【摘要】：目的：通過Allen打擊法建立SD大鼠急性脊髓損傷動物模型，觀察P2X7受體阻斷劑BBG與小劑量甲潑尼龍聯(lián)合應用對實驗性脊髓損傷大鼠的運動功能恢復情況、神經(jīng)保護作用并與大劑量甲潑尼龍對比。 方法：1.實驗動物分組：52只成年雄性S-D大鼠隨機分為五組：A組：假手術組、B組：創(chuàng)傷對照組、C組：BBG組、D組：大劑量甲潑尼龍組和E組：BBG+小劑量甲潑尼龍組。 2.建立大鼠脊髓損傷動物模型：麻醉狀態(tài)下，顯露大鼠T10節(jié)段脊髓，用10g的打擊桿從12.5mm高度自由落體,撞擊T10節(jié)段脊髓，造成急性脊髓損傷。 3.觀察項目：（1）分別在脊髓損傷后第1天、3天、7天、14天、21天、28天、42天應用BBB評分評價大鼠運功功能的改變；（2）分別于脊髓損傷后第3天、42天灌流取脊髓，HE染色觀察脊髓組織病理改變，LFB染色觀察脊髓殘余白質(zhì)面積；（3）免疫組織化學法檢測GFAP陽性細胞改變。 結(jié)果：1.A組（假手術組）大鼠術后BBB評分為21分，與術前沒有改變；其余4組大鼠脊髓損傷后1d天BBB評分均為0分，以后各組大鼠BBB評分有不同程度的恢復，到脊髓損傷后42天時各組大鼠BBB評分為B組（創(chuàng)傷對照組）8.25±0.957、C組（BBG組）10.67±0.816、D組（大劑量甲潑尼龍組）12.00±0.632、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）12.50±0.837，C、D、E組與B組相比BBB評分有明顯統(tǒng)計學差異（P0.01），且E組BBB評分最高；D、E組與C組相比BBB評分有統(tǒng)計學差異（P0.05），D、E組間BBB評分未見明顯統(tǒng)計學差異(P0.05) 2. HE染色觀察：脊髓損傷后3天，損傷區(qū)脊髓結(jié)構(gòu)紊亂，彌漫性出血、水腫，灰白質(zhì)分界不清，大量炎性細胞浸潤,以單核或多核細胞為主,各組病理改變差異不明顯。脊髓損傷后第42天，各組損傷區(qū)脊髓組織可見不同程度的修復改變，中央灰質(zhì)可見空腔形成。其中，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）修復程度明顯好于B組（創(chuàng)傷對照組）、C組（BBG組）。 3. LFB染色觀察：手術后42天，A組（假手術組）大鼠光鏡下見脊髓白質(zhì)呈均勻的藍染，未見脫髓鞘改變，手術中心脊髓殘余白質(zhì)面積為2.175±0.050mm2。剩余各組脊髓損傷后42天損傷中心脊髓均有不同程度的脫髓鞘改變，白質(zhì)藍染區(qū)域不同程度的減少，可見淡染區(qū)域，其中B組（創(chuàng)傷對照組）大鼠脊髓殘余白質(zhì)面積最少，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）尚有較多的白質(zhì)殘留，C、D、E組與B組相比具有統(tǒng)計學差異（P0.05），C組與D、E組相比具有統(tǒng)計學差異（P0.05），而D、E組間未見明顯統(tǒng)計學差異（P0.05） 4.GFAP免疫組織化學觀察：在大鼠脊髓損傷后3天，各組大鼠損傷區(qū)脊髓GFAP陽性細胞有不同程度的增加，其中B組（創(chuàng)傷對照組）大鼠損傷區(qū)脊髓可見大量GFAP陽性細胞，，C組（BBG組）、D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍）與A組（假手術組）相比GFAP陽性細胞雖有增加，但不如B組明顯。其中GFAP陽性細胞數(shù)C組D組E組。脊髓損傷后42天，各組大鼠損傷區(qū)脊髓GFAP陽性細胞數(shù)差異不明顯。 結(jié)論：1.BBG聯(lián)合小劑量甲潑尼龍能促進脊髓損傷后大鼠運動功能的恢復并減輕SCI后的組織病理改變； 2. BBG聯(lián)合小劑量甲潑尼龍可抑制脊髓損傷后損傷區(qū)脊髓白質(zhì)脫髓鞘； 3.BBG與小劑量甲潑尼龍聯(lián)合使用對脊髓損傷后大鼠的神經(jīng)保護作用可能與抑制損傷區(qū)脊髓膠質(zhì)瘢痕的產(chǎn)生有關。
【圖文】：

大連醫(yī)科大學碩士學位論文炎性細胞浸潤,以單核或多核炎性細胞為主,各組脊髓損傷后病理改變（圖 2—2，3，4）。脊髓損傷后 42 天，各組損傷區(qū)脊髓組織可不同程改變，中央灰質(zhì)可見空腔形成。其中，D 組（大劑量甲潑尼龍組）、EBBG+小劑量甲潑尼龍組）修復程度明顯好于 B 組（創(chuàng)傷對照組）、C 組）。且 D、E 組間修復程度差異不明顯。

大連醫(yī)科大學碩士學位論文鞘改變，白質(zhì)藍染區(qū)域不同程度的減少，可見淡染區(qū)域（圖 3）。其中 B 組（創(chuàng)對照組）大鼠脊髓殘余白質(zhì)面積最少，D 組（大劑量甲潑尼龍組）、E 組（BBG劑量甲潑尼龍組）尚有較多的白質(zhì)殘留，C、D、E 組與 B 組相比具有統(tǒng)計學差（P<0.05），C 組與 D、E 組相比具有統(tǒng)計學差異（P<0.05），而 D、E 組間未見顯統(tǒng)計學差異（P>0.05）（表 2，圖 4）。
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R651.2

【共引文獻】

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本文編號：2574242