【摘要】：隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)、動(dòng)物胚胎學(xué)和配子生物工程技術(shù)的發(fā)展，多種轉(zhuǎn)基因家畜已經(jīng)研制成功，在生物基礎(chǔ)研究、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域已顯示了廣闊的應(yīng)用前景。與此同時(shí)轉(zhuǎn)基因食品的安全與否也成為了社會(huì)各界關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。因此轉(zhuǎn)基因食品安全與否，對(duì)于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展、轉(zhuǎn)基因食品的推廣以及解決全球的糧食短缺問(wèn)題都具有重要意義。 本研究結(jié)合FDA/WHO發(fā)布的實(shí)質(zhì)等同原則、植物轉(zhuǎn)基因安全研究的先例和農(nóng)業(yè)部關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品安全的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及食品安全標(biāo)準(zhǔn)，從轉(zhuǎn)β防御素3基因牛奶營(yíng)養(yǎng)成分分析，外源蛋白生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)基因食品飼喂小鼠食用安全性實(shí)驗(yàn)三方面入手，評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因牛奶的食用安全性。本研究的實(shí)施為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)品的后期應(yīng)用提供了一定的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)，為建立轉(zhuǎn)基因動(dòng)物及其產(chǎn)品安全性檢測(cè)體系進(jìn)行了初步的探索。 1.牛奶營(yíng)養(yǎng)成分分析 本實(shí)驗(yàn)以轉(zhuǎn)人β防御素3基因牛奶為實(shí)驗(yàn)樣品，以普通牛奶作為對(duì)照，對(duì)比了兩種牛奶的基本營(yíng)養(yǎng)成分（包括脂肪、總蛋白含量、乳糖含量、PH、非脂乳固體）、氨基酸、主要礦質(zhì)元素（包括Ca、Mg、P、K、Na、Fe、Zn、Se）、維生素（包括維生素A、維生系E、維生素C、維生素B1、維生素B2）的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，，轉(zhuǎn)人β防御素3基因牛奶在營(yíng)養(yǎng)成分方面與普通牛奶比較，其差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.生物信息學(xué)分析 使用ExPASy網(wǎng)站中的Pepetide Mass、ProtParam tool和Portscale對(duì)人β防御素3進(jìn)行蛋白的結(jié)構(gòu)和理化分析。使用SDAP和Farrp數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)人β防御素3與致敏性蛋白的同源序列對(duì)比；使用PDB和PHYRE數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行三維結(jié)構(gòu)管比對(duì)，人β防御素3的致敏性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1)人β防御素3不是來(lái)自于公認(rèn)的八類(lèi)主要致敏原；2）理化性質(zhì)預(yù)測(cè)顯示人β防御素3是一種不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)；3）生物信息學(xué)分析顯示人β防御素3與數(shù)據(jù)庫(kù)中的致敏性蛋白沒(méi)有同源性序列，提示β防御素3不具有致敏性。 3.轉(zhuǎn)人β防御素基因牛奶小鼠經(jīng)口30天飼喂實(shí)驗(yàn) 本實(shí)驗(yàn)將小鼠分為三組，分別為灌胃飼喂轉(zhuǎn)人β防御素3基因牛奶組、普通牛奶組、空白對(duì)照組。各實(shí)驗(yàn)組小鼠飼喂30天后，腹腔麻醉，經(jīng)心臟采血分別用于血液學(xué)常規(guī)檢查和生化指標(biāo)檢測(cè)。采血后，取小鼠腦、心臟、肺臟、肝臟、脾臟、胃、大腸、小腸、腎臟等主要臟器組織制作切片后進(jìn)行HE染色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各實(shí)驗(yàn)組血液學(xué)指標(biāo)、血清生化指標(biāo)無(wú)顯著差異，大體解剖和病理學(xué)檢查未見(jiàn)異常。
[Abstract]:With the development of modern molecular biology, animal embryology and gametes bioengineering, many kinds of transgenic livestock have been successfully developed, and have shown a broad application prospect in biological basic research, medicine, agriculture, environmental protection and other fields. At the same time, the safety of GM food has become the focus of attention. Therefore, the safety or not of genetically modified food is of great significance to the development of transgenic technology, the promotion of transgenic food and the solution of global food shortage. Based on the principle of substantial equivalence published by FDA/WHO, the precedent of plant transgenic safety research and the national standards and food safety standards of the Ministry of Agriculture on the safety of genetically modified foods, the nutritional composition of milk with 尾 -defensin 3 gene was analyzed. The food safety of transgenic milk was evaluated by bioinformatics analysis of exogenous protein and experiment of food safety of transgenic food feeding mice. The implementation of this study provides a certain experimental and theoretical basis for the later application of transgenic animal products, and provides a preliminary exploration for the establishment of a safety detection system for transgenic animals and their products. 1. Nutritional composition Analysis of Milk in this study, the basic nutritional components (including fat, total protein content, lactose content, PH,) of two kinds of milk were compared using human 尾 -defensin 3 gene milk as experimental sample and ordinary milk as control. Non-fat milk solid), amino acids, main mineral elements (including Ca,Mg,P,K,Na,Fe,Zn,Se), vitamins (including vitamin A, life line E, vitamin C, vitamin B1, vitamin B2). The results showed that there was no significant difference in nutritional composition of human 尾 -defensin 3 gene milk compared with that of common milk. 2. Bioinformatics analysis of human 尾-defensin 3 protein using Pepetide Mass,ProtParam tool and Portscale in ExPASy website. The homologous sequences of human 尾 -defensin 3 and sensitized protein were compared by using SDAP and Farrp databases, and the sensitivities of human 尾 -defensin 3 were obtained by using PDB and PHYRE databases for three-dimensional structural tube alignment. The results were as follows: 1) Human 尾 -defensin 3 was not derived from eight major allergens, 2) the physical and chemical properties predicted that human 尾 -defensin 3 was an unstable protein. 3) Bioinformatics analysis showed that human 尾 -defensin 3 had no homologous sequence with the sensitized protein in the database, suggesting that 尾 -defensin 3 was not sensitized. 3. The mice were divided into three groups: human 尾 -defensin 3 gene milk group, normal milk group and blank control group. After 30 days of feeding, the mice in each experimental group were anesthetized intraperitoneally, and blood was collected from the heart for routine hematological examination and biochemical index detection. After blood collection, the brain, heart, lung, liver, spleen, stomach, large intestine, small intestine, kidney and other main organs of the mice were taken for HE staining. The results showed that there were no significant differences in hematological and serum biochemical indexes among the experimental groups, and there were no abnormalities in gross anatomy and pathology.
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：TS252.1

【共引文獻(xiàn)】

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1 寧金花;周偉;黃松青;李余糧;;煙草馬鈴薯Y病毒研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年10期

2 孫猛;劉威生;劉寧;郁香荷;張玉萍;徐銘;章秋平;;國(guó)內(nèi)外李育種研究概述[J];北方果樹(shù);2009年06期

3 史自濤;董國(guó)忠;原利榮;張翥;;內(nèi)毒素對(duì)牛乳品質(zhì)的影響及其機(jī)制[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2013年12期

4 ;Effect of cDNA fragments in different length derived from Potato Virus Y coat protein gene on the induction of RNA-mediated virus resistance[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2004年04期

5 盛耀;許文濤;羅云波;;轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)業(yè)化情況[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2013年12期

6 畢影東;楊傳平;;生物技術(shù)在林木遺傳育種中的應(yīng)用[J];世界林業(yè)研究;2007年06期

7 郭興啟,韓宏巖,張杰道,王洪剛;轉(zhuǎn)不可翻譯PVY~N CP基因煙草的抗病性分析[J];實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào);2003年03期

8 郭興啟,李菡,張杰道,竺曉平,王洪剛;表達(dá)馬鈴薯Y病毒外殼蛋白基因的轉(zhuǎn)基因煙草抗病機(jī)制[J];應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào);2003年04期

9 遲勝起,宋云枝,朱常香,鄭成超,劉曉玲,溫孚江;核基質(zhì)結(jié)合區(qū)對(duì)馬鈴薯Y病毒全長(zhǎng)非翻譯CP基因介導(dǎo)抗病性的影響[J];植物病理學(xué)報(bào);2005年04期

10 BAI Li-jing;JU Hui-ming;MU Yu-lian;YANG Shu-lin;REN Hong-yan;AO Hong;WANG Chu-duan;LI Kui;;The Establishment of Double-Transgenic Mice that Co-Express the appA and MxA Genes Mediated by Type A Spermatogonia In vivo[J];Journal of Integrative Agriculture;2014年12期

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1 范凈;柑橘轉(zhuǎn)GFP、AP1和LFY基因植株群體的分子鑒定與基因表達(dá)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 葛才林;水稻（Oryza sativa L.）和小麥（Triticum aestivum L.）的重金屬毒害與耐性的分子機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2002年

3 朱俊華;馬鈴薯Y病毒衣殼蛋白基因片段長(zhǎng)度和結(jié)構(gòu)對(duì)RNA介導(dǎo)抗病性的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

4 竺曉平;馬鈴薯Y病毒CP基因的短片段及其反向重復(fù)轉(zhuǎn)基因煙草的RNA介導(dǎo)的抗病性研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

5 Syed Asghar Tori;[D];浙江大學(xué);2005年

6 劉小紅;玉米矮花葉病抗性的分子機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

7 宋莉;ChIFN-α基因遺傳轉(zhuǎn)化植物及提高煙草抗病毒能力的研究[D];貴州大學(xué);2009年

8 陳立梅;誘導(dǎo)性表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因豬的建立[D];吉林大學(xué);2010年

9 黃瓊;五指山小型豬在體消化模型和食物致敏模型的建立及其機(jī)制研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2010年

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2 景茂峰;煙草RDR1基因下調(diào)對(duì)轉(zhuǎn)基因煙草中RNA介導(dǎo)病毒抗性的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 張會(huì)敏;辣椒CTOM1基因的克隆與基因沉默表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[D];廣西大學(xué);2004年

4 李春順;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)蕪菁花葉病毒的Hc-Pro基因?qū)ηo用芥菜的遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];浙江大學(xué);2005年

5 李闖;歐洲李生物學(xué)特性及栽培技術(shù)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 熊偉;馬鈴薯StTOM3基因的克隆與表達(dá)StTOM3-RNAi轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的構(gòu)建[D];廣西大學(xué);2006年

7 劉熔;特定基因甲基化研究方法建立及LEAFY基因甲基化與早實(shí)枳階段發(fā)育關(guān)系研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 李中港;過(guò)敏反應(yīng)動(dòng)物模型的建立及在雙黃連注射劑過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)中的應(yīng)用[D];山東大學(xué);2010年

9 王莉;番木瓜環(huán)斑病毒外殼蛋白基因反向重復(fù)結(jié)構(gòu)表達(dá)載體的轉(zhuǎn)基因研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

10 高輝;轉(zhuǎn)PEPCK-1基因豬的生物安全評(píng)價(jià)[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2399791