[目的]建立損傷后不同時間點(diǎn)大鼠視神經(jīng)挫傷模型；研究一氧化氮在損傷不同時間點(diǎn)含量的變化及其與RGCs凋亡的關(guān)系,探討一氧化氮三種限速酶在NO含量變化過程中所發(fā)揮的作用,以期為臨床治療外傷性視神經(jīng)損傷提供新的思路和方法。[方法]1)建立大鼠視神經(jīng)夾挫傷動物模型,將雙眼正常的成年SPF級SD雌性大鼠170只隨機(jī)分為三組,即正常組2只,手術(shù)組84只,假手術(shù)組84只,在相同條件下進(jìn)行飼養(yǎng),手術(shù)組每只大鼠左眼為手術(shù)眼,做視神經(jīng)夾挫傷模型,用夾持力為50g的夾持鑷在球后約2mm處鉗夾視神經(jīng)10s,右眼不做處理。假手術(shù)左眼僅分離視神經(jīng),不對視神經(jīng)進(jìn)行夾持,右眼不做處理。正常組雙眼不做任何處理。2)正常組2只左右眼做石蠟包埋切片；再將手術(shù)組與假手術(shù)組按損傷后時間點(diǎn)分為7個亞組,分別為6h組（12只,損傷后6小時）、12h組（12只,損傷后12小時）、24h組（12只,損傷后24小時）、3d組（12只,損傷后3天）、5d組（12只,損傷后5天）、7d組（12只,損傷后7天）、14d組（12只,損傷后14天）,在損傷后相應(yīng)時間點(diǎn)取下大鼠眼球,取材前先用水合氯醛麻醉大鼠,然后采用顯微有齒鑷及角鞏膜剪小心取下... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１視神經(jīng)夾持傷部位ＨＥ染色結(jié)果：Ａ．正常組視神經(jīng)（Ｘ２００）?；?Ｂ．正常組視神經(jīng)（Ｘ４００）；??Ｃ．手術(shù)組視神經(jīng)（Ｘ２００）?；?Ｄ．手術(shù)組視神經(jīng)（Ｘ４００）??１．２視網(wǎng)膜ＨＥ染色結(jié)果??

ｃｏｎｔｒｏｌ?化?１?化?２４ｈ?３ｄ?５ｄ?７ｄ?１４ｄ??圖５視神經(jīng)損傷后不同時間點(diǎn)ＮＯ含量變化與假手術(shù)狙相比Ｐ＜０．０氮合酶ｉＮＯＳ、ｅＮＯＳ及ｎＮＯＳｍＲＮＡ檢測??氮合酶ｉＮＯＳ?ｍＲＮＡ檢測結(jié)果??民ｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民方法來檢測視神經(jīng)損傷后不同時間點(diǎn)視

取各細(xì)視神經(jīng)作矢狀位切片并做ＨＥ染色，觀察夾持損傷部位的變化：正常姐大??鼠視神經(jīng)縱切片正常的神經(jīng)纖維呈線狀，向遠(yuǎn)端延伸，神經(jīng)纖維排列密集、規(guī)則，??染色均勻，膠質(zhì)細(xì)胞均勻分布（圖１Ａ、１Ｂ）；假手術(shù)組與正常組相比無明顯差??異；觀察夾持損傷部位，與未夾持部位相比，視神經(jīng)纖維稀疏扭曲，膠質(zhì)細(xì)胞排??列奈亂，視神經(jīng)纖淮出現(xiàn)明顯水腫和空泡變性，神經(jīng)纖維及膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊，??出現(xiàn)潰變（圖１Ｃ、１Ｄ）。??、睽中辛巧巧坦汾知‘?？：舞／巧Ｊ?／，？?？？。巧拓巧４０化．／?？每??參瞬婦ｍ??麵＇．擔(dān)Ｓ，；／?，巧，ａ??ｂ？觀鄉(xiāng)立！??ｉｌｌ?ｉｉｉｌ??朵備；‘近，＇．少！心．．稱銷．汽??圖１視神經(jīng)夾持傷部位ＨＥ染色結(jié)果：Ａ．正常組視神經(jīng)（Ｘ２００）?；?Ｂ．正常組視神經(jīng)（Ｘ４００）；??Ｃ．手術(shù)組視神經(jīng)（Ｘ２００）?；?Ｄ．手術(shù)組視神經(jīng)（Ｘ４００）??１．２視網(wǎng)膜ＨＥ染色結(jié)果??對正常姐及各時點(diǎn)手術(shù)組及假手術(shù)組大鼠視網(wǎng)膜進(jìn)行ＨＥ染色后發(fā)現(xiàn)；正常??大鼠視網(wǎng)膜ＨＥ染色可見Ｈ層細(xì)胞核，從玻璃體腔向鞏膜依次為神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、??雙極細(xì)胞層、感光細(xì)胞層，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層的細(xì)胞呈單層排列，內(nèi)核層及外核層清??晰


本文編號：3034064