本文選題：臍帶間充質(zhì)干細胞　切入點：血管生成素1　出處：《山東大學》2016年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究背景急性肺損傷(acute lung injury, ALI)是由各種非心源性因素引起的進行性加重的呼吸困難、頑固性低氧血癥和肺水腫,病理特征是肺泡-毛細血管屏障損傷、通透性增加,通氣/血流比例失調(diào)致呼吸衰竭,演變?yōu)榧毙院粑狡染C合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS),在ALI/ARDS中,脂多糖(Lipopolysac charide, LPS)對微血管內(nèi)皮的直接損傷作用和間接作用都起重要作用,是多種炎癥細胞和細胞因子參與,大量多形核中性粒細胞、巨噬細胞等炎癥細胞浸潤激活,釋放大量炎性細胞因子。盡管目前已在ALI/ARDS改善癥狀、控制病死率等藥物研究方面有諸多進展,但死亡率仍高達40-60%,因此,尋找新的有效治療策略,促進ALI/ARDS損傷的修復仍是亟待解決的課題。除引起ALI外LPS可誘發(fā)內(nèi)毒素血癥,造成感染性休克、多器官損害及功能衰竭,而心臟是內(nèi)毒素血癥時最常受累器官之一,但內(nèi)毒素血癥心肌損傷及心功能不全的機制并不十分清楚。炎癥與細胞凋亡為感染性休克的重要特征,在所有感染性休克發(fā)生過程中,大約有40%的患者往往伴有不同程度的心功能不全。雖然細菌可被免疫系統(tǒng)或有效的抗生素殺滅,但休克狀態(tài)并不一定能得到有效的改善。LPS釋放入血后,可誘導巨噬細胞、樹突狀細胞釋放TNF-α、IL-1β等炎性因子,并誘發(fā)細胞凋亡。間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal Stem Cells, MSCs)是潛在多能的一類細胞,缺乏特定的細胞標記系它們的體內(nèi)特征。MSCs或MSCs樣細胞可源于骨髓、脂肪、臍帶血、胎盤組織、肌腱和骨骼肌,骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BM-MSCs)有旁分泌、免疫調(diào)節(jié)和多向分化的特征,在免疫性疾病治療、創(chuàng)傷后的修復以及組織的再生等過程中有積極的作用,BM-MSCs具有調(diào)節(jié)免疫、抑制細胞凋亡、對抗炎癥等作用,既往文獻報道可通過減輕內(nèi)毒素誘發(fā)的ALI來改善肺功能。BM-MSCs移植治療心肌梗死大鼠模型的實驗,能顯著減低動物模型死亡率、縮小梗死面積且心功能恢復更好。然而,較BM-MSCs相比,臍帶間充質(zhì)干細胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSCs)更有易提取、細胞量大、增殖率高等優(yōu)點。血管生成素(Angiopoietin, Ang)是一組分泌型內(nèi)皮細胞特異性生長因子,在血管生成、胚胎發(fā)育及創(chuàng)傷修復等起重要作用,Ang1表達于不同細胞,包括血管周細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞、巨核細胞等,可減輕炎癥反應(yīng)、抑制細胞凋亡及降低血管通透性,維持肺泡毛細血管膜穩(wěn)定而在ALI中發(fā)揮作用,Ang1修飾BM-MSCs后可與MSCs發(fā)揮協(xié)同作用,在抗炎及穩(wěn)定血管內(nèi)膜、減輕血管滲漏方面發(fā)揮了更強的作用。但目前尚無應(yīng)用Ang1基因修飾的人UC-MSCs治療ALI的相關(guān)報道。且有關(guān)于人UC-MSCs-Angl干預(yù)LPS誘發(fā)的心肌損傷及心功能影響的研究,目前尚未有報道。因此,本研究以UC-MSCs作為載體,利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)使其攜帶并高表達Ang1基因,增強UC-MSCs的作用。應(yīng)用UC-MSCs-Ang1植入大鼠ALI模型后,觀察UC-MSCs與UC-MSCs-Ang對ALI大鼠的抗炎修復作用、減輕肺水腫及炎性細胞浸潤、促進干細胞在肺組織的存活,提高ALI大鼠的存活率；研究UC-MSCs-Ang1抑制LPS誘導的心肌損傷炎癥反應(yīng)與心肌細胞凋亡、改善心肌損傷后心臟結(jié)構(gòu)與功能的影響,為膿毒血癥急性心肺損傷的細胞及基因治療提供新的理論依據(jù)。研究目的1.人UC-MSCs分離、培養(yǎng)與鑒定；構(gòu)建攜帶GFP和Ang1基因的慢病毒載體后轉(zhuǎn)染UC-MSCs,并檢測Ang1在轉(zhuǎn)染UC-MSCs中的表達情況。2.建立UC-MSCs-Ang1治療LPS誘導的大鼠ALI實驗方法；觀察Angl基因轉(zhuǎn)染后促進UC-MSCs對LPS所致肺損傷、肺水腫、全身炎癥反應(yīng)、細胞植入率、生存率等的改善作用。3.觀察UC-MSCs-Ang1抑制LPS誘導的心肌損傷炎癥反應(yīng)與心肌細胞凋亡；研究UC-MSCs-Ang1對LPS誘導心肌損傷后心臟結(jié)構(gòu)與功能的影響,為其在心血管疾病中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。研究方法一、人臍帶間充質(zhì)干細胞的生物學特性及Ang1基因修飾UC-MSCs的獲得1. UC-MSCs的分離、培養(yǎng)、擴增無菌條件下將臍帶組織塊采用貼壁法培養(yǎng)原代纖維樣細胞,以后傳代培養(yǎng)獲得純化的UC-MSCs,5代以后細胞用來后續(xù)試驗。2. UC-MSCs的形態(tài)及免疫表型檢測通過倒置顯微鏡及HE染色觀察細胞形態(tài)。使用流式細胞儀鑒定CD44、CD45、 CD29、CD31,CD34、CD133、CD90、CD105等細胞表面標識的表達。3. UC-MSCs誘導分化能力的鑒定第5代對數(shù)生長的MSCs,在約60%融合時,分別加入成骨誘導培養(yǎng)基、脂肪誘導培養(yǎng)基,2周后進行細胞化學染色鑒定。4.Ang1基因的獲取與克隆4.1 Angl引物的設(shè)計：在美國國家生物技術(shù)信息中心(NCBI)的核苷酸數(shù)據(jù)庫中檢索查詢?nèi)搜苌伤?(NM＿001146)全長mRNA序列,設(shè)計兩端帶有BamH1和Sal I酶切位點的引物。4.2 RT-PCR擴增：取正常新鮮人臍帶MSCs,采用Trizol方法提取總RNA,以設(shè)計的引物進行RT-PCR擴增人Angl cDNA。Trizol法提取肺組織總RNA,RT-PCR技術(shù)檢測mRNA的表達水平。4.3克隆載體的構(gòu)建：以T4DNA連接酶將PCR產(chǎn)物與TOPO TA克隆載體連接,將Ang1轉(zhuǎn)入TOPO載體,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞,經(jīng)藍白斑篩選,挑選陽性克隆進行擴增并提取質(zhì)粒DNA,雙酶切及測序驗證。5.含有Ang1基因的慢病毒包裝、收獲及轉(zhuǎn)染效率的測定6.攜帶GFP和Ang1基因的慢病毒感染UC-MSCs后,熒光顯微鏡觀察熒光表達；轉(zhuǎn)染72小時后流式細胞學檢測MSCs中GFP表達、Western-Blot檢測MSCs中Ang1蛋白表達。7.統(tǒng)計學分析：所有數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析。二、血管生成素1修飾人臍帶間充質(zhì)干細胞減輕脂多糖誘導的大鼠急性肺損傷1.LPS誘導大鼠急性肺損傷模型的建立與分組選擇SD大鼠125只,隨機分為5組：對照組、LPS組、Fibroblast組、空載MSCs組、MSCs-Ang1組,按照10mg/kg體重腹腔內(nèi)注射LPS,制造急性肺損傷模型,LPS誘導大鼠ALI之后2h開始體內(nèi)干預(yù)實驗,空載MSCs組尾靜脈注射含5×105空載MSCs的生理鹽水0.3ml, Fibroblast組尾靜脈注射含5×105人成纖維細胞(MRC-5細胞系)的生理鹽水0.3ml, MSCs-Angl組尾靜脈注射含5×105MSCs-Angl的生理鹽水0.3ml其余兩組注射等量生理鹽水。2.分別于造模后6h、24h、48h、8d、5d每組處死3-5只大鼠,收集血清、肺組織,進行常規(guī)病理切片、支氣管肺泡灌洗液等標本。3.檢測肺組織濕干重比、支氣管肺泡灌洗液中中性粒細胞計數(shù)及肺組織髓過氧化物酶活性的檢測、HE染色觀察肺組織的病理改變及肺損傷嚴重程度病理評分。4. ELISA法檢測血清中TNF-α、TGF-β1、IL-6、IL-10的蛋白含量。5.MSCs-Ang1在損傷肺組織的遷徙和植入的檢測熒光顯微鏡檢測GFP+細胞評估肺組織中外源性MSCs-Ang1細胞在肺組織的分布及植入率。RT-PCR檢測GFP mRNA表達評價外源性MSCs-Ang1細胞在肺組織的植入情況。6.生存分析5組健康SD大鼠(每組10只)用于生存實驗,計算生存率并繪制生存曲線。7.統(tǒng)計學分析所有數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析。三、血管生成素1修飾人臍帶間充質(zhì)干細胞改善脂多糖誘導的大鼠左室心肌重塑與功能1.心電圖在造模后6h、24h、48h、8d、15d描記肢體導聯(lián)(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL、aVF)心電圖,觀察各組大鼠心臟電活動情況并記錄。2.超聲心動圖分別在不同時間點,行心臟超聲測定：左室收縮末內(nèi)徑(LVIDs)、左室舒張末內(nèi)徑(LVIDd)、左室短軸縮短率(FS)以及射血分數(shù)(LVEF)。3. Millar導管檢測心功能參數(shù)處死大鼠之前,麻醉后,于左心尖部用注射器10ml的針頭,插入Milllar導管電極,獲得心血管相關(guān)參數(shù),左室舒張末壓(LVEDP)、左室收縮壓(LVSP),左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt)、左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dt),導出數(shù)據(jù)、分析資料。4.血清學指標檢測分別在不同時間點處死大鼠后收集血清,ELISA方法測血清學cTnI、 NT-proBNP.5.病理學檢測心肌處死動物后取心肌組織石蠟包埋切片常規(guī)HE染色,及透射電鏡觀察。石蠟切片行免疫組化法檢測凋亡細胞百分比數(shù)、左室心肌組織TNF-α、IL-6和RIP3的表達。6.實時定量RT-PCR基因水平檢測Trizol法提取心肌組織總RNA, RT-PCR技術(shù)檢測TNF-α、IL-6、RIP3和Caspase-3 mRNA表達水平。RT-PCR檢測GFP mRNA表達評價外源性MSCs-Angl細胞在心肌組織的植入情況。7. Western Blot檢測提取總蛋白,Western-Blot檢測左室心肌組織內(nèi)炎性因子TNF-α, IL-6,凋亡相關(guān)RIP3、Cleaved Caspase-3和Caspase-3蛋白表達。8.統(tǒng)計學分析所用數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析。研究結(jié)果一、人臍帶間充質(zhì)干細胞的生物學特性及Angl基因修飾UC-MSCs的獲得1.培養(yǎng)、鑒定MSCs人類臍帶血中,MSCs大量擴增,形態(tài)成纖維細胞樣,經(jīng)流式細胞儀,分析表明臍帶MSCs可表達CD29、CD90及CD105,不表達CD31、CD45、CD34、CD133；2.誘導分化及鑒定誘導1周后,向脂肪細胞分化的MSCs油紅O染色陽性,見有脂滴形成;誘導2周后,ALP染色(+),茜素紅染色提示細胞內(nèi)鈣沉積；原本梭形的MSCs呈現(xiàn)變寬平,逐漸分化為成骨細胞。3.慢病毒表達載體的收獲及轉(zhuǎn)染效率經(jīng)酶切將Ang1基因序列經(jīng)克隆入慢病毒-載體pGC-LV-GV287-GFP,將pGC-LV-GV287-GFP-Angl及兩元件pHelper 1.0、pHelper 2.0分別提取、重組質(zhì)粒,共轉(zhuǎn)染、包裝293T細胞,獲得pGC-LV-GV287-GFP-Ang1,經(jīng)超速離心濃縮法后,取到濃縮液。按梯度法稀釋后,再熒光滴度法,測滴度2×108TU/ml,接種后加入實驗組感染復數(shù)為8的pGC-LV-GV287-GFP-Angl,并設(shè)pGC-LV-GV287-GFP空載作為對照以鑒定。移去病毒懸液后GFP于第24小時開始表達,細胞內(nèi)可觀察到明顯的熒光,轉(zhuǎn)染36h后收集細胞進行Western-Blot檢測目的蛋白表達,可以觀察到57KD附近處有特征條帶。4.收獲Angl基因修飾的UC-MSCs以攜帶GFP報告基因和Ang1基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染MSCs,通過熒光顯微鏡觀察GFP的表達評估轉(zhuǎn)染率,第72小時表達最顯著為約95%或更高,通過流式細胞儀檢測GFP陽性細胞率97.4%,同時經(jīng)Western-Blot檢測分析Ang1的表達,于轉(zhuǎn)染72小時可見Ang1蛋白顯著表達(P0.05)。二、Angl修飾人UC-MSCs減輕脂多糖誘導的大鼠急性肺損傷1.ALI后肺組織病理學變化及肺損傷評分腹腔注射LPS 6h后,肺組織病理HE染色表現(xiàn)為明顯的毛細血管擴張充血,中性粒細胞明顯增多、滲出,并于48h達到高峰,同時出現(xiàn)一些小的膿腫及肺大皰。在LPS注射后的各個時間點,MSCs組和MSCs-Angl組肺損傷評分均降低(P0.05),其中第24h、48h、8d時MSCs-Angl組的肺損傷評分顯著低于MSCs組(P0.05)。Fibroblast注射組沒有改善病理形態(tài)學和肺損傷評分。2.支氣管肺泡灌洗液中性粒細胞數(shù)量及肺組織MPO活性于24h和48h MSCs-Angl組與MSCs組相比,支氣管肺泡灌洗液中性粒細胞的數(shù)量顯著減少(P0.01-0.05),在第8d、15d MSCs-Angl組的中性粒細胞數(shù)接近正常對照組。同時,造模24h之后,MSCs-Angl組與MSCs相比MPO活性均明顯降低(P0.05)。3.肺組織濕干重比LPS組肺組織濕干重比升高(P0.05),在ALI造模48h、8d, MSCs-Angl組與MSCs相比肺組織濕干比明顯降低(P0.01-0.05)。4. ELLISA檢測細胞因子促炎介質(zhì)TNF-α、IL-6、TGF-β1的血清濃度的升高,證實了LPS造成了顯著的急性全身性炎癥反應(yīng)。MSCs-Angl的植入減輕了這些炎癥因子的升高(P0.01-0.05)。 LPS同樣引起各時間段抗炎因子IL-10血漿濃度的升高,在24h、48h與MSCs組相比,MSCs-Ang1組IL-10濃度顯著升高(P0.01-0.05)5. MSCs-Angl在損傷肺組織的遷徙和植入的檢測熒光顯微鏡觀察移植后第8d, GFP+細胞在MSCs-Ang1組肺組織切片中陽性率大于MSCs組。此外,肺損傷嚴重的區(qū)域GFP+細胞的數(shù)量高于損傷輕的區(qū)域(P0.05)。經(jīng)RT-PCR檢測ALI后第8d MSCs-Angl組表達GFP mRNA高于空載MSCs組(P0.05),LPS組及Fibroblast組幾乎沒有GFP mRNA表達。實驗證實轉(zhuǎn)染的外源性Ang1促進MSCs的植入和存活。6.生存分析MSCs-Ang1治療組15d生存率明顯高于單純MSCs組,分別為70%和50%(P0.05)。三、Angl修飾人臍帶間充質(zhì)干細胞改善脂多糖誘導的大鼠左室心肌重塑1.心電圖LPS組部分心電圖異常表現(xiàn),可見QRS波形電交替、心動過速、心動過緩等各種復雜心律失常；MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后,未見明顯復雜心律失常減少,提示MSCs-Ang1可部分改善心電活動。2.超聲心動圖左心結(jié)構(gòu)的改變左心腔室大小,實驗初,各組之間LVIDs及LVIDd均無顯著性差異(P0.05)；實驗15d,LPS組與對照組比較,LVIDd均擴大(P0.05)；與LPS組比較,MSCs與MSCs-Ang1干預(yù)組LVIDd均減小,MSCs-Ang1干預(yù)組減小(P0.05)；左心收縮功能改變實驗初,各組大鼠間FS和LVEF的變化均無顯著差異(P0.05)。實驗15d,LPS組與對照組比較,FS、LVEF均不同程度降低(P0.01-0.05)；與LPS組比較,MSCs與MSCs-Angl干預(yù)組FS、LVEF均不同程度升高,MSCs-Angl干預(yù)組明顯改善(P0.01-0.05)。3. Millar導管測左心功能實驗?zāi)?與對照組比較,LPS組LVSP明顯下降(P0.01)、LVEDP升高(P0.01)、±dp/dt max絕對值降低(P0.01-0.05),48h-8d小時均明顯；與LPS組比較,MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后的兩組,LVSP在MSCs-Angel干預(yù)后升高明顯(P0.05),+dp/dt max (mmHg/s)均升高(P0.05)。與LPS組比較,兩干預(yù)組LVEDP均不同程度下降(P0.01-0.05),-dp/dt max (mmHg/s)絕對值升高(P0.05)。提示MSCs-Angl干預(yù)后對左室收縮功能顯著改善。4.血清學指標檢測與對照組比較,24h時LPS組cTnI水平開始上升并有差異,48h時cTnI水平達到高峰,48h-8d持續(xù)升高,提示心肌損傷較重,但MSCs與MSCs-Ang1干預(yù)后較LPS組有顯著差異(P0.05),8d時cTnI水平較前減低,15d時明顯減低,心肌損傷明顯好轉(zhuǎn)。NT-proBNP水平,與對照組比較,24h時LPS組NT-proBNP水平開始上升并有差異,48h時NT-proBNP水平達到高峰,48h-8d持續(xù)升高,提示心肌損傷較重的同時,心臟功能明顯降低,但MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后較LPS組有顯著差異(P0.05),8d-15d雖然有降低趨勢,但仍持續(xù)升高,提示雖然心肌損傷好轉(zhuǎn),但是心臟功能減低持續(xù)時間較長,且心功能不易短期較快恢復。5.LPS誘導大鼠左室重塑心肌炎癥、細胞凋亡及MSCs-Angl移植的影響5.1 LPS誘導后大鼠心肌炎癥反應(yīng)及MSCs-Angl移植的影響HE染色：LPS組與正常對照組比較,可見灶性間質(zhì)水腫,心肌纖維斷裂、雜亂排序,間質(zhì)血管淤血,局部粒細胞增多；與LPS組比較,MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后的兩組,病理情況有所改善。MSCs-Angl移植影響LPS誘導大鼠心肌炎性因子TNF-α、IL-6的表達免疫組織化學檢測TNF-α、IL-6的表達：對照組,心肌細胞內(nèi)少量、稀疏淺棕顆粒;LPS組胞漿見較多深棕顆粒,MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后的兩組與LPS組相比,見棕色顆粒分布呈現(xiàn)散在且稀、疏,減少。Western-Blot檢測TNF-α、IL-6蛋白的表達：LPS組TNF-αΟIL-6表達明顯增高(P0.01)。經(jīng)MSCs與MSCs-Ang1干預(yù)后,與LPS組比較,可見心肌組織TNF-α、IL-6蛋白表達呈不同程度的下降(P0.05)。5.2 LPS誘導大鼠心肌組織細胞凋亡及MSCs-Ang1移植的影響電鏡觀察凋亡細胞：LPS組顯示線粒體排列紊亂,明顯增多、腫脹,部分線粒體溶解、嵴斷裂,部分肌絲斷裂；MSCs與MSCs-Ang1干預(yù)后,與LPS組相比,各種病變均有所減輕,MSCs-Ang1干預(yù)較MSCs更明顯改善。TUNEL染色觀察：較對照組,LPS組左室凋亡細胞陽性率顯著增加(P0.01)。MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后與LPS組相比,細胞凋亡率明顯減少(P0.01)。MSCs-Angl移植抑制心肌細胞凋亡相關(guān)RIP3、Caspase-3表達(1)凋亡相關(guān)RIP3表達免疫組化染色：較對照組,LPS組RIP3棕黃色陽性顆粒表達增加,且分布在細胞核周圍較多,MSCs與MSCs-Ang1兩組與LPS組比較,細胞內(nèi)棕黃色陽性顆粒表達減少,且MSCs-Ang1注射后,棕黃色顆粒明顯減少。Western-Blot檢測RIP3蛋白表達：較對照組,LPS組表達顯著增高(P0.01)；但MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后,與LPS組比較,RIP3蛋白表達不同水平降低(P0.01-0.05)。(2)凋亡相關(guān)Caspase-3表達Western-Blot檢測Cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白比值表達：LPS組與對照組比較,比值顯著增高(P0.01)；但MSCs與MSCs-Angl干預(yù)后,與LPS組比較,比值不同水平降低(P0.01-0.05)。6. GFP mRNA表達外源性MSCs-Angl細胞在心肌組織植入情況檢測在移植后第48h、8d MSCs-Angl組的GPF mRNA表達顯著高于空載MSCs,有統(tǒng)計學意義(P0.05)；而在早期MSCs-Angl組的GPFmRNA表達也高于空載MSCs但無統(tǒng)計學意義。移植后第24h、48h、8d,3組細胞RT-PCR檢測GPFmRNA表達增加(P0.05),均提示Angl能促進MSCs在損傷后的心肌組織存活與植入。研究結(jié)論1.人臍帶中可分離培養(yǎng)大量穩(wěn)定增殖的MSCs,其細胞表型穩(wěn)定,存在向成骨、脂肪細胞等多向分化能力,利用病毒轉(zhuǎn)染技術(shù),首次將攜帶GFP報告基因和Ang1基因的慢病毒載體高效的轉(zhuǎn)染人臍帶MSCs。2.轉(zhuǎn)染于臍帶間充質(zhì)干細胞的Ang1基因可通過減少中性粒細胞肺部浸潤及MPO活性減輕肺水腫等明顯改善LPS誘發(fā)的肺損傷、減輕LPS引起的全身炎癥反應(yīng)；提高了干細胞向炎性損傷肺組織的遷徙和植入。3.LPS可導致大鼠心肌重塑及左心功能障礙,UC-MSCs-Angl干預(yù)后,可抑制損傷心肌組織中炎癥因子及凋亡相關(guān)基因的表達,不同程度降低血清中cTnI、含量,提示抑制損傷心肌組織的炎癥反應(yīng)與細胞凋亡,顯著降低LPS誘導大鼠的LVEDP和-dp/dt max,增加LVEF和+dp/dt max。提示改善左心室功能。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R563.8

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8 唐佩弦;;間充質(zhì)干細胞及其臨床應(yīng)用前景[A];第三屆全國血液免疫學學術(shù)大會論文集[C];2003年

9 戴育成;;間充質(zhì)干細胞的生物學特性和應(yīng)用[A];2005年華東六省一市血液病學學術(shù)會議暨浙江省血液病學學術(shù)年會論文匯編[C];2005年

10 胡琳莉;王昕榮;錢坤;李舟;楊薇;朱桂金;;小鼠間充質(zhì)干細胞向子宮內(nèi)膜分化的實驗研究[A];第一屆中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會、中國動物學會生殖生物學分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 滿學杰;天津濱海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2008年

3 第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細胞研究又見新方法[N];健康報;2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學院健康科學研究所 曹楷;間充質(zhì)干細胞：干細胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�;2014年

5 記者　陳建強;首家間充質(zhì)干細胞庫在津建成[N];光明日報;2006年

6 記者　馮國梧;細胞產(chǎn)品國家工程中心建設(shè)方案獲準[N];科技日報;2007年

7 實習生 劉霞;間充質(zhì)干細胞有望用于面部整形[N];科技日報;2007年

8 本報記者 王新佳;我國“原始間充質(zhì)干細胞”注射液進入臨床研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導報;2005年

9 馮國梧;全球首個臍帶間充質(zhì)干細胞庫規(guī)模化運營[N];科技日報;2008年

10 劉瑩清;全球首個臍帶間充質(zhì)干細胞庫泰達規(guī)模運營[N];北方經(jīng)濟時報;2008年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 王皓;五指山小型豬OCT-4、SOX-2基因在骨髓間充質(zhì)與臍帶間充質(zhì)干細胞中的過表達研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2013年

2 孔德曉;間充質(zhì)干細胞及胰島素分泌細胞治療糖尿病的臨床及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];山東大學;2015年

3 董苑;SDF-1復合PDPBB的構(gòu)建及對間充質(zhì)干細胞趨化影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

4 王磊;誘導胎盤來源間充質(zhì)干細胞向成牙骨質(zhì)細胞分化的實驗研究[D];山東大學;2015年

5 房賀;連接黏附分子A在促進MSC修復CC14肝損傷中的作用及其機制[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

6 陳潔;間充質(zhì)干細胞外泌體對急性肺損傷小鼠的影響及相關(guān)機制的實驗研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

7 許婷;轉(zhuǎn)化生長因子β1在蟑螂過敏原誘導的哮喘中對間充質(zhì)干細胞募集遷移的影響[D];南方醫(yī)科大學;2015年

8 周雅麗;攜氧間充質(zhì)干細胞對胃癌化療效果的影響及其機制研究[D];蘭州大學;2015年

9 沈舒寧;CKIP-1負調(diào)控間充質(zhì)干細胞成骨分化研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

10 姚惟琦;脂肪來源間充質(zhì)干細胞治療急性腎損傷[D];武漢大學;2015年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 李超;小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞中AC基因亞型的表達及AC3對其纖毛長度的影響[D];河北大學;2015年

2 林濤;殼聚糖水凝膠復合脂肪間充質(zhì)干細胞修復兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實驗研究[D];川北醫(yī)學院;2015年

3 彭龍英;心肌營養(yǎng)素1促進人臍血間充質(zhì)干細胞神經(jīng)分化存活及PI3K/Akt信號通路機制研究[D];遵義醫(yī)學院;2015年

4 喬曉慧;酸性環(huán)境對人臍帶間充質(zhì)干細胞的影響[D];內(nèi)蒙古大學;2015年

5 張紅霞;人臍帶間充質(zhì)干細胞的分離、鑒定及其對人肺癌細胞惡性表型的影響[D];內(nèi)蒙古大學;2015年

6 顧立超;BTK抑制劑對間充質(zhì)干細胞miR-21的調(diào)節(jié)作用[D];河北聯(lián)合大學;2014年

7 王文杰;鴨胚間充質(zhì)干細胞生物學特性及其移植修復肝損傷研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

8 張猛;血管內(nèi)皮前體細胞對間充質(zhì)干細胞分化潛能的影響[D];石河子大學;2015年

9 馬麗媛;利用MyoD基因誘導綿羊臍帶間充質(zhì)干細胞分化為成肌細胞的研究[D];東北林業(yè)大學;2015年

10 宋維文;MicroRNA-133誘導綿羊間充質(zhì)干細胞分化為成肌細胞的研究[D];東北林業(yè)大學;2015年

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本文編號：1633500