清華.山西醫(yī)科大學(xué) 2009
[2]增強(qiáng)L-型鈣通道、鈉鈣交換體和鈉泵以提高心肌變力性的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 白曉潔.山西醫(yī)科大學(xué) 2006

碩士論文
[1]抗Na+/Ca2+交換體α-2840-877單克隆抗體的制備及其對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞Na+/Ca2+交換電流的特異性抑制作用研究[D]. 高亞男.山西醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]鈣蛋白酶抑制劑MDL28170減輕大鼠心肌缺血/再灌注損傷[D]. 顧曉明.第四軍醫(yī)大學(xué) 2014
[3]抗GST標(biāo)簽蛋白單克隆抗體的制備及其活性鑒定[D]. 王政.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



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