【摘要】：目的：觀察局灶性腦梗死大鼠皮質軸突生長導向因子-1(netrin-1，Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a，sema3a)的表達及電針干預對其表達的影響。探索Ntn1與sema3a在電針對腦梗后神經(jīng)可塑性影響中的作用。 方法：將135只雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠分為正常組(n=15)、模型組(n=60)及電針組(n=60)。利用線栓法制作大腦中動脈閉塞（middlecerebral artery occlusion，MCAO）模型，并行l(wèi)onga評分。2，3，5—氯化三苯基四氮唑（TTC）染色與蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining， HE)染色確定造模成功。電針選穴“內關”(PC6)，“足三里”(ST36)，刺激參數(shù)為疏密波，頻率80～100Hz，強度以保持針刺局部輕微顫抖為度，留針30min。電刺激在大鼠麻醉蘇醒后90min進行。分別在術后1d、3d、7d、14d時，對術后大鼠進行神經(jīng)功能評分(modified neurologic severity scores，mNSS)，利用免疫組化檢測缺血側大腦腦皮質中Ntn1、sema3a、神經(jīng)絲蛋白200(NF200)分布和表達，免疫印跡法檢測缺血側大腦皮質Ntn1和sema3a的蛋白表達。 結果：免疫組化結果顯示在各個時相點大鼠腦皮質均表達Ntn1和sema3a，主要集中在細胞質陽性表達。Westernblot檢測結果顯示，與正常組相比，模型組Ntn1蛋白的表達水平在腦梗死后1d即開始明顯上升(P＜0.01)，3d時呈上升趨勢(P＜0.01)，7d時達峰值(P＜0.01),14d時仍顯著高于基礎水平(P＜0.01)，電針組與模型組相比，Ntn1蛋白表達趨勢相同，但表達量明顯高于模型組，術后1d、3d、7d、14d時有統(tǒng)計學差異(P＜0.05，P＜0.01).與正常組相比，模型組sema3a蛋白的表達水平在術后1d即開始上升(P＜0.01),7d時達高峰(P＜0.01),14d時仍高于基礎水平(P＜0.01)。同時相點電針組與模型組相比sema3a均呈現(xiàn)低表達，1d、3d和7d、14d時有統(tǒng)計學差異(P＜0.05，P＜0.01)，峰值同樣在7d時出現(xiàn)。Western blot檢測結果與免疫組化分析結果基本相符。7d、14d時電針組與模型組相比mNSS評分存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05),14d時電針組與模型組相比NF200的表達量存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。結論局灶性腦梗死后大鼠皮質Ntn1與sema3a表達明顯上調，給予電針干預后可提高Ntn1的表達并抑制sema3a的表達，促進軸突的再生與修復，這可能是電針促進腦梗死后神經(jīng)功能恢復的機制之一。
【圖文】：

學差異( P ＜ 0. 01) 。電針組sema3a 的表達趨勢與模型組相符，但表達量明顯低于模型組，1、3、7、14 d 時與模型組相比有統(tǒng)計學差異( P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01).見圖2（Fig.2）、圖3（Fig.3）、圖4（Fig.4）、圖5(Fig.5)a: P＜0.05，b: P＜0.01，與正常組比較; c: P＜0.05，d: P＜0.01，與模型組比較圖2 不同時相點各組大鼠腦皮質Ntn1 的平均光密度值

圖6 Western blot 檢測不同時相點各組大鼠腦皮質Ntn1 與sema3a 的表達Figure 6 the result of Western blotting with Ntn1 and sema3aa: P ＜ 0. 01 與正常組比較; b: P ＜ 0. 05，c: P ＜ 0. 01 與模型組比較圖7 不同時相點各組大鼠腦皮質Ntn1 的灰度值a: P ＜ 0. 01 compared with normal group; b: P ＜ 0. 05，c: P ＜ 0. 01
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R245.97

【參考文獻】

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本文編號：2521831