目的和意義：以人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株HMEC-1為研究對(duì)象,探討缺氧條件下血府逐瘀湯含藥血清不同濃度（1.25%,2.5%,5%）與血管新生活動(dòng)中EphrinB2和EphB4的關(guān)系。從細(xì)胞水平、分子水平探討血府逐瘀湯對(duì)EphB4/EphrinB2信號(hào)的影響,從而為血府逐瘀湯調(diào)控血管新生的機(jī)制和臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)佐證。方法：1.制備大鼠血府逐瘀湯含藥血清和空白血清。SPF級(jí)SD雄性大鼠60只,體重（230±10）g,隨機(jī)分為藥物組和空白對(duì)照組2組,每組30只,由校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)。參照人和動(dòng)物間用藥劑量的換算,藥物組以人口服劑量12倍,即0.41 g/kg灌胃,生理鹽水組以等量生理鹽水灌胃,血府逐瘀膠囊按劑量溶于生理鹽水中,連續(xù)灌胃7天,2次／天,于第8天灌胃后兩小時(shí)注射戊巴比妥鈉（2%濃度,0.75 ml/kg）腹腔注射麻醉,腹主動(dòng)脈采血,4000 r/min離心30 min后分離血清,56℃℃,30 min水浴滅活,無菌室超凈工作臺(tái)上用0.221μm的針式過濾器過濾除菌,分裝,置于-20℃℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.常規(guī)培養(yǎng)HMEC-1細(xì)胞。將11.6g MCDB-131干粉培養(yǎng)基和1.18g碳酸... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－５多個(gè)時(shí)間點(diǎn)ＥｐｈｒｉｎＢ２－ｍＲＮＡ，ＥｐｈＢ４－ｍＲＮＡ的表達(dá)情況??注：與同等血淸量的空白對(duì)照組比較，＊戶＜０．０５，＊＊戶＜０．０１

注：與同等血清量的空白對(duì)照組比較，＊戶＜０．０５，＊＊戶＜０．０１，??Ｃ代表空白血清組，Ｙ代表含藥血清組，數(shù)值代表藥物作用時(shí)間化）。??結(jié)果如圖３－６所示，含藥血清組ＥｐｈｒｉｎＢ２蛋白表達(dá)量在她和２４ｈ明顯高于空白對(duì)照??組（ｆ＜０．０５）。而化、化、１化和４化含藥血清組蛋白表達(dá)較空白對(duì)照組表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差??異。雖然缺氧條件下２．５％血府逐疲湯含藥血清組ＥｐｈｒｉｎＢ２基因在化和１化轉(zhuǎn)錄水平上??調(diào)，但僅在化和２４ｈ兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的蛋白表達(dá)量增加，提示ＥｐｈｒｉｎＢ２基因的表達(dá)呈復(fù)雜的??起伏變化。??２．３缺氧條件下血府逐癖巧對(duì)ＥｐｈＢ４蛋白水平的影響??選�。玻担ズ幯搴涂瞻籽鍖�(duì)ＨＭＥＣ－１細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)化、６ｈ、９ｈ、１化、２４ｈ和??４８ｈ，隨后用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ技術(shù)對(duì)ＥｐｈＢ４蛋白水平表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。??結(jié)果如圖３－７所示，含藥血清組ＥｐｈＢ４蛋白表達(dá)量在１化低于空白血清組（ｐ＜０．０５），??３ｈ、６ｈ、化、２４ｈ、４化與同等血清量的空白對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，ＥｐｈＢ４蛋白表達(dá)??下調(diào)的時(shí)間和基因下調(diào)表達(dá)的時(shí)間是一致的

裏二剛ｈｉ??０．０?Ｉ?Ｉ?Ｉ，?—?！，■?！，■?Ｉ?！，■?Ｉ?！，■??冷?公?爭(zhēng)?成?礦??時(shí)間??圖３－８多個(gè)時(shí)間點(diǎn)ＥｐｈｒｉｎＢ２囉酸化蛋白表達(dá)情況（＾±Ｓ，ｎ＝３）??注：與同等血清量的空白對(duì)照組比較，＊戶＜０．０５，?＊＊戶＜０．０１。??２０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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